DNA 的粗提取和物理性状观察的实验教学.doc

dna的粗提取和物理性状观察的实验教学郭文仪张治刘成钢国家教委新编制的全日制普通高中生物教学大纲不久将正式启用。新大纲最显著的变化是明显加大了实验实践课分量（约占总课时31.4%），其中dna的粗提取与鉴定也改为学生必修实验。在地方教材（上海版）生物中，原来的课外实验dna的粗提取和物理性状观察也顺应新大纲要求改为学生实验，这无疑具有重要意义。然而，由于本实验操作难度大，教学中存在较多问题，笔者经过反复对照实验后，就本实验的教学与各位同行交流一下心得。1实验的基本原理1.1 实验用鸡血细胞作材料，一是因为鸡血细胞核dna含量丰富，材料易得；再者，鸡血细胞很易吸水胀破，而以往的用动物肝细胞作材料常常需要匀浆和离心，操作繁琐，历时较长，不适合上45分钟的实验课。对于大多数中学而言可能没有匀浆机、离心机等，更是勉为其难。1.2 真核生物dna以核蛋白形式存在，dna核蛋白溶于水或等浓度的盐溶液（如12摩尔的nacl等）而不溶于稀盐液（如 0.14摩尔的nacl等），故可利用它在不同浓度盐液中的溶解度差异，获得dna粗制品。1.3 核酸浓缩采用乙醇沉淀法。乙醇可以脱色、除脂等，在中等浓度单价阳离子（2摩尔nacl）存在下，加入乙醇易使dna形成沉淀。实验一般要求采用预冷的95%的乙醇，但对比结果显示，常温下的乙醇溶液也可产生明显效果。从理论上分析，用预冷的乙醇溶液其优越性可体现在以下方面：一是抑制核酸水解酶活性，防止降解；二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；三是低温有利于增加 dna分子柔韧性，减少断裂。2 实验中常出现的问题 对于高中生来说，本实验是较为复杂的生化实验，在操作中常常产生不能形成粘稠物，制取的dna粗制品有红色（血红蛋白的颜色），或由于加入溶液和搅拌过程不科学导致实验现象不明显等现象。3 操作时要注意的细节或值得改进的地方3.1 实验过滤时用两层纱布效果较好。因为单层纱布网孔较大，容易使破碎的细胞膜、一些细胞器（如线粒体），甚至整个细胞都漏下去。有条件的实验室最好用绢布。3.2 本实验两次加水作用不同。前者是为了胀破血细胞，不要求很小心，可用玻璃棒搅拌，加速细胞破裂。而后者是为了使dna析出故应该缓慢贴壁加入，并轻轻地均匀搅拌，以利于析出和形成粘稠物。在搅拌时应该朝一个方向，不要乱搅。因为这样不利于dna分子的附着和缠绕。3.3 在加水降低nacl溶液浓度使dna析出的过程中，应控制加水量，使nacl终浓度在0.10.2摩尔之间，在0.14摩尔nacl溶液中dna溶解度最小。一般分三次加水，边加边搅拌，总加水量在300毫升左右时，dna已基本析出。加水太多，溶液过稀又会使dna分子重新溶解。3.4 在加入95%乙醇溶液时，也宜沿壁缓慢加入，并用玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌。3.5 若dna粘稠物较少，也可以用筷子等表面粗糙的棒，以利于dna分子缠绕。3.6 在染色时要先用吸水纸吸干水分。在载玻片上染色，冲洗时易被水流冲去，如果直接对缠绕在玻璃棒上的dna进行染色，冲洗不易被冲掉，且方便直观。3.7 为了证明所提取的是dna，可引导学生作对照实验，如再做孚尔根染色，或用脱脂棉进行染色，然后再放在细水流下冲洗。学生会发现玻璃棒上的dna冲去浮色后仍是蓝绿色，而脱脂棉的颜色可以被冲得非常淡，甚至无色，从而培养学生的科学思维和科学态度。3.8 在dna物理性状观察时，要注意引导学生比较其在溶液中和固体时的区别，引导学生观察和总结其物理性状。（摘自生物学教学1998，11）我的大学爱情观1、什么是大学爱情：大学是一个相对宽松，时间自由，自己支配的环境，也正因为这样，培植爱情之花最肥沃的土地。大学生恋爱一直是大学校园的热门话题，恋爱和学业也就自然成为了大学生在校期间面对的两个主要问题。恋爱关系处理得好、正确，健康，可以成为学习和事业的催化剂，使人学习努力、成绩上升；恋爱关系处理的不当，不健康，可能分散精力、浪费时间、情绪波动、成绩下降。因此，大学生的恋爱观必须树立在健康之上，并且树立正确的恋爱观是十分有必要的。因此我从下面几方面谈谈自己的对大学爱情观。2、什么是健康的爱情：1) 尊重对方，不显示对爱情的占有欲，不把爱情放第一位，不痴情过分；2) 理解对方，互相关心，互相支持，互相鼓励，并以对方的幸福为自己的满足; 3) 是彼此独立的前提下结合；3、什么是不健康的爱情：1)盲目的约会，忽视了学业;2)过于痴情，一味地要求对方表露爱的情怀，这种爱情常有病态的夸张;3)缺乏体贴怜爱之心，只表现自己强烈的占有欲;4)偏重于外表的追求;4、大学生处理两人的在爱情观需要三思：1. 不影响学习：大学恋爱可以说是一种必要的经历，学习是大学的基本和主要任务，这两者之间有错综复杂的关系，有的学生因为爱情，过分的忽视了学习，把感情放在第一位；学习的时候就认真的去学，不要去想爱情中的事，谈恋爱的时候用心去谈，也可以交流下学习，互相鼓励，共同进步。2. 有足够的精力：大学生活，说忙也会很忙，但说轻松也是相对会轻松的！大学生恋爱必须合理安排自身的精力，忙于学习的同时不能因为感情的事情分心，不能在学习期间，放弃学习而去谈感情，把握合理的精力，分配好学习和感情。3、 有合理的时间；大学时间可以分为学习和生活时间，合理把握好学习时间和生活时间的“度”很重要；学习的时候，不能分配学习时间去安排两人的在一起的事情，应该以学习为第一；生活时间，两人可以相互谈谈恋爱，用心去谈，也可以交流下学习，互相鼓励，共同进步。5、大学生对爱情需要认识与理解，主要涉及到以下几个方面：（1） 明确学生的主要任务“放弃时间的人，时间也会放弃他。”大学时代是吸纳知识、增长才干的时期。作为当代大学生，要认识到现在的任务是学习学习做人、学习知识、学习为人民服务的本领。在校大学生要集中精力，投入到学习和社会实践中，而不是因把过多的精力、时间用于谈情说爱浪费宝贵的青春年华。因此，明确自己的目标，规划自己的学习道路，合理分配好学习和恋爱的地位。（2） 树林正确的恋爱观提倡志同道合、有默契、相互喜欢的爱情：在恋人的选择上最重要的条件应该是志同道合，思想品德、事业理想和生活情趣等大体一致。摆正爱情与学习、事业的关系：大学生应该把学习、事业放在首位，摆正爱情与学习、事业的关系，不能把宝贵的大学时间，锻炼自身的时间都用于谈情说有爱而放松了学习。 相互理解、相互信任，是一份责任和奉献。爱情是奉献而不时索取，是拥有而不是占有。身边的人与事时刻为我们敲响警钟，不再让悲剧重演。生命只有一次，不会重来，大学生一定要树立正确的爱情观。（3） 发展健康的恋爱行为 在当今大学校园，情侣成双入对已司空见惯。抑制大学生恋爱是不实际的，大学生一定要发展健康的恋爱行为。与恋人多谈谈学习与工作，把恋爱行为限制在社会规范内，不致越轨，要使爱情沿着健康的道路发展。正如马克思所说：“在我看来，真正的爱情是表现在恋人对他的偶像采取含蓄、谦恭甚至羞涩的态度，而绝不是表现在随意流露热情和过早的亲昵。”（4） 爱情不是一件跟风的事儿。很多大学生的爱情实际上是跟风的结果，是看到别人有了爱情，看到别人幸福的样子（注意，只是看上去很美），产生了羊群心理，也就花了大把的时间和精力去寻找爱情（5） 距离才是保持爱情之花常开不败的法宝。爱情到底需要花多少时间，这是一个很大的问题。有的大学生爱情失败，不是因为男女双方在一起的时间太少，而是因为他们在一起的时间太多。相反，很多大学生恋爱成功，不是因为男女双方在一起的时间太少，而是因为他们准确地把握了在一起的时间的多少程度。（6） 爱情不是自我封闭的二人世界。很多人过分的活在两人世界，对身边的同学，身边好友渐渐的失去联系，失去了对话，生活中只有彼此两人；班级活动也不参加，社外活动也不参加，每天除了对方还是对方，这样不利于大学生健康发展，不仅影响学习，影响了自身交际和合作能力。总结：男女之间面对恋爱，首先要摆正好自己的心态，树立自尊、自爱、自强