医学系毕业论文【论文设计】.doc

本科生毕业论文（设计）题目 肾移植患者普乐可复血药浓度与多药耐药基因 MDR1 C3435T多态性的关系 学生姓名 罗佳（Ud0101225） 指导教师 聂新民 学 院 湘雅医学院医学检验系 专业班级 医学检验系2001级01班 完成时间 2006年6月 中南大学本科生毕业论文题 目：肾移植患者他克莫司血药浓度与多药耐药基因MDR1 C3435T多态性的关系学生姓名：罗佳指导老师：聂新民（副教授）学 院：湘雅医学院医学检验系专 业：医学检验专业2001级实习单位：中南大学湘雅附三医院检验科完成时间：2006年6月本毕业论文受如下课题资助：湖南省科技厅科技计划重大项目（03GZ3072）中国博士后科学基金(2004035206)国家自然科学基金（30300383）中南大学本科生毕业论文（设计）任务书及成绩评定表题 目 肾移植患者他克莫司血药浓度与多药耐药基因 MDR1 C3435T多态性的关系 学生姓名 _ 罗佳（Ud0101225） _指导教师 _ 聂新民 _学 院_ 湘雅医学院医学检验系 专业班级_ _ 医学检验系2001级01班 _ _教务处制中 南 大 学毕业论文（设计）任务书毕业论文（设计）题目：肾移植病人他克莫司血药浓度和多药耐药基因MDR1 C3435T多态性的关系题目类型 实 验 研 究 题目来源 _ 教 师 科 研 题 毕业论文（设计）时间从 2005年5月8号 至 2006年5月_ 毕业论文（设计）内容要求：本研究是湖南省科技厅科技计划重大项目；中国博士后科学基金；国家自然科学基金。其具体任务和目标是探讨和研究肾移植病人他克莫司（Tacrolimus）血药浓度与多药耐药基因MDRI C345T 多态性的关系。以便于根据MDRI基因不同基因型药物代谢的特点，有针对性的调整临床应用的剂量，将有利于器官移植病人的个体用药，目前，在多药耐药基因MDRI上已发现一些单核苷酸多态性（SNPs）其中一部分可以影响P-糖蛋白的表达和功能，从而影响其药物在人体内血药浓度。到目前为止，研究表明在MDR1第26外显子的3435位点上发生的隐性突变是引起P-糖蛋白在人类组织中表达的多态性的主要原因。本研究旨在探讨他克莫司（Tacrolimus）血药浓度/剂量比个体差异与多药耐药基因MDR1 C3435T多态性的关系。本研究观察66例口服他克莫司（Tacrolimus）的肾移植病人体重、他克莫司（Tacrolimus）剂量及血药浓度，并利用PCR-限制性片段长度多态性的方法检测患者多药耐药基因MDR1 3435位C/T多态性，分析药物浓度/剂量比与基因型的关系。分析病人连续的药理学参数变化时，基因型被认为无条件独立参数，采用非参数统计法分析病人服用他克莫司（Tacrolimus）的日剂量和血药浓度，两组之间比较使用Mann-Whitney U检验，P0.05被认为有统计学意义，最后的论文成稿应在8000字左右，另有一篇3000字左右的文献综述和一篇3000单词以上的译文（与论文相关）。 1题目类型：理论研究实验研究工程设计工程技术研究软件开发2题目来源：(1)教师科研题(2)生产实际题(3)模拟或虚构题(4)学生自选题2.主要参考资料1 Simpson D,Noble S.Tacrolimus ointment a review of its use in atopic dermatitis and its clinical potential in other inflammatory skin conditionsJ. Drugs, 2005, 65(6): 827-58. 2 MacPhee IAM , Fredericks S, Tai T. Tacrolimus pharmacogenetics: polymorphisms associated with expression of cytochrome P4503A5 and P-glycoprotein correlate with dose requirementJ. Transplantation, 2002,74(11): 1486-89. 3 Neylan JF. Racial Differences in renal transplantation after immunosuppression with tacrolimus versus cyclosporineJ. Transplantation, 1998,65(4): 515-23. 4 Frank M, Denton M, Alexander S, et al. Briscoe D: Specific MDR1 P-glycoprotein blockade inhibits human alloimmune T cell activation in vitroJ. J Immunol, 2001,166(4): 2451-59. 5 Hoffmeyer S, Burk O, von Richter O. Functional polymorphisms of the human multidrug-resistance gene: multiple sequence variations and correlation of one allele with P-glycoprotein expression and activity in vivoJ. Proc Natl Acad Sci U S A, 2000, 97(7): 3473-78. 6 Schaeffeler E, Eichelbaum M, Brinkmann U. Frequency of C3435T polymorphism of MDR1 gene in African peopleJ. Lancet, 2001,358(9279):383-84. 7 Putnam WS, Woo JM, Huang Y. Effect of the MDR1 C3435T Variant and P-Glycoprotein Induction on Dicloxacillin PharmacokineticsJ. J Clin Pharmacol,2005 ,45(4):411-21. 8 Cascorbi I, Gerloff T, Johne A. Frequency of single nucleotide polymorphisms in the P-glycoprotein drug transporter MDR1 gene in white subjectsJ. Clin Pharmacol Ther, 2001,69(3): 169-74. 3.毕业论文（设计）进度安排阶段阶 段 内 容起止时间1定题、查阅文献、实验设计05.806.32收集标本、科研实验3.13.213数据整理、结果分析3.274.94论文撰写4.105.285答辩及成绩评定5.296.10指导教师（签名）_ 时间： _教研室(所)主任(签名) _ 时间： _主管院长（签名）_ 时间： _中 南 大 学毕业论文（设计）成绩评定表（一）指导教师评语 罗佳同学在湘雅三医院检验科进行毕业实习及毕业论文工作的过程中，能积极参加科室的日常工作及科研活动，工作认真负责，组织纪律性强，实验思路清晰，学习认真刻苦，具有较强的独立工作能力，善于分析和解决问题，能熟练地应用计算机，具有一定的写作能力与综述能力。罗佳同学毕业论文题目来源于中国博士后科学基金项目，采用分子生物学方法PCR-RFLP检测患者多药耐药基因MDR1 C3435T多态性，分析药物浓度/剂量比与基因型的关系。研究表明MDR1第26位外显子3435位点上的隐性突变是造成血药浓度差异的分子差异原因。该课题选题新颖，具有一定的理论及临床应用价值。科研设计合理，方法先进，所得结果可靠，结论及分析客观可信。罗佳同学毕业论文写作书写规范，格式正确，图表清晰，语句流畅，是一篇优秀的学士学位论文，建议进行本科生毕业论文答辩。 建议成绩：优秀 指导教师 _年_月_日中 南 大 学毕业论文（设计）成绩评定表（二）论文（设计）评阅人评语 该论文选题源于指导老师博士后科学基金，是湖南省科技厅计划重大项目，具有科学性和实用意义。 他克莫司是一种治疗窗狭窄，个体之间效果差异非常大的常见免疫抑制剂。该同学用指导老师提取DNA的标本，抓住不同个体间药物反应和浓度/剂量关系存在的差异，采用PCR-RFLP方法检测C3435T（第26外显子）单核甘酸多态性及其与他克莫司血药浓度/剂量比的关系。结果显示：是有助于选择制定安全有效的用药剂量和药物的最优化治疗的。 该生论文选题新颖、实用，实验设计合理，方法成熟正确，实验数据可信。该生论文写作符合论文书写基本要求，是一篇优秀的本科生毕业论文。 论文（设计） 建议成绩：_优秀_ 评阅人_ _年_月_日 中 南 大 学毕业论文（设计）成绩评定表（三）答辩记录及意见问题：除了论文中提到的MDR1基因，是否还看到过别的有关这方面报道的基因？回答：参考文献中提到另一个基因CYP3A5，它也是编码P-糖蛋白的一个基因，国外的这个研究显示了它的多态性是影响Tacrolimus代谢个体差异性的主要原因。但他们的研究人群仅为高加索人种，且在他们的研究中未发现MDR1在高加索人种中对Tacrolimus代谢产生影响。答辩意见：该同学论文选题新颖，研究方法先进，实验数据可信，统计方法正确，分析讨论全面。该同学答辩流利，回答问题正确，思路清晰。经答辩委员会表决，一致通过答辩，建议授予学士学位。答辩成绩：_优秀_ 答辩委员会（小组）负责人_ _年_月_日 学院领导小组审查意见： 成绩评定：_ 负责人：_ _年_月_日目 录中文摘要1ABSTRACT2缩略词3一 前言 4二 材料和方法621 材料622 方法6221 血标本基因DNA提取6222 多态性鉴定6223血药浓度测定7224 统计学分析7 三 结果831 基因型鉴定83. 2基因型与他克莫司血药浓度/剂量比的关系8四 讨论 10五 结束语12六 参考文献13论文英文版15综 述22肾移植患者他克莫司血药浓度与多药耐药基因MDR1 C3435T多态性的关系中文摘要目的：他克莫司是一种治疗窗狭窄，个体之间治疗效果差异非常大的常见免疫抑制剂。本试验试图探讨肾移植患者他克莫司血药浓度与MDR1基因C3435T多态性的关系。方法：本研究观察了66例口服他克莫司的肾移植患者的体重、他克莫司剂量及血药浓度，并利用PCR限制性片断长度多态性的方法检测患者MDR1基因3435位C/T多态性，分析浓度/剂量比与基因型的关系。结果：发现MDR1基因C3435T多态性与他克莫司血药浓度之间具有相关性，CC型的患者血药浓度低于携带T等位基因的个体（CC或TT型），差异具有统计学意义（P0.05）。结论：根据MDR1基因不同基因型药物代谢的特点，有针对性的调整剂量，将有利于器官移植患者个体化用药治疗。关键词：他克莫司，多药耐药基因，基因多态性Tacrolimus Dosing in Chinese Renal Transplant patientsIs Related to MDR1 Gene C3435T polymorphisms ABSTRACTObjective Tacrolimus is an immunosuppressive drug with narrow therapeutic range and wide interindividual variation in its pharmacokinetics. The aim of this study was to evaluate whether the C3435T polymorphism was associated with tacrolimus concentration /dose ratio or not.Methods Sixty-six Chinese renal transplant patients were enrolled in this study. Their body weight, dosage and concentration of tacrolimus were observed. MDR1 genotype was determined by polymerase chain reaction followed by restriction fragment length polymorphism analysis.Results The result showed that a statistical significance was found between tacrolimus levels per dose/kg/day and MDR1 gene C3435T polymorphism（p0.05）. The CC patients had a low tacrolimus level per dose than the CT/TT patients. Conclusions Pharmacogenetic methods could be employed prospectively to help the dose selection and to individualize immunosuppressive therapy according to the result.KEY WORDS Tacrolimus, Multi-drug resistance gene, Gene polymorphism 缩 略 词MDR1:multi-drug resistance gene多药耐药基因CsA:cyclosporine环孢素AP-gp:P-glycoproteinP-糖蛋白SNP:Single nucleotide polymorphism单核苷酸多态性HGP:Human Genome Program人类基因组计划PCR:Polymerase chain reaction聚合酶链反应RFLP:Restriction fragment length polymorphism限制性片断长度多态性一 前 言 免疫抑制剂在器官移植中起着极其重要的作用。由于众多高效、低毒免疫抑制剂的开发应用,使近年来器官移植的成功率大大提高。1984年,Fujisawa公司从筑波链霉菌的发酵液中分离得到一种新免疫抑制剂。当时实验命名为506,后正式命名他克莫司,商品名为普乐可复(Prograf)。虽然其结构与环孢素A(CsA)迥然不同,但其免疫抑制特性与CsA类似而且效率更强。它的出现,是器官移植的一重要进展1。他克莫司进入细胞后先与受体蛋白FKBP12结合为FK506 FKBP12,此复合物再与钙调磷酸酶高亲和性结合并抑制其活性,最终抑制IL-2的转录,阻断Ca2+依赖性T细胞的活化途径,T细胞因而受到抑制,从而发挥强大的免疫抑制作用2。美国多中心肝脏和肾脏研究显示:他克莫司较CsA在肝移植方面有明显优势,可显著降低急性、耐激素 难治性排斥和慢排的发生。在肾移植方面,他克莫司也较CsA更明显降低急性排斥和耐激素急性排斥,移植肾失功情况较少,而不良反应及感染发生率并未增加。他克莫司一般是口服给药,很少需静脉用药,必要时可鼻胃管给药,主要在小肠吸收,一般全血或血浆浓度在0.56达峰,口服生物利用度约25%。他克莫司的血药浓度可用MEIA法监测,其适宜范围为:术后1个月:(13.02.1) gL-1,23个月:(9.41.6) gL-1,3个月后:(6.51.3) gL-1。他克莫司的代谢主要通过P450酶,凡能抑制该酶活性的药物都可能减少他克莫司的代谢,导致血药浓度增高;反之增加该酶活性的药物均引起他克莫司代谢增加,血药浓度减低3。他克莫司与CsA相比,最大的优势是肝脏毒性小,特别适用于肝功能异常的移植患者以及CsA中毒时的转换治疗和难治性排斥反应。他克莫司的主要不良反应是神经毒性、糖耐量降低和肾功能减退,一般减少剂量后,症状可以缓解。在临床治疗中，病人对相同的药物反应不完全相同，甚至大相径庭，以前认为是个体差异所致。“人类基因组计划”（HGP）的研究表明，这些差异都是由于药物相关基因变异，即单核苷酸多态性(SNP)引起的。事实上，不同个体的表型差异主要在于SNP,由于SNP改变了个体对药物的代谢及药物结合的受体蛋白的特性，因而决定某种药物是否对个体有效，是否会引起不良反应，这对于临床医生按个体化用药有重要的意义。他克莫司是广泛应用于器官移植术后抗免疫排斥反应的一种重要免疫抑制剂4-5，但是其血药浓度显著的个体差异和狭窄的治疗范围是他克莫司在临床应用中的两个重要影响因素6-7。P糖蛋白是多药耐药基因MDR1编码的蛋白，在他克莫司的吸收和代谢中起着重要的作用。MDR1基因多态性影响着P糖蛋白的表达和活性从而影响到他克莫司的吸收和代谢8。目前，临床实践中仍采用传统的经验用药方式，采用这种给药方式，临床医生需要多次调整，才能找到每例患者的合适剂量，而以药物基因组学为基础的靶向治疗则不同，医生可以通过对患者的遗传学状况进行分析后，一开始就可以制订出最佳药物剂量。器官移植患者免疫力低下，为防止他克莫司用量不足而发生排斥反应或免疫抑制过度引发感染，寻找影响他克莫司用药相关基因的多态性标志非常具有临床意义9。 近来，在多药耐药基因MDR1上已经发现有几个单核苷酸多态性（SNPs），其中一部分可以影响P-糖蛋白的表达和功能10。到目前为止，研究表明多药耐药基因MDR1第26外显子的3435位点发生的隐性突变是引起P-糖蛋白在人类组织中表达的多态性的主要原因。本研究旨在探讨他克莫司血药浓度/剂量比个体差异与多药耐药基因MDR1 C3435T多态性的关系。二 材料与方法2.1 标 本患者血标本收集：本研究经过中南大学湘雅三医院人权委员会的同意，经患者或其家属的同意，从湘雅三医院器官移植研究院标本库收集到2002年11月至2004年7月之间的66个肾移植患者的血标本，每个患者收集抗凝静脉血3-7ml。2.2 方 法2.2.1 血标本基因组DNA抽提采用上海飞捷公司DNAfast500小量基因组DNA极速抽提试剂盒抽提DNA。操作步骤如下：（1） 取1-500l抗凝全血或骨髓放入1.5ml eppendorf管中，加入DE1液 1ml，颠倒混匀3-5次，离心1min，充分吸弃上清，留下底部细胞团块。（2） 加入DE1液100l，以手腕充分用力振荡10次，确保形成均一的细胞悬液。 （3） 加入DE2液 600l，以手腕充分用力振荡20次，室温静置8-10min，中间振荡1次。（4） 将样本裂解物吸入或直接倒入内套管，离心2min。（5） 弃去外套管中液体，内套管中加入500 l洗液，离心1min。 再重复此过程洗一次。（6） 取出内套管，弃去外套管中液体，仍然套回内套管，不加洗液，离心1min。（7） 将内套管取出，放入新的eppendorf管中，在膜中央加入洗脱液50l-100l。（8） 室温放置2min后，离心1min，获得基因组DNA。2.2.2 C3435T多态性的鉴定：采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）来检测C3435T（第26外显子）单核苷酸多态性（SNPs）。PCR引物中设计根据已知序列（Genbank accession No：AC005068）设计：正引物5-TTG ATG GCA AAG AAA TAA AGG-3；负引物5-CTT ACA TTA GGC AGT GAC TCG-3。PCR反应条件为：94预变性4分钟，然后9430秒、5630秒、7230秒进行35个循环，随后72延伸5分钟；PCR反应体系为50l。扩增的PCR产物经琼脂糖电泳分离，紫外灯下目测结果。 2.2.3 血药浓度的测定：患者于晚8时服用他克莫司，12h后再次服药前抽血1ml，150g/L乙二胺四乙酸抗凝。手术6个月后的患者血药浓度用半自动微粒子酶标法IMX分析仪(购自美国雅培公司)测定。统计时将血药浓度结果变换为浓度/剂量比进行分析，即以血药浓度除以每日每公斤体重的他克莫司的剂量。2.2.4 统计学分析： 分析患者连续的药理学参数变化时，基因型被认为无条件独立参数。分析患者服用他克莫司的日常剂量和血药浓度时采用非参数统计方法，两组间的比较使用Mann-Whitney U检验， P0.05为差异有统计学意义。三 结 果3.1 基因型鉴定 ： 由于有的患者的标本问题如DNA的含量太低或抽提DNA时的操作问题等原因，66位肾移植患者中用来成功进行MDR1 C3435T基因分型的只有63份，PCR限制性片断长度多态性分析结果见图1 图1.PCR-RFLP对MDR1 C3435T多态性分析的电泳图谱.1.2.5：杂合子CT;3：野生型纯合子CC;4：突变型纯合子TTFig.1 Electrophoresis patterns for MDR1 C3435T polymorphism evaluated by PCR-RFLP based assay. 1, 2, 5: heterozygous CT; 3: homozygous for wild-type CC; 4: homozygous for mutant-type TT.3.2基因型与他克莫司血药浓度/剂量比的关系: 当患者口服相同剂量的他克莫司时，我们发现MDR1基因型为CC型的患者血药浓度明显低于CT型及TT型患者。（P0.01），结果见表1和图2。 表1 基因多态性与他克莫司血药浓度/剂量比的关系Table 1 correlation between the gene polymorphism and tacrolimus concentration 基因 基因型 n 血药浓度/剂量比 P 值 (ng/ml)/(mg/kg) (Mann-whitney U 检验) MDR1 CC 18 72.136.7 CT/TT 45 128.481.3 0.01 图2 63个肾移植患者移植手术6个月后的他克莫司血药浓度（ng/ml）/剂量（mg/kg/day）与MDR1 C3435T基因型的对应关系（水平线表示平均值。CC型患者的血药浓度明显低于CT/TT型患者（P=0.01）Fig.2 Between the tacrolimus level in blood (ng/mL) per dose (mg/ kg/day) at 6 months post transplantation in the 63 renal transplant patients and their MDR1 C3435T CC and CT/TT genotypes.（The horizontal line represents the mean value. The CC patients have a significantly lower tacrolimus level/dose than the CT/TT patients at 6 months (p = 0.01)）. 四 讨 论1997年金塞特和科伯特提出了药物基因组学（Pharmacogenomics）这一新概念，它与药物遗传学类似，其目的是研究药物疗效和安全性变化的分子遗传基础，但是药物基因组学拓宽了药物遗传学“某一时刻单基因”的研究方式，它涵盖了人类基因组包括DME，药物靶标和第二信使等基因在内的所有基因 。随着人类基因组计划的深入研究和完成，以及药物基因组学在医药领域得到广泛的应用，必将给21世纪的医药学发展带来深刻的变革11。药物基因组学与合理用药临床药物基因组学，药物基因组学将基因的多态性与药物效应个体多样性紧密联系在一起，将功能基因组学用于合理用药，利用药物基因组学的技术和方法增加药物的疗效性和安全性，减少不良反应，改善公众健康，实现个体化，可预测及可预防的医疗。这就称为临床药物基因组学（clinical pharmacogenomics），它在临床治疗用药中起着决策性的作用，其目的就是制定出高效、安全、经济的给药方案。由于遗传基因的多变性，任何两个人之间即使年龄、性别以及体重等条件都相同，不同个体对同一剂量的同一药物也可以有不同的反应。用药物基因组学的理论，指导临床合理用药，不仅弥补了只根据血药浓度测定结果，进行个体化给药的不足，而且又为当前无法解释的药动学现象找到了答案，也进一步为临床个体化给药开辟了一个崭新的途径12-13。编码药物代谢酶和转运器的基因多态性的发现，对于理解不同个体间药物反应和浓度/剂量关系存在的差异，有着十分重要的意义。对重要的单核苷酸多态性（SNPs）的研究包括对药物代谢酶和转运器生理功能的改变以及与临床效果之间的关系，可以用于制定安全而有效的用药剂量。这种基因的多态性同样可以引起不同人种间对药物反应和毒性的差异。MDR1的功能性SNPs的鉴定，可以有助于选择同是P-gp底物的药物的最优化治疗。 有报道称，MDR1基因存在一些SNPs，影响那些以P糖蛋白作为底物的药物的生物利用率。整个MDR1基因的系统扫描已经完成，有15个（SNPs）被检测出来14。MDR1的第26外显子C3435T是一个不稳定的位点，出现在这个位点上的SNPs被发现具有影响其功能的重要作用。进一步的研究揭示，C3435T SNPs与P糖蛋白的摄取相关而且在不同人种之间有明显的差异15-16。 本研究中，我们发现肾移植患者体内的他克莫司血药浓度/剂量比与MDR1 C3435T的多态性有着重要的关联。CC型的患者体内血药浓度/剂量比较低，表明这种患者需要增加药物剂量才能达到与CT/TT型的患者相同的药物浓度水平。需要强调的是，这些研究结果来自于相对数量较少的患者，MDR1 C3435T SNP 与他克莫司需求量之间关系的确认，还需要大量的样本以及的不同人种的参与。为了增加我们对单核苷酸多态性（SNPs）在临床抗免疫治疗中的认识，今后的研究将必须进行大量的关于基因型与表现型之间相互关系的试验。 五 结束语当毕业论文设计手稿完成之际，我要衷心地感谢我的指导老师聂新民博士，感谢他在从事临床检验一线工作的同时，抽出大量休息时间来指导我的毕业论文设计。他对事业孜孜不倦追求的精神，大胆的创新意识，严谨的科学精神，敏捷的学术思维，广博的知识造诣以及和蔼近人的人格魅力，使我终身受益。感谢检验系李登清教授、柳永和教授，徐克前教授，李闻文教授，彭剑雄教授，王晓春教授等全体领导、老师在我五年的学习和实习中给予的无私的关怀和指导。感谢检验系龚道科老师在我完成本论文设计过程中给予的指导和热情帮助。感谢湘雅三医院检验科全体老师对我的帮助。我还要感谢我的父母的养育之恩，我的朋友刘耕砚给我的支持，以及我的同学们的鼓励，是他们使我一次次战胜困难，顺利完成学业。最后再一次感谢所有关心、鼓励和帮助过我的人。 六 参考文献1.赵源浩, 刘振章, 刘伟国.他克莫司的临床研究进展J.中国药业，2005，14（9）：922.魏筱华,王共先,秦克旺.他可莫司血药浓度的动态监测及其临床意义J.实用临床医学，2003 ，4（6）：453.马杰,王强,张秀英,等.影响他可莫司血药浓度波动的因素及应对措施J.河北医药，2004 ，26 ，（12）： 9719724. Simpson D,Noble S.Tacrolimus ointment: a review of its use in atopic dermatitis and its clinical potential in other inflammatory skin conditionsJ.Drugs, 2005, 65(6): 827-858.5. 李艳红，王永华，李燕，等.MDR1基因多态性及其临床相关性研究J.遗 传 学 报 ， 2006, 33 (2)：93-1046. MacPhee IAM , Fredericks S, Tai T. Tacrolimus pharmacogenetics polymorphisms associated with expression of cytochrome P4503A5 and P-glycoprotein correlate with dose requirementJ.Transplantation, 2002,74(11): 1486-1489.7. Neylan JF. Racial Differences in renal transplantation after immunosuppression with tacrolimus versus cyclosporineJ.Transplantation, 1998,65(4): 515-238. Frank M, Denton M, Alexander S, et al. Specific MDR1 P-glycoprotein blockade inhibits human alloimmune T cell activation in vitroJ. J Immunol, 2001,166(4): 2451 2459.9. 陈耿，董家鸿.器官移植受体个体化免疫抑制策略的现状与展望J.中华外科杂志.2006，44，（3）：211213.10. Hoffmeyer S, Burk O, von Richter O,et al. Functional polymorphisms of the human multidrug-resistance gene multiple sequence variations and correlation of one allele with P-glycoprotein expression and activity in vivoJ.Proc Natl Acad Sci U S A, 2000, 97(7): 3473-3478.11.段丽芳, 周宏灏.基因转录另路剪接及其在临床药理学的研究进展J.中国药理学通报.2005，21 (6) : 645-649.12. 和喜梅,刘学武, 李逊霞. 临床个体化用药的研究现状和评价J.中国临床药理学与治疗学.2003 ，8(2): 237-240.13. 李军, 彭向前 , 张鉴，药物基因组学与临床合理用药J.中国药事，2006，20(5):288-289.14. Schaeffeler E, Eichelbaum M, Brinkmann U, et al. Frequency of C3435T polymorphism of MDR1 gene in African peopleJ.Lancet, 2001,358(9279):383-384.15. Putnam WS, Woo JM, Huang Y, et al. Effect of the MDR1 C3435T Variant and P-Glycoprotein Induction on Dicloxacillin PharmacokineticsJ.J Clin Pharmacol,2005 ,45(4):411-421.16. Cascorbi I, Gerloff T, Johne A,et al. Frequency of single nucleotide polymorphisms in the P-glycoprotein drug transporter MDR1 gene in white subjectsJ.Clin Pharmacol Ther, 2001,69(3): 169-174. Tacrolimus Dosing in Chinese Renal Transplant patients is Related to MDR1 Gene C3435T polymorphisms*Luo Jia1) , Nie Xin-Min2) Peng huai-yan2)( 1)The XiangYa Medical School of Central South University, 2)The Third Xiang-Ya Hospital of Central South University )Abstract Tacrolimus is an immunosuppressive drug with narrow therapeutic range and wide interindividual variation in its pharmacokinetics. P-glycoprotein(P-gp) plays an important role in the absorption or metabolism of tacrolimus. The polymorphism C3435T of MDR1, the gene coding P-gp, could influence the expression and activity of P-gp. The aim of this study was to evaluate whether the C3435T polymorphism was associated with tacrolimus concentration /dose ratio or not. Sixty-six Chinese renal transplant patients were enrolled in this study. Their body weight, dosage and concentration of tacrolimus were observed. MDR1 genotype was determined by polymerase chain re