生物实验室安全常识（废液处理篇） 生物实验室安全常识（废液处理篇 ....docxVIP

生物实验室安全常识（废液处理篇） 生物实验室安全常识（废液处理篇） 编者按：我们的生物实验室存在多少危险？生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害？实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多？这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康，或者环境带来长远的影响，因此生物通网站联合遗传、中国生物工程杂志、生命世界杂志开展2007赛默飞世尔中国生物实验室安全现状调查活动，提出警示，珍惜生命！此次活动的现状调查报告将发于相关部门，提出宝贵意见的读者将有机会获得精美礼品。实验室的污染主要有生物性污染和化学污染两种。如按形态分则可大致分为废水、废气和固体污染物三种。其中生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染，如血液、尿、粪便、各种电泳液、特种生物 编者按：我们的生物实验室存在多少危险？生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害？实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多？ 这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康，或者环境带来长远的影响，因此生物通网站联合遗传、中国生物工程杂志、生命世界杂志开展2007赛默飞世尔中国生物实验室安全现状调查活动，提出警示，珍惜生命！此次活动的现状调查报告将发于相关部门，提出宝贵意见的读者将有机会获得精美礼品。实验室的污染主要有生物性污染和化学污染两种。如按形态分则可大致分为废水、废气和固体污染物三种。其中生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染，如血液、尿、粪便、各种电泳液、特种生物试剂等。而化学污染则包括有机物污染和无机物污染。除此以外，还有部分实验室存在放射性污染。在此次赛默飞世尔中国生物实验室安全调查活动中，从现有调查结果中，我们惊讶的发现许多生物实验室存在严重的污染问题，而其中又以废液废品的处理为最，大部分实验室在进行生物实验过程中产生的大量高浓度含有害微生物的培养液、培养基，未经适当的灭菌处理而直接外排，而且许多实验室的下水道与附近居民的下水道相通，污染物通过下水道形成交叉污染，最后流入河中或者渗入地下，时间长了将造成不可估量的危害。由于目前虽然国家环保总局将各类实验室纳入环保监管范围，但是许多实验室仍然处于监控真空状态，缺乏规章制度、缺乏实验室污染控制的经费投入、缺乏对实验室的监管等各种原因导致了实验室成为了污染源，对环境造成了威胁，这些种种都需要社会各界的共同关注。生物实验室产生的废液污染主要是化学性污染和生物性污染，另外还有放射性污染，化学性污染包括有机物污染和无机物污染。有机物污染主要是有机试剂污染和有机样品污染。在大多数情况下，实验室中的有机试剂并不直接参与发生反应，仅仅起溶剂作用，因此消耗的有机试剂以各种形式排放到周边的环境中，排放总量大致就相当于试剂的消耗量。日复一日，年复一年，排放量十分可观。有机样品污染包括一些剧毒的有机样品，如农药、苯并()芘、黄曲霉毒素、亚硝胺等。无机物污染有强酸、强碱的污染，重金属污染，氰化物污染等。其中汞、砷、铅、镉、铬等重金属的毒性不仅强，且有在人体中有蓄积性。 生物性污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染。生物废弃物有检验实验室的标本，如血液、尿、粪便、痰液和呕吐物等；检验用品，如实验器材、细菌培养基和细菌阳性标本等。生物实验室的通风设备设计不完善或实验过程个人安全保护漏洞，会使生物细菌毒素扩散传播，带来污染，甚至带来严重不良后果。2003年非典流行肆虐后，许多生物实验室加强对sas病毒的研究，之后报道的非典感染者，多是科研工作者在实验室研究时被感染的。在对这些污染处理的时候，需要注意以下几个方面： 废液的浓度超过规定的浓度时，必须进行处理。但处理设施比较齐全时，往往把废液的处理浓度限制放宽。 最好先将废液分别处理，如果是贮存后一并处理时，虽然其处理方法将有所不同，但原则上要将可以统一处理的各种化合物收集后进行处理。 处理含有络离子、螯合物之类的废液时，如果有干扰成份存在，要把含有这些成份的废液另外收集。下面所列的废液不能互相混合：过氧化物与有机物；氰化物、硫化物、次氯酸盐与酸；盐酸、氢氟酸等挥发性酸与不挥发性酸；浓硫酸、磺酸、羟基酸、聚磷酸等酸类与其它的酸；铵盐、挥发性胺与碱。 要选择没有破损及不会被废液腐蚀的容器进行收集。将所收集的废液的成份及含量，贴上明显的标签，并置于安全的地点保存。特别是毒性大的废液，尤要十分注意。 对硫醇、胺等会发出臭味的废液和会发生氰、磷化氢等有毒气体的废液，以及易燃性大的二硫化碳、乙醚之类废液，要把它加以适当的处理，防止泄漏，并应尽快进行处理。 含有过氧化物、硝化甘油之类爆炸性物质的废液，要谨慎地操作，并应尽快处理。 含有放射性物质的废弃物，用另外的方法收集，并必须严格按照有关的规定，严防泄漏，谨慎地进行处理。另外不同种类的废液等污染也要进行不同的处理：一、化学类废物 一般的有毒气体可通过通风橱或通风管道，经空气稀释排出。大量的有毒气体必须通过与氧充分燃烧或吸收处理后才能排放。 废液应根据其化学特性选择合适的容器和存放地点，通过密闭容器存放，不可混合贮存，容器标签必须标明废物种类、贮存时间，定期处理。一般废液可通过酸碱中和、混凝沉淀、次氯酸钠氧化处理后排放，有机溶剂废液应根据性质进行回收。 1.含汞废液的处理 排放标准3：废液中汞的最高容许排放浓度为0.05mg/l(以hg计)。 处理方法：硫化物共沉淀法：先将含汞盐的废液的ph值调至8-10，然后加入过量的na2s，使其生成hgs沉淀。再加入fes04(共沉淀剂)，与过量的s2-生成fes沉淀，将悬浮在水中难以沉淀的hgs微粒吸附共沉淀然后静置、分离，再经离心、过滤，滤液的含汞量可降至0.05mg/l以下。2 还原法：用铜屑、铁屑、锌粒、硼氢化钠等作还原剂，可以直接回收金属汞。 2.含镉废液的处理 氢氧化物沉淀法：在含镉的废液中投加石灰，调节ph值至10.5以上，充分搅拌后放置，使镉离子变为难溶的cd(oh)2沉淀分离沉淀，用双硫腙分光光度法检测滤液中的cd离子后(降至0.1mg/l以下)，将滤液中和至ph值约为7，然后排放。 离子交换法：利用cd2+离子比水中其它离子与阳离子交换树脂有更强的结合力，优先交换 3.含铅废液的处理 在废液中加入消石灰，调节至ph值大于11，使废液中的铅生成pb(oh)2沉淀然后加入al2(s04)3(凝聚剂)，将ph值降至7-8，则pb(oh)2与al(oh)3共沉淀，分离沉淀，达标后，排放废液。4.含砷废液的处理 在含砷废液中加入fecl3，使feas达到50，然后用消石灰将废液的ph值控制在8-10。利用新生氢氧化物和砷的化合物共沉淀的吸附作用，除去废液中的砷。放置一夜，分离沉淀，达标后，排放废液。5. 含酚废液的处理 酚属剧毒类细胞原浆毒物，处理方法：低浓度的含酚废液可加入次氯酸钠或漂白粉煮一下，使酚分解为二氧化碳和水。如果是高浓度的含酚废液，可通过醋酸丁酯萃取，再加少量的氢氧化钠溶液反萃取，经调节ph值后进行蒸馏回收处理后的废液排放。 6. 综合废液处理 用酸、碱调节废液ph为3-4、加入铁粉，搅拌30min，然后用碱调节p h为9左右，继续搅拌10min，加入硫酸铝或碱式氯化铝混凝剂、进行混凝沉淀，上清液可直接排放，沉淀于废渣方式处理。 二、生物类废物 生物类废物应根据其病源特性、物理特性选择合适的容器和地点，专人分类收集进行消毒、烧毁处理，日产日清。 液体废物一般可加漂白粉进行氯化消毒处理。固体可燃性废物分类收集、处理、一律及时焚烧。固体非可燃性废物分类收集，可加漂白粉进行氯化消毒处理。满足消毒条件后作最终处置。 1.一次性使用的制品如手套、帽子、工作物、口罩等使用后放入污物袋内集中烧毁。 2.可重复利用的玻璃器材如玻片、吸管、玻瓶等可以用1000-3000mg/l有效氯溶液浸泡2-6h然后清洗重新使用，或者废弃。 3.盛标本的玻璃、塑料、搪瓷容器可煮沸15min.或者用1000mg/l有效氯漂白粉澄清液浸泡2-6h，消毒后用洗涤剂及流水刷洗、沥干；用于微生物培养的，用压力蒸汽灭菌后使用。4.微生物检验接种培养过的琼脂平板应压力灭菌30min，趁热将琼脂倒弃处理。 5.尿、唾液、血液等生物样品，加漂白粉搅拌后作用2-4h，倒入化粪池或厕所。或者进行焚烧处理。 三、放射性废弃物 一般实验室的放射性废弃物为中低水平放射性废弃物，将实验过程中产生的放射性废物收集在专门的污物桶内，桶的外部标明醒目的标志，根据放射性同位素的半衰期长短，分别采用贮存一定时间使其衰变和化学沉淀浓缩或焚烧后掩埋处理。 1.放射性同位素的半衰期短(如：碘131、磷32等)的废弃物，用专门的容器密闭后，放置于专门的贮存室，放置十个半衰期后排放或者焚烧处理。 2.放射性同位素的半衰期较长(如：铁59、钻60等)的废弃物，液体可用蒸发、离子交换、混凝剂共沉淀等方法浓缩，装入容器集中埋于放射性废物坑内。除了这些需要注意的事项以外，处理废液等污染也需要一些安全可靠的产品，目前国际上公认的安全废液处理，回收等方面的产品来自赛默飞世儿公司，这在之前驻外观察员特稿美国与加拿大生物实验室废弃物处置 文中也可以看出来。这些废液处理小器具包括： 生物实验室安全性常识（化学药品篇） 谁来为生物实验室安全性负责？2007中国生物实验室安全现状调查活动拉开帷幕生物通编者按：我们的生物实验室存在多少危险？生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害？实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多？这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康，或者环境带来长远的影响，因此生物通网站联合遗传、中国生物工程杂志、生命世界杂志开展2007中国生物实验室安全现状调查活动，提出警示，珍惜生命！此次活动的现状调查报告将发于相关部门，提出宝贵意见的读者将有机会获得生物通精美礼品。生物实验中发生的一些化学反应十分激烈，因此在整个实验过程中潜伏着发生各种意外的因素，实验人员在思想上要重视， 谁来为生物实验室安全性负责？ 2007中国生物实验室安全现状调查活动拉开帷幕生物通编者按：我们的生物实验室存在多少危险？生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害？实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多？这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康，或者环境带来长远的影响，因此生物通网站联合遗传、中国生物工程杂志、生命世界杂志开展2007中国生物实验室安全现状调查活动，提出警示，珍惜生命！此次活动的现状调查报告将发于相关部门，提出宝贵意见的读者将有机会获得生物通精美礼品。生物实验中发生的一些化学反应十分激烈，因此在整个实验过程中潜伏着发生各种意外的因素，实验人员在思想上要重视，需具备必要的实验中化学试剂安全知识。化学药品大致分为二类，一类是具有刺激性腐蚀性药物，一类是有毒化学药品。（1）毒物某些侵入人体的少量物质引起局部刺激或整个机体功能障碍的任何疾病都称为中毒，这类物质称为毒物。根据毒物侵入的途径，中毒分为摄入中毒、呼吸中毒和接触中毒。接触中毒和腐蚀性中毒有一定区别，接触中毒是通过皮肤进入皮下组织，不一定立即引起表面的灼伤，腐蚀性中毒是使接触它的那一部分组织立即受到伤害。毒物的剂量与效应之间的关系称为毒物的毒性，习惯上用半致死剂量（ld50）或半致死浓度（lc50）作为衡量急性毒性大小的指标，将毒物的毒性分为剧毒、高毒、中等毒、低毒、微毒五级。上述分级未考虑其慢性毒性及致癌作用，我国国家标准gb 5044-85职业性接触毒物危害程度分级根据毒物的ld50值、急慢性中毒的状况与后果、致癌性、工作场所最高允许浓度等6项指标全面权衡，将毒物的危害程度分为1-级。（2）刺激性腐蚀性药物这类药物有的有刺激性，对眼睛、粘膜、气管有刺激作用，腐蚀损害皮肤、组织，对眼睛非常危险。轻微引起喉痛、粘膜红肿（有的催泪）；重者引起气管炎、肺气肿，甚至死亡。这类药物包括：酸类、酸酐及与潮气产生酸的物质。例如硫酸、氟氢酸、硝酸、盐酸、五氧化二磷、醋酸、醋酸酐、酰氯化合物等。兹将强腐蚀性药物介绍如下：（a）硫酸 是强腐蚀性酸类，吸水力强，使组织碳化，与水反应生强热；与过氯酸、高锰酸钾反应，能爆炸！（b）氟氢酸 强腐蚀性酸，伤口异常疼痛，可使体弱伤者疼至休克。（c）硝酸及氧化氮 强刺激性、腐蚀性，与皮肤或组织中蛋白质作用使之变黄。碱类：如氢氧化钠、氢氧化钾、氨水（氨气）、有机胺类及水解生成氨之化合物。前三者对眼睛特别危险。卤素及有机-卤代物。除具有强刺激性、腐蚀性外，还有催泪性并且是强氧化剂。（3）有毒化学药品我们指那些吸入微量即能致死的化学药品是剧毒药品，水银及汞盐、氰化物（氰氢酸、氰化钾等）、硫化氢、砷化物、一氧化碳、马钱子碱等等都是剧毒药品。其他毒物也是很危险的。有毒药品对人体的作用，使组织器官受伤；现将他们的毒性列於下面：使窒息：如一氧化碳与红血球结合而中毒，氰化物与血液结合而使中毒，硫化氢使呼吸器官麻庳而中毒。硫化氢的毒性不比氰化氢低，但它有味，使人警觉，立即采取措施，或离开，如吸多了，就不觉臭味，反而带甜味，十分危险。扰乱人体内部生理、损坏器官，这类毒药引起系统性中毒，而且每种毒物有其损害的对象。如苯深入骨髓，损害造血器官，结果引起患者全身无力、贫血、白血球低等等；卤代烷使肝肾及神经受损害，钡盐损害骨骼，汞盐损害大脑中枢神经等等。麻醉作用：乙醚、氯仿等。过敏性药物：引起某些人的过敏反应，最常见的是接触性皮炎。致癌性药物。我们已经知道很多药物是致癌性的。像铅、汞、铍、镉等长期接触能导致癌症。尤以下述化合物为最：（a）石棉。（b）苯并芘等稠环化合物，存在於沥青、烟道（烟囱）灰中，烟叶燃烧亦有苯并芘生成。扫烟道灰工人和吸烟的人肺癌发病率很高。（c）联苯胺、-萘胺等染料中间体，长期接触，膀胱癌发病率高，固此在英国、日本，美国的许多州的法律亦严禁生产和使用联苯胺和-萘胺。在医学化验所检查潜血仍用联苯胺，工作人员应特别小心。（d）第二级亚硝胺：现在医学上已证明第二级亚硝胺的致癌率是很高的， 有些地方性的癌症是由於该地居民喜食某种含有亚硝胺的食物或水源有亚硝胺。实验室使用亚硝胺或合成亚硝胺时应特别注意。（e）某些染料：如二甲基黄等。其他致癌性药物很多，由於篇幅所限，不能在此一一枚举。放射性药物：严重损坏器官，使细胞遗传基因改变。应注意：实验操作：（1）遇到危险或不安全操作时：经常考虑是否有安全些的操作，用较安全操作代替危险操作。例如在选用溶剂方面，优先考虑毒性较小的乙醇、丙酮、石油醚；用较安全的二氯甲烷、乙醇代替剧毒的苯、氯仿、四氯化碳等等。在实验室制造氧气用较安全的双氧水法代替氯酸钾法。很多实验室喜用水银封搅拌；其实用硅油（或其他润滑剂）封的针筒式磨口密封搅拌安全而密封性能良好，很易用针筒改装的。（2）搅拌均匀，防止局部反应：有些激烈反应，如不及时搅拌，放出热量积聚于局部，局部反应愈来愈迅速、猛烈，而发生危险。控制这种反应，最好使用高速搅拌，外部冷却。（3）控制反应温度：温度愈高，反应愈快。每升高十度，反应速度约增加二倍左右。一般选用溶剂（沸点固定），使反应局限于该溶剂的沸点附近。此外，用加料速度，外冷等手段控制反应温度。（4）注意诱导反应后，再正常加料：很多化学反应，尤其是有机反应，物料混合后，即使加热，也不立即起反应，但一旦发生反应，就很猛烈，易造成事故。对这类反应，大多数控制加料，先加料少量，加热诱起反应。如无反应，勿大量加料，只能再加少量料，直到诱起反应以后，再正常慢慢加料，连续反应。（5）整个实验过程，密切注意观察和记录反应现象：许多反应，在出意外之前，都有些先兆，如温度上升、压力增高、冒白烟等等，使许多有经验的人，及时观察，避开去，或者早已准备措施在手。发现了危险先兆，可以采取紧急措施，如关火、冷却，内部加冰、加水降温至反应温度以下等。（6）操作要注意不让有害气体逸出：可回流的冷却回流，可吸收的吸收。注意冷凝效率和吸收效率。用安全的密闭操作，代替开口操作。试剂储存：所有药品都有明显标签，标明药品名称、质量规格及来货日期；最好还有危险性质的明显标志。标签日久会受腐蚀气体损坏，甚至全部剥落，如果不及时换新标签，就会变成无名物，有误用的危险。 注上来货日期，或制造日期，对於易变质物可以正确判定应否销毁。分类存放，互相作用药品不能混放，必须隔离存放。易燃物、易爆物及强氧化剂只能少量存放。贮存室或药柜必须保持整齐清洁。经常检查药品瓶子或其他包装完整情况，标签是否完整，有无其他危险潜伏。无名物、变质物要及时清理销毁。危险药物分类存放的原则及存放要求：易挥发药品：远离热源火源，于避光阴凉处保存，通风良好，不能装满。这类药品多属一级易燃物、有毒液体。对这类药品贮存要加以特别注意，最好保存在防爆冰箱内，家庭冰箱指示灯、恒温控制开关、马达起动都可能打火，因此使用家庭冰箱时，不要联接内指示灯，并将冰箱放在宽阔通风良好处，这样冷冻机排出的热气便易於散开。 大量易燃物存放室应隔离建造，或在一楼，符合易燃物建筑标准。 存放易燃物的地方应挂有易燃物标志和不准吸烟的牌子。 存放易燃物室内应通风良好，但是室内不应有排风扇。 存放附近应有灭口器材及处理洒出药物的器材。腐蚀性液体：放於底下，以免不慎跌下，洒出发生烫伤事故。发生有毒气体或烟雾的药品：存於通风橱中。剧毒药品：锁上。致癌药品：有致癌药品的明显标志，锁上。互相作用的药品：隔离存放。特别保存的物品：金属钠、钾等碱金属，贮於煤油中。黄磷，贮於水中。上述两种药物，很易混淆，要隔离贮存。苦味酸，湿保存，要时常检查是否放干了。镁、铝（粉末或条片），避潮保存，以免积聚易燃易炸氢气。吸潮物、易水解物，贮於干燥处，封口应严密。易氧化易分解物，存於阴凉暗处，用棕色瓶或瓶外包黑纸盛装。但双氧水不要用棕色瓶（有铁质促使分解）装，最好用塑胶瓶装外包黑纸。放射性物品未经幅射物质管理部门批准，不得存放使用！不能混放的药品：凡能互相起化学作用的药品都要隔离，对那些互相反应产生危险物、有害气体、火焰或爆炸等危险的药品，尤其要特别注意。下述几类是必须隔离的药品：氧化剂与还原剂及有机物等不能混放。强酸尤其是硫酸忌与强氧化剂的盐类（如高猛酸钾、氯酸钾等）混放；与酸类反应发生有害气体的盐类（如氰化钾、硫化钠、亚硝酸钠、氯化钠、亚硫酸钠等等），不能与酸混放。易水解的药品（如醋酸酐、乙酰氯、二氯亚砜等等）忌水、酸及碱。引发剂忌单体混放。潮湿保存。卤素（氟、氯、溴、碘）忌氨、酸及有机物。氨忌与卤素、汞，次氯酸、酸类及汞等接触。许多有机物忌氧化剂、硫酸、硝酸及卤素。两种药品互相反应，放出有害或剧毒气体。化学危险品废物的处理：凡是具有毒性、腐蚀性、强氧化性、强还原性、自燃性、恶臭的物质及其溶液，以及易爆、易燃物质均为化学危险品。如在实验中经常接触和使用的碱金属、金属氢化物、有机金属化合物、毒性气体、氰化物、酰卤、重氮化合物、硝基化合物、n-亚硝胺、过氧化物、毒性有机膦化物、氯磺酸、发烟硫酸、汞、重金属盐皆属危险品之列。这些危险品一旦成为实验后的废物，必须及时妥善处理或销毁，以免造成意外事故。小常识： 凡有害或有刺激性气体发生的实验应在通风柜内进行，加强个人防护，不得把头部伸进通风柜内。 腐蚀和刺激性药品，如强酸、强碱、氨水、过氧化氢、冰醋酸等，取用时尽可能带上橡皮手套和防护眼镜，倾倒时，切勿直对容器口俯视，吸取时，应该使用橡皮球。开启有毒气体容器时应带放毒用具。禁用裸手直接拿取上述物品。 不使用无标签（或标志）容器盛放的试剂、试样。 实验中产生的废液、废物应集中处理，不得任意排放；酸、碱或有毒物品溅落时，应及时清理及除毒。 往玻璃管上套橡皮管（塞）时，管端应烧圆滑，并用水或甘油浸湿橡皮管（塞）内部，用布裹手，以防玻璃管破碎割伤手。尽量不要使用薄壁玻管。 若不慎将浓酸和浓碱溅在身体上，用水彻底冲洗表面直到皮肤上无残留的化合物为止。肥皂有利于去除化合物。若不慎少量溅在实验台和地面，必须及时用湿抹布擦洗干净，换掉所用被污染的衣服，在更换过程中小心再次被污染。 1. dmso dmso是二甲基亚砜， 用途广泛。用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂。是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。对皮肤有极强的渗透性，有助于药物向人体渗透。也可作为农药的添加剂。也是一种十分重要的化学试剂; dmso也是一种渗透性保护剂，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性; 但是研究表明，dmso存在严重的毒性作用，与蛋白质疏水集团发生作用，导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性. dmso是毒性比较强的东西，用的时候要避免其挥发，要准备1%-5%的氨水备用，皮肤沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗涤. 最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤、和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。 吸入： 高挥发浓度可能导致头痛，晕眩和镇静。 皮肤： 能够灼伤皮肤并使皮肤有刺痛感，如同所见的皮疹及水泡一样。若二甲基亚砜与含水的皮肤接触会产生热反应。要避免接触含有毒性原料或物质的二甲基亚砜溶液，因其毒性不为人所知，而二甲基亚砜却可能会渗入肌肤，在一定条件下会将有毒物质代入肌肤。 吸收： 吸收危险性很低。 2. eb eb（ethidium bromide，溴化乙锭）溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的dna。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号，观察琼脂糖凝胶中dna最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色，溴化乙锭含有一个可以嵌入dna堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与dna的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与dna结合的染料呈现荧光，其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。dna吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-dna复合物的荧光产率比没有结合dna的染料高出20-30倍，所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5ug/ml）时，可以检测到少至10ng的nda条带。溴化乙锭可以嵌入碱基分子中，导致错配。溴化乙锭是强诱变剂，具有高致癌性！会在6070度是蒸发，（所以最好不要在胶太热的时候加，或者应该加到液体里，0.5ug/ml，染色半小时，）（当eb加得过多时，也可以在室温用水将已染色的凝胶浸泡20min以降低未结合的eb引起的背景荧光） 溴化乙锭溶液的净化处理 ：由于溴化乙锭具有一定的毒性，实验结束后，应对含eb的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害人体健康。 (1) 对于eb含量大于0.5mg/ml的溶液，可如下处理： 将eb溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml； 加入一倍体积的0.5mol/l kmno4，混匀，再加入等量的25mol/l hcl，混匀，置室温数小时； 加入一倍体积的2.5mol/l naoh，混匀并废弃。 (2) eb含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理： 按1mg/ml的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时； 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。 3. depc depc即二乙基焦碳酸酯（diethylprocarbonate），可灭活各种蛋白质，是rna酶的强抑制剂。depc是一种潜在的致癌物质，在操作中应尽量在通风的条件下进行，并避免接触皮肤。depc毒性并不是很强，但吸入的毒性是最强的，使用时戴口罩。不小心占到手上注意立即冲洗， rnase awaytm试剂可以替代depc，操作简单，价格低，且无毒性。只需将rnase awaytm直接倒在玻璃器皿和塑料器皿的表面，浸泡后用水冲洗去除，即可以快速去除器皿表面的rnase，并且不会残留而干扰后继实验。 4. 丙烯酰胺 属中等毒性物质。可通过皮肤吸收及呼吸道进入人体，因此，在搬运和使用中必须穿戴好防护用具，如防毒服，防毒口罩及防毒手套等。丙烯酰胺的危害主要是引起神经毒性，同时还有生殖、发育毒性。神经毒性作用表现为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化，试验还显示丙烯酰胺是一种可能致癌物，职业接触人群的流行病学观察表明，长期低剂量接触丙烯酰胺会出现嗜睡、情绪和记忆改变、幻觉和震颤等症状，伴随末梢神经病如手套样感觉、出汗和肌肉无力。 累积毒性，不容易排毒。 具备以下任何一项者，可列为慢性丙烯酰胺中毒观察对象: a.接触丙烯酰胺的局部皮肤出现多汗、湿冷、脱皮、红斑; b.出现肢端麻木、刺痛、下肢乏力、嗜睡等症状; c.神经-肌电图显示有可疑神经源性损害。 治疗原则 可用b族维生素、能量合剂，并辅以体疗、理疗及对症治疗。重度中毒者应同时加强支持疗法。 5. nn-亚甲双丙烯酰胺 有毒，影响中枢神经系统，切勿吸入粉末。 6. dtt 二硫苏糖醇 很强的还原剂，散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中操作。 7 .temed 强神经毒性,防止误吸,操作时快速,存放时密封. 8. pmsf：苯甲基磺酰氟(pmsf)，c7h7fo2s或c6h5ch2so2f是一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常大的破坏性。可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。戴合适的手套和安全眼镜，始终在化学通风橱里使用。在接触到的情况下，要立即用大量的水冲洗眼睛或皮肤，已污染的工作服丢弃掉。 9. 氯仿(chcl3) 对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用。它是一种致癌剂，可损害肝和肾。它也易挥发，避免吸入挥发的气体。操作时戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。 10. 甲醛(hcoh) 有很大的毒性并易挥发，也是一种致癌剂。很容易通过皮肤吸收，对眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和损伤作用。避免吸入其挥发的汽雾。要戴合适的手套和安全眼镜。始终在化学通风橱内进行操作。远离热、火花及明火。 11. 吉姆萨(giemsa) 染料咽下可致命或引起眼睛失明，通过吸入和皮肤吸收是有毒的。其可能的危险是不可逆的效应。戴合适的手套和安全护目镜。在化学通风橱里操作，不要吸入其粉末。 12. 叠氮钠(nan3) 毒性非常大。它阻断细胞色素电子运送系统。含有叠氮钠的溶液要标记清楚。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜，操作时要格外小心。 13. 十二烷基硫酸钠(sds) 有毒，是一种刺激物，并造成对眼睛的严重损伤的危险。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜。不要吸入其粉末。 14. 三氯乙酸(tca) 有很强的腐蚀性。戴合适的手套和安全防目镜。 15. triton x-100引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和护目镜。 16. 过硫酸铵(nh4)2s2o8对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命。操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作，操作完后彻底洗手。 17. trizol 含有毒物质苯酚，如皮肤接触trizol，请立即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不适，请听取医生意见。如果只是少量接触，并处理后症状减轻，估计问题就不大了。 18. 紫外光或紫外线 可损伤眼视网膜。切勿用裸眼和没有防护装置的紫外光源。在实验室里常用的紫外光源包括手提式紫外灯和紫外透射仪。只能通过吸收有害波长的滤片或安全玻璃片才能观察。紫外线也是诱变剂和致癌的。为使暴露减少到最低限度，确保紫外光源要采用适当防护装置。在紫外光下操作时要戴合适的预防性手套。 还要注意酒精灯的使用！小心着火！危害： 1. 腐蚀性化学药品会损伤或烧毁皮肤。 2. 有些易燃化学危险品在一些日常动作如：开关电源、穿脱衣服时即会引起燃烧或爆炸。 3. 配制、使用化学药品不当可能引起爆炸或者液体飞溅。 4. 随意倾倒化学废液会导致环境污染。 预防： 1. 使用化学药品前，要详细查阅有关该化学药品使用说明，充分了解化学品的物理和化学特性。 2. 严格遵照操作规程和使用方法进行使用，避免对自己和他人造成危害。 3. 佩戴合适的个人保护器具，在通风橱中操作实验。 4. 实验中，不得擅自离开岗位。 5. 了解化学药品的使用、保存、安全处理和废弃的程序。 6. 清楚你工作的地方所用的危害性物质，了解它们对身体健康造成的危害，注意采取相应的预防措施。 7. 从事化学类有毒有害物质的工作可享受适当级别的营养保健。 8. 清楚当接触到化学危险品产生的损伤时所要采用的应急措施并有所准备。 9. 化学危险品使用过程中一旦出现事故，应及时采取相应控制措施，并及时向有关老师和部门报告。 在化学实验中，经常使用各种化学药品和仪器设备，以及水、电、煤气，还会经常遇到高温、低温、高压、真空、高电压、高频和带有辐射源的实验条件和仪器，若缺乏必要的安全防护知识，会造成生命和财产的巨大损失。因此实验室必须按四防（防火、防盗、防破坏、防治安灾害事故）要求，建立健全以室主要负责人为主的各级安全责任人的安全责任制和各种安全制度，加强安全管理。1.重要规定：1.1穿著规定：1. 进入实验室，必须按规定穿戴必要的工作服。2. 进行危害物质、挥发性有机溶机、特定化学物质或其它环保署列管毒性化学物质等化学药品操作实验或研究，必须要穿戴防护具（防护口罩、防护手套、防护眼镜）。3. 进行实验中，严禁戴隐形眼镜。（防止化学药剂溅入眼镜而腐蚀眼睛）4. 需将长发及松散衣服妥善固定且在处理药品之所有过程中需穿著鞋子。5. 操作高温之实验，必须戴防高温手套。1.2饮食规定：1.避免在实验室吃喝食物且使用化学药品后需先洗净双手方能进食。2.严禁在实验室内吃口香糖。3.食物禁止储藏在储有化学药品之冰箱或储藏柜。1.3药品领用、存储及操作相关规定：1.操作危险性化学药品请务必遵守操作守则或遵照老师操作流程或进行实验；勿自行更换实验流程。2. 领取药品时，该确认容器上标示中文名称是否为需要的实验用药品。3. 领取药品时，请看清楚药品危害标示和图样；是否有危害。4. 使用挥发性有机溶剂、强酸强碱性、高腐蚀性、有毒性之药品请必定要在特殊排烟柜及桌上型抽烟管下进行操作。5. 有机溶剂，固体化学药品，酸、碱化合物均需分开存放，挥发性之化学药品更必需放置于具抽气装置之药品柜。6.高挥发性或易于氧化之化学药品必需存放于冰箱或冰柜之中。7.避免独自一人在实验室做危险实验。8.若须进行无人监督之实验，其实验装置对于防火、防爆、防水灾都须有相当的考虑，且让实验室灯开着，并在门上留下紧急处理时联络人电话及可能造成之灾害。9. 做危险性实验时必须经实验室主任批准，有两人以上在场方可进行，节假日和夜间严禁做危险性实验。10. 做有危害性气体的实验必须在通风橱里进行。11. 做放射性、激光等对人体危害较重的实验，应制定严格安全措施，做好个人防护。12.请将废弃药液或过期药液或废弃物必须依照分类标示清楚，药品使用后之废（液）弃物严禁倒入水槽或水沟，应例入专用收集容器中回收。1.4用电安全相关规定：1. 实验室内的电气设备的安装和使用管理，必须符合安全用电管理规定，大功率实验设备用电必须使用专线，严禁与照明线共用，谨防因超负荷用电着火。2. 实验室用电容量的确定要兼顾事业发展的增容需要，留有一定余量。但不准乱拉乱接电线。3. 实验室内的用电线路和配电盘、板、箱、柜等装置及线路系统中的各种开关、插座、插头等均应经常保持完好可用状态，熔断装置所用的熔丝必须与线路允许的容量相匹配，严禁用其他导线替代。室内照明器具都要经常保持稳固可用状态。4.可能散布易燃、易爆气体或粉体的建筑内，所用电器线路和用电装置均应按相关规定使用防爆电气线路和装置。5.对实验室内可能产生静电的部位、装置要心中有数，要有明确标记和警示，对其可能造成的危害要有妥善的预防措施。6. 实验室内所用的高压、高频设备要定期检修，要有可靠的防护措施。凡设备本身要求安全接地的，必须接地；定期检查线路，测量接地电阻。自行设计、制做对已有电气装置进行自动控制的设备，在使用前必须经实验室与设备处技术安全办公室组织的验收合格后方可使用。自行设计、制做的设备或装置，其中的电气线路部分，也应请专业人员查验无误后再投入使用。7.实验室内不得使用明火取暖，严禁抽烟。必须使用明火实验的场所，须经批准后，才能使用。8.手上有水或潮湿请勿接触电器用品或电器设备；严禁使用水槽旁的电器插座（防止漏电或感电）。9. 实验室内的专业人员必须掌握本室的仪器、设备的性能和操作方法，严格按操作规程操作。10. 机械设备应装设防护设备或其它防护罩。11.电器插座请勿接太多插头，以免电荷负荷不了，引起电器火灾。12.如电器设备无接地设施，请勿使用，以免产生感电或触电。1.5压力容器安全规定1. 气瓶应专瓶专用，不能随意改装其它种类的气体；2. 气瓶应存放在阴凉、干燥、远离热源的地方，易燃气体气瓶与明火距离不小于 5 米；氢气瓶最好隔离；3. 气瓶搬运要轻要稳，放置要牢靠；4. 各种气压表一般不得混用；5.氧气瓶严禁油污，注意手、扳手或衣服上的油污；6.气瓶内气体不可用尽，以防倒灌；7.开启气门时应站在气压表的一侧，不准将头或身体对准气瓶总阀，以防万一阀门或气压表冲出伤人。8.搬运应确知护盖锁紧后才进行。9. 容器吊起搬运不得用电磁铁、吊链、绳子等直接吊运。10.厂内移动尽量使用手推车，务求安稳直立。11. 以手移动容器，应直立移动，不可卧倒滚运。12.用时应加固定，容器外表颜色应保持显明容易辨认。13. 确认容器之用途无误时方得使用。14. 每月检查管路是否漏气。15. 查压力表是否正常。1.6环境卫生1. 各实验室应注重环境卫生，并须保持整洁。2. 为减少尘埃飞扬，洒扫工作应于工作时间外进行。3. 有盖垃圾桶应常清除消毒以保环境清洁。4.垃圾清除及处理，必须合乎卫生要求应按指定处所倾倒，不得任意倾倒堆积影响环境卫生。5.凡有毒性或易燃之垃圾废物，均应特别处理，以防火灾或有害人体健康。6. 窗面及照明器具透光部份均须保持清洁。7. 保持所有走廊、楼梯通行无阻。8. 油类或化学物溢满地面或工作台时应立即擦拭冲洗干净。9. 养成使用人员有随时拾捡地上杂物之良好习惯，以确保实习场所清洁。10. 垃圾或废物不得堆积于操作地区或办公室内。11. 工业消防用水，应与饮用水分别由不同放于一定处所。12. 盥洗室、厕所、水沟等应经常保持清洁。2.安全防护2.1防火1. 防止煤气管、煤气灯漏气，使用煤气后一定要把阀门关好；2.乙醚、酒精、丙酮、二硫化碳、苯等有机溶剂易燃，实验室不得存放过多，切不可倒入下水道，以免集聚引起火灾；3. 金属钠、钾、铝粉、电石、黄磷以及金属氢化物要注意使用和存放，尤其不宜与水直接接触；4. 万一着火，应冷静判断情况，采取适当措施灭火；可根据不同情况，选用水、沙、泡沫、co2 或 ccl4 灭火器灭火。2.2防爆2.1化学药品的爆炸分为支链爆炸和热爆炸1. 氢、乙烯、乙炔、苯、乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、一氧化碳、水煤气和氨气等可燃性气体与空气混合至爆炸极限，一旦有一热源诱发，极易发生支链爆炸；2.过氧化物、高氯酸盐、叠氮铅、乙炔铜、三