标准解读
《GB/T 33409-2016 β-半乳糖苷酶活性检测方法 分光光度法》是一项国家标准，规定了通过分光光度法测定β-半乳糖苷酶活性的具体方法。该标准适用于食品、饲料及其原料中β-半乳糖苷酶活性的测定。
根据此标准，β-半乳糖苷酶活性的测定基于底物对硝基苯-β-D-半乳吡喃糖苷（pNPG）在酶的作用下分解生成对硝基苯酚（pNP），后者在碱性条件下呈黄色，在特定波长下有最大吸收峰，通过测量其吸光度值来间接反映酶活性大小。具体步骤包括样品处理、酶反应、终止反应以及比色测定等几个关键环节。
首先，需将待测样品进行适当处理，以释放其中可能存在的β-半乳糖苷酶；然后，在一定条件下使酶与底物pNPG充分作用，产生pNP；接着使用NaOH溶液停止酶促反应，并同时使生成的pNP显色；最后利用紫外可见分光光度计于405nm处测定吸光度值。通过比较不同浓度的标准品所获得的吸光度曲线，可以计算出样品中β-半乳糖苷酶的具体活性单位。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2016-12-30 颁布
- 2017-07-01 实施
©正版授权
文档简介
ICS7104030 G 66 . . 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T334092016-半乳糖苷酶活性检测方法 分光光度法 Determinationoftheactivityofbeta-galactosidaseSpectrophotometricmethod2016-12-30发布 2017-07-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 GB/T334092016 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。本标准由全国生化检测标准化技术委员会 提出并归口 (SAC/TC387) 。本标准起草单位 深圳市计量质量检测研究院 中国测试技术研究院 : 、 。本标准主要起草人 张世伟 周李华 赖心田 陈血建 唐栋 洪晓明 王珍妮 杨国武 : 、 、 、 、 、 、 、 。 GB/T334092016 -半乳糖苷酶活性检测方法 分光光度法 1 范围 本标 准 规 定 了 乳 酸 克 鲁 维 酵 母 Klu verom ceslactis 脆 壁 克 鲁 维 酵 母 Klu verom ces ( y y )、 ( y yrailis 马克斯克鲁维酵母 Klu verom cesmarxianus 脆壁酵母 Saccharom ces railis 大肠f g )、 ( y y )、 ( y f g )、 杆菌 Escherichiacoli 米曲霉 Aspergillusoryzae 黑曲霉 Aspergillusniger 发酵生产的 半乳 ( )、 ( )、 ( ) - 糖苷酶活性检测方法 。 本标准适用于生化试剂 工业酶制剂中 半乳糖苷酶活性的测定 、 - 。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 。 , ( ) 。 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T6682 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。31 . -半乳糖苷酶活性单位 beta-galactosidaseactivityunit 在规定的反应条件下 每分钟催化转化一个微摩尔邻硝基苯 半乳糖苷的酶量 , -D- 。4 原理 半乳糖苷酶能迅速催化邻硝基苯 半乳糖苷生成邻硝基苯酚和半乳糖 通过吸光度值的变化 - -D- , 得出邻硝基苯酚的生成量计算出酶活 。5 仪器设备及器具 51 计 精确至 . pH : 0.01pH。52 分析天平 感量 . : 0.0001g。53 紫外 可见分光光度计 波长准确度 吸光度值精确至 . - : 1nm, 0.001。54 石英比色皿 . 1cm 。55 恒温水浴槽 控温精
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