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文档简介
红细胞和白细胞计数 医学检验系 一、红细胞计数 l目的 掌握显微镜手工计数的方法。 l原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,冲 入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红 细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数 。 一、红细胞计数 l器材 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管 、移液管、洗耳球 l试剂 生理盐水 l标本 EDTA抗凝血 6 操作 l1 加稀释液 取小试管1支,加红细胞稀释液2ml。 l2 加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10l,擦去管外余血,轻 轻加至红细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管23次,立即 混匀。 l3 充池 混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池,室温下平放 35分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。 l4 计数 用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的 红细胞数。 5计算 红细胞/L=N25/510106200=N1010 =N/1001012 注意事项 1. 将红细胞稀释液充入计数池时要一次完成 ,不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。 2. 红细胞在计数池中若分布不均,每个中方 格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。 正常数值范围内,2次红细胞计数相差不得超 过5%。 二、白细胞计数 l目的 掌握显微镜白细胞计数的方法。 l原理 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数, 同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数 池后,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数 ,经换算求出每升血液中的白细胞数。 l器材 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管 、移液管、洗耳球 l试剂 白细胞稀释液 l标本 EDTA抗凝血 二、白细胞计数 l1.加稀释液 用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管 中。 l2.加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20l,擦去管外 余血,轻轻加至白细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗 吸管23次,混匀。 l3.充池 混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细胞悬液 冲入计数池,室温下平放35分钟,待细胞下沉后于显 微镜下计数。 l 4. 计数 用低倍镜依次计数4个大方格内的白细胞数。 l 5.计算 红细胞/L=N/41010620=N/20109/L 操作 l 1.在充池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池 不足及充液后玻片移动的现象。 l 2.白细胞在计数池中若分布不均,大方格间细胞计数 相差一般不超过10%。 l 3.白细胞数量过多时,可采取加大稀释倍数的方法。 l 4.白细胞稀释液不能破坏有核红细胞,它可使白细胞 计数偏高,此时应计算白细胞校正值。 注意事项 l作业 l1.本次实验的关键环节是什么? l2. 假定某
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