全国艾滋病检测技术规范-2009年修订.ppt

全国艾滋病检测技术规范（ 2009年修订版 ） 2009年修订版 与2004年版比较： 本次主要对以下 6 个方面内容进行了修改 、增补和完善。 修订版（一） 在样品的采集和处理中，增加了滤纸干血 斑样品（DBS）的采集和处理，用于 CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品、尿液和 唾液样品的采集和处理； 在HIV抗体检测中，增加了免疫荧光法和 化学发光法，进一步明确了不同情况下的 检测策略； 修订版（二） 在HIV核酸检测中，增加了HIV感染产妇 所生婴儿HIV感染早期诊断检测流程和适 用于窗口期的集合核酸检测方法； 根据临床治疗需求，增加了HIV-1的耐药 检测； 修订版（三） 进一步完善了艾滋病检测实验室安全防护 和艾滋病检测实验室的质量管理，使其更 加符合目前艾滋病防治工作的需求，更加 具有可操作性； 考虑到技术发展和新的需求，增加了HIV-1 新近感染检测和HIV-1的分离培养技术。 修订后的规范（一） 共九章 第一章 样品的采集和处理 第二章 HIV抗体检测 第三章 HIV-1抗原检测 第四章 HIV核酸检测 第五章 HIV-1耐药检测 修订后的规范共九章 第六章 CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测 第七章 HIV-1的分离培养 第八章 实验室生物安全 第九章 艾滋病检测实验室的质量管理 第一章 样品的采集和处理 样品种类及相应的用途（一） HIV抗体检测的样品包括： 全血、血清、血浆 唾液、尿液 DBS样品 样品种类及相应的用途（二） 抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。 血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测 。DBS样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。 全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细 胞（PBMC）及DBS样品可用于HIV核酸的定性 检测。 PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1 分离培养。 采集和处理样品（一） 血液 滤纸干血斑 尿液和唾液 采集和处理样品（二） 血液：抗凝全血、末梢全血、血浆、血清 、淋巴细胞富集液、PBMC 注意：根据检测要求选用适当的抗凝剂，如 CD4+和CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA钠盐 或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠，HIV病毒分离、核 酸定性/定量检测可选用EDTA钠盐或钾盐或枸 橼酸钠。 注意： 所有的血液、血清、未固定的组织和组织 液样品，均应视为有潜在传染性，都应以 安全的方式进行操作。 样品的保存（一） 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品， 短期（1周）内进行检测的可存放于2 8， 一周以上应存放于-20以下。 样品的保存（二） 用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内 进行检测的可存放于4，3个月以内应存 放于-20以下。3个月以上应置于-70 以下。 样品的保存（三） 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样 品应及时送确证实验室，筛查阴性样品， 可根据具体需要决定保存时间，建议至少 保存12个月。特殊用途或专项项目的样 品根据具体要求确定保存时间。 样品的保存（四） 艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样 品，无论确证结果如何，均应将剩余的样 品保存至少10年，特殊用途或专项项目的 样品根据具体要求确定保存时间。 样品的运送 应符合生物安全要求； 要获得相应部门批准并由具有资质的人员 专程护送； 应采用三层容器对样品进行包装，随样品 应附有与样品唯一性编码相对应的送检单 。送检单应标明受检者姓名、样品种类等 信息，并应放置在第二层和第三层容器之 间。 样品运送注意事项（一） 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件 下运送。 用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的样品应在 室温下（1825）或4（特殊要求时）运 送。 用于病毒载量检测的样品应在-20以下运输 。 DBS样品应在室温下（1825）运送。 每一件包装的体积以不超过50mL为宜。 样品运送注意事项（二） 运送样品必须有记录。 特殊情况下经有关部门批准可以用特快专 递邮寄样品，但必须按三层包装，将样品 管包扎好，严禁使用玻璃容器。 样品的接收（一） 样品包裹必须在具有处理感染性材料能力的 实验室内、由经过培训的、穿戴防护衣、戴 口罩、防护眼镜的工作人员在生物安全柜中 打开，用后的包裹应及时进行消毒。 核对样品与送检单，检查样品管有无破损和 溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移 出，对样品管和盛器消毒，同时报告实验室 负责人和上一级实验室技术人员。 样品的接收（二） 检查样品的状况，记录有无严重溶血、微生 物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污 染过重或者认为样品不能被接受，应将样品 安全废弃。并将样品情况立即通知送样人。 接收样品时应填写样品接收单。 第二章 HIV抗体检测 本章规定了HIV抗体的检测方法、程序、 结果报告、检测策略及质量控制。 适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制 机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生 保健机构。 可作为对HIV感染者诊断和监测的实验室 依据。 HIV抗体检测的目的 HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测 等。 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感 染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根 据特殊需要进行的体检等。 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传 播HIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV 感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、 重点人群和一般人群。 HIV抗体检测的要点 根据目的选择检测方法及检测策略。 严格遵守实验室SOP。 筛查试验阳性，须作确证试验。 筛查试验阴性， 不应做确证试验。 筛查及确证试验阳性均应做好咨询工作。 以诊断为目的的检测策略 常规HIV抗体检测的方法和程序 HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和 复检）和确证试验。 筛查试验 筛查试剂 筛查样品 筛查方法 筛查程序 筛查试剂 必须是经国家食品药品监督管理局注册批 准、在有效期内的试剂，其中酶联免疫试 剂应批批检合格。 推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高 的试剂。 筛查样品 HIV抗体筛查可采用血清、血浆、滤纸干 血斑、唾液和尿液样品。 筛查方法 酶联免疫吸附试验（ELISA） 化学发光或免疫荧光试验 快速检测（RT）及其它检测试验 筛查程序 初筛试验 复检试验 注：艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反 应的样品，确证实验室可以直接进行确证试验 。 初筛和复检流程 （见图） 筛查试验结果的报告 筛查试验呈阳性反应样品的转送 复检试验 如果抗原抗体联合试剂检测呈阳性反应， 而抗体试剂检测为阴性反应，则应考虑进 行 HIV-1 p24抗原或核酸检测，必要时进 行随访。 筛查试验结果的报告 HIV抗体筛查试验: 阴性反应报告为“HIV抗体阴性（-）”； 阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。 HIV抗体筛查检测的流程 样品 初筛试验 筛查试剂 阳性反应 阴性反应 复检试验阴性报告 原有试剂+另一不同原理( 或厂家)试剂或另外两种不 同原理(或厂家)试剂 一阴一阳均阳性反应 确证试验报告阴性 均阴性反应 确证试验（一） 确证试剂 确证样品：可采用血清、血浆、滤纸干血 斑样品。 确证方法：包括免疫印迹试验（WB）、 条带免疫试验、放射免疫沉淀试验（ RIPA）及免疫荧光试验（IFA）等。 确证流程 （见图） 确证试验（二） HIV抗体确证试验结果的判定 HIV抗体确证试验结果报告 发出确证报告的同时要做好检测后咨询。 HIV抗体确证报告的反馈和上报 疑难样本的仲裁 HIV抗体确证试验结果的判定 HIV-1抗体阳性 HIV-2抗体阳性 HIV抗体不确定 HIV抗体阴性 HIV抗体确证试验结果报告(一) 注意： 符合HIV抗体阴性判断标准，报告“HIV抗体阴性 （）”。如疑似“窗口期”感染，建议进一步做 HIV核酸检测，尽早明确诊断。 符合HIV抗体不确定判断标准，报告“HIV抗体不 确定（）”，在备注中应注明“4周后复检”。 HIV抗体确证试验结果报告(二) 注意： 省艾滋病确证中心实验室难以确证的样品 ，送国家艾滋病参比实验室确证。 同一受检对象的样品在不同实验室得到不 一致的确证结果时，由国家艾滋病参比实 验室予以仲裁。 HIV抗体确证检测流程 质量控制（QC） 在每次实验中必须包含有内部对照质控血 清和外部对照质控血清。 试剂盒内部对照 试剂盒内部对照质控品即为试剂盒内提供的 阳性和阴性对照血清。 试剂盒内部对照用于判断每次实验的有效性 ，但不能作为室内质控品使用。 每一次检测临床样品时，必须有试剂盒内部 对照，而且只能在同批号的试剂盒中使用。 内部对照结果无效，必须重新试验。 室内质控品 为非试剂盒组份的外部质控品，是为了监控 检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳 性和阴性质控血清。 也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒 临界值（Cut-off）的23倍为宜。 外部质控品的作用是，判断该批临床样品检 测的有效性，因此，每次实验必须包含室内 质控品，其结果无效，必须重新试验。 室内质控品可以是商品或实验室自行制备。 统计室内质控的主要表示方法 建立质控图 最常用的质控图是Levey-Jennings质控 图，该图使用累计和技术或趋势分析技术 的图形提供系统偏移和漂移的状况。 建立质控图参数 算术平均值 ( )：代表一组质控血清测定的 S/CO值的均值。为了统计学上有显著性意义， 应该采用至少20次（天）所测得的外部对照质 控血清S/CO值结果计算出平均值。 标准差(s)：是描述样品与均数之间离散程度的 一个指标，是与质控血清S/CO值均值有关的预 期范围。一组S/CO值的标准差以s表示。 变异系数（cv） 是反映各次S/CO值相对于均值离散程度 的一个指标，可以用来衡量检测的重复性 或精密度。 控制限 由实验室根据对外部质控品检测结果的均 值和标准差来确定。例如2S质控规则的控 制限为外部质控品S/CO均值加减2个标准 差；3S质控规则的控制限为外部质控品 S/CO均值加减3个标准差。 质控图的绘制步骤 在常规条件下，对同一批外部质控血清连续 测定20次（天）或以上，获得一组S/CO值 ，求均数（ ）和标准差（s）, 超出2s或3s 的数据不应删除。 将均值（ ）和标准差（s）分别在质控框架 图中标示出来。以S/CO值作纵座标（Y轴） ，每一批次试验作横座标（X轴），绘制质 控图。 从第21次起，将每次质控血清的检测结果依 次点入该质控框架图中，检验进入质控状态 。 质控图 绘制和分析质控图的要点（一） 分析数据时，超出2s或3s的数据不应删除。 由专人负责建立质控图，每月定期召开质控分 析会，讨论本月的质量控制情况。 建议长期和稳定地使用一种质量好的试剂，更 换不同厂家的试剂后，须重新绘制质控图。改 用新批号试剂如外部质控品测定出现较大变化 也应重新制作质控图。使用新批号或不同厂家 的试剂,必须在质控图上注明使用日期。 绘制和分析质控图的要点（二） 发现质控结果失控，应填写报告单，上交质量 负责人，分析原因并决定是否发出检测报告。 使用新批次的外部质控品时，如测定值出现较 大变化，须重新绘制质控图。变异系数（cv） 小于20，表示外部质控品处于稳定状态。 室内质控其他方式“即刻法”质控 “即刻法”质控方法是在对同一批外部质控 血清连续测定3次后，即可对第3次检验结 果进行质控。 Levey-Jennings质控图基本的统计学含义 稳定条件下，在20个IQC结果中不应有多于1个结 果超过2SD（95.5%可信限）限度；在1000个测定 结果中超过3SD（99.7%可信限）的结果不多于3 个。 如以3s为失控限，假失控的概率为0.3%。 服从正态分布的条件 误差因素多而小，无一个占优，彼此相互独 立（中心极限定理）。 一般认为，当影响测量的因素在15个以上， 且相互独立，其影响程度相当，可以认为测 量值服从正态分布；若要求不高，影响因素 则应在5个（至少3个）以上，也可视为正态 分布。 概率密度函数 正态分布的密度函数 为测量总体的数学期望，如不计系统误差，则 =-即为随机误差 为测量总体的标准差，也是=-随机误差的 标准差 分布的误差特性 单峰性：小误差出现的概率 比大误差出现的概率大。 对称性：正误差出现的概率 与负误差出现的概率相等 。 抵偿性：随测量次数增加， 算术平均值趋于零。 正态分布的这三个特 点与误差大样本下的 统计特性相符。但在 理论上，正态分布无 界，这也是正态分布 与实际误差有界性不 相符之处。 正态分布的某些k值的置信概率 k 3.33.02.582.01.961.6451.00.6745 p 0.9990.99730.990.9540.950.900.6830.5 0.0010.00270.010.0460.050.100.3170.5 正态分布在误差理论和实践中的地位 (1)经典误差理论都是建立在正态分布的基础上。 凡是有3、5个以上的、差不多微小的、独立影 响的合成分布都趋近正态分布。这是被前人早 已证明了的中心极限定理告诉我们的一个事实 。 (2)许多非正态分布可以用正态分布来表示。 (3)正态分布的概率密度函数具有简单的数学形式 和优良的性质。 (4)也有不少的误差分布并不能简单地用正态分布 来描述。因而，现代误差理论及其实践需要进 一步研究非正态分布的问题。 正态分布图 - 0.682 质控规则及其使用 告警（1 2S） 失控（1 3S） 漂移 趋势 告警（12S）：当外部对照的S/CO值超出+2s 范围时，系统处于告警状态，应予注意，是 否可以继续检测需要进一步观察。若将12S做 失控标准，有较高的假失控概率，所以一般 不采用。 失控（13S）：当外部对照的S/CO值超出+3s 范围时，系统处于失控状态，本次实验结果 不能被接受，可能是系统误差、随机误差或 外部对照滴度下降造成。 漂移：连续几次（35次）外部对照S/CO 值都落在均值的一侧则称为位移，提示实 验条件发生了较大的变化。 趋势：连续几次（57次）外部对照S/CO 值几乎按一个方向分布时称为趋势，通常 由参数的缓慢改变引起。 出现下列情况时，应暂停检测查找原因： 出现一次3s范围的变化 连续两次出现同一方向2s范围的变化 连续四次出现同一方向的1s范围的变化 连续10次结果都在1s范围内，但落在均值线 的同一侧。 第三章第七章 第三章 HIV-1抗原检测 第四章 HIV核酸检测 第五章 HIV-1耐药检测 第六章 CD4+和CD8+T淋巴细胞检测 第七章 HIV-1的分离培养 第八章 艾滋病实验室生物安全 HIV的生物危害 第一类、第二类病原微生物统称为高致病 性病原微生物。 人类免疫缺陷病毒（HIV）属第二类病原 微生物，是高致病性病原微生物。 HIV相关检测的生物安全级别（一） HIV抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗原检 测和相关的免疫学检测应在符合级生物安全 实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进 行。 HIV分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研 究工作及其它需要应用活病毒的研究工作，应 在级生物安全实验室（BSL-3）中进行。 HIV相关检测的生物安全级别（二） HIV核酸提取和检测均应在符合级生物安全实 验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行 。 HIV病毒株应保存在符合级生物安全实验室（ BSL-3）要求的艾滋病实验室；HIV阳性样品， 包括全血、血清、血桨和其他组织（液）、核 酸提取物应保存在符合BSL-2要求的艾滋病实验 室。 生物安全相关法律法规及标准 中华人民共和国传染病防治法 病原微生物实验室生物安全管理条例 医疗废弃物管理条例 可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒 ）种或样本运输管理规定 人间传染的病原微生物名录 实验室 生物安全通用要求 微生物和生物医学实验室生物安全通用准 则 实验室 生物安全通用要求 (GB 19489-2008) 风险评估及风险控制 实验室生物安全防护分级 实验室设施和设备要求 管理要求 BSL-2级实验室工作人员可能的暴露途径 经口感染：在实验室吃东西、饮水或吸烟，用 嘴吸液，经污染的手指或物品将病原体带入口 腔。 经皮肤感染：被针头或其它利器、玻璃等意外 刺伤、割伤、刮擦伤。 经眼睛感染：传染性物质溅入眼中；或经污染 的手指将病原体带入眼中。 经肺感染：经呼吸吸入含有病原体的气溶胶。 BSL-2 实验室设施和设备要求（一） 适用时，应符合本标准 6.1 的要求。 实验室主入口的门、放置生物安全柜实验 间的门应可自动关闭。 实验室工作区域外应有存放大量的备用物 品的条件。 应在实验室工作区配备洗眼装置。 BSL-2 实验室设施和设备要求（二） 应在实验室或其所在的建筑内配备高压蒸 汽灭菌器或其它适当的消毒设备，所配备 的消毒设备应以风险评估为依据。 应在操作经空气传播致病性生物材料的实 验间内配备生物安全柜。 BSL-2 实验室设施和设备要求（三） 生物安全柜的安装和使用应遵循制造商的 建议。如果生物安全柜的排风在室内循环 ，室内应具备通风换气的条件；如果使用 需要管道排风的生物安全柜，应通过独立 于建筑物公共通风系统的管道排出。 应有可靠的电力供应。必要时，重要设备 如培养箱、生物安全柜、冰箱等应配置备 用电源。 BSL1实验室设施和设备要求（一） 实验室的门应有可视窗并可锁闭，门锁及 门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。 应有防止节肢动物和啮齿动物进入的措施 。 应设洗手池，宜设置在靠近实验室的出口 处。 在实验室门口处应设存衣或挂衣装置，可 将个人服装与实验室工作服分开放置。 BSL1实验室设施和设备要求（二） 实验室的墙壁、天花板和地面应易清洁、不渗 水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应平整、 防滑，不应铺设地毯。 实验室台柜和座椅等应稳固，边角应圆滑。 实验室台柜等和其摆放应便于清洁，实验台面 应防水、耐腐蚀、耐热和坚固。 实验室应有足够的空间和台柜等摆放实验室设 备和物品。 BSL1实验室设施和设备要求（三） 应根据工作性质和流程合理摆放实验室设备、 台柜、物品等，避免相互干扰、交叉污染，并 应不妨碍逃生和急救。 实验室可以利用自然通风。如果采用机械通风 ，应避免交叉污染。 如果有可开启的窗户，应安装可防蚊虫的纱窗 。 实验室内应避免不必要的反光和强光。 BSL1实验室设施和设备要求（四） 若操作刺激或腐蚀性物质，应在 30 米内设洗眼 设施，必要时应设紧急喷淋装置。 若操作有毒、刺激性、放射性挥发物质，应在 风险评估的基础上，配备适当的负压排风柜。 若使用高毒性、放射性等物质，应配备相应的 安全设施、设备和个体防护装备，应符合国家 、地方的相关规定和要求。 BSL1实验室设施和设备要求（五） 若使用高压气体和可燃气体，应有安全措施， 应符合国家、地方的相关规定和要求。 应设应急照明装置。 应有足够的电力供应。 应有足够的固定电源插座，避免多台设备使用 共同的电源插座。应有可靠的接地系统，应在 关键节点安装漏电保护装置或监测报警装置。 BSL1实验室设施和设备要求（六） 供水和排水管道系统应不渗漏，下水应有防回 流设计。 应配备适用的应急器材，如消防器材、意外事 故处理器材、急救器材等。 应配备适用的通讯设备。 必要时，应配备适当的消毒设备。 BSL-2 实验室个人防护基本要求（一） BSL-2实验室的工作人员进入实验室后应 穿工作服，根据操作内容确定是否需要外 加隔离服； 应戴帽子、口罩和一次性手套，必要时应 戴双层手套和防护眼镜。一次性手套不得 清洗和再次使用； BSL-2实验室个人防护基本要求（二） 当进行的感染性操作不可能在生物安全柜 内进行、必须采取外部操作时，为防止感 染性材料溅出或雾化危害，须使用面部保 护装置，如护目镜； 离开实验室时，工作服和任何防护物品必 须脱下并留在实验室区域内，不得穿着防 护用品进入办公区域或其它公共场合； 用过的防护用品及时清洁消毒。 个人保健和防护（一） 遇有手部皮肤有开放性伤口及其他不适于工作的情 况，应暂停工作。 皮肤的微小伤口、擦伤、皲裂等，应用防水敷料 严密覆盖。 应为每一名在艾滋病实验室工作的人员提供充足 的防护服、一次性乳胶手套、口罩、帽子和覆盖足 背的工作鞋。应将清洁的防护服和其他个人防护用 品置于实验室清洁区内的专用处存放。 实验室应设置应急冲洗眼睛装置。 个人保健和防护（二） 工作人员上岗前必须进行HIV抗体和乙型肝炎病 毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒标志物检测，应 接种乙肝疫苗。应每年对工作人员采血检测HIV 抗体，血清应长期保留。 进实验室工作前要摘除首饰，修剪长的带刺的 指甲，以免刺破手套。 严禁在实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。 个人保健和防护（三） 实验操作时应穿合适防护服、戴手套和口罩、 穿实验室专用的工作鞋。如接触物的传染性大 、应戴双层手套；含有HIV的液体（样品或病毒 培养液）有可能喷溅时，应戴防护眼镜、穿防 水（如塑料）围裙。工作完毕，先脱去手套， 再脱去防护服，用肥皂和流动水洗手。穿过的 污染的防护服应及时放入污物袋中，消毒后方 可洗涤或废弃。 个人保健和防护（四） 注意： 操作过程中，如发现防护服被污染应立即更换 ，如手套破损，应立即丢弃、洗手并换上新手 套。 不能用戴手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼 睛、耳朵和头发等。 不要将手套清洗或消毒后再次使用，因为使用 表面活性剂清洗可使手套对水的通透性增加， 消毒剂可以引起手套的破损。 个人保健和防护（五） 禁止使用口腔吸液管，必须使用移液器来 操作实验的所有液体。 离心机使用注意事项（一） 必要时应设负压排风罩，并能通过生物安 全风险评估。 离心机不能放入级生物安全柜中使用。 在级生物安全柜中使用时，应评估离心 机对安全柜开口处气流的影响，以及安全 柜对离心机可能产生气溶胶的防护能力。 离心机使用注意事项（二） 在离心具有潜在危害的生物学材料结束后 ，打开离心机盖前要先等候5min。 应定期清理离心管座，检查转子是否损坏 、破裂或腐蚀。 离心杯应定期清洗，并用适当的消毒剂清 除污染。离心时发生破裂或泄露后均应及 时清洁消毒。 离心机使用注意事项（三） 要特别加强离心机持续使用过程中的维修 保养。 使用过程中如果发生离心管、离心杯等破 裂或泄漏，应重新评估离心操作规范，必 要时更换更加安全的离心设备。 离心机内溢洒的处理（一） 在离心感染性物质时，要使用密封管以及密封 的转子或安全桶。每次使用前，检查并确认所 有密封圈都在位并状态良好。 离心结束后，至少再等候5 min 打开离心机盖 。 如果打开盖子后发现离心机已经被污染，立即 小心关上。如果离心期间发生离心管破碎，立 即关机，不要打开盖子。切断离心机的电源， 至少30 min后开始清理工作。 离心机内溢洒的处理（二） 穿着适当的个体防护装备，准备好清理工 具。必要时，清理人员需要佩戴呼吸保护 装置。 消毒后小心将转子转移到生物安全柜内， 浸泡在适当的非腐蚀性消毒液内，建议浸 泡60 min 以上。 离心机内溢洒的处理（三） 小心将离心管转移到专用的收集容器中。一 定要用镊子夹取破碎物，可以用镊子夹着棉 花收集细小的破碎物。 通过用适当的消毒剂擦拭和喷雾的方式消毒 离心转子仓室和其它可能被污染的部位，空 气晾干。 如果溢洒物流入离心机的内部，需要评估后 采取适用的措施。 污染物处理 污染物处理 应按照实验室生物安全通用要求（GB 19489-2004）和消毒技术规范（2002年版 ）处置实验室废弃物。 艾滋病实验室产生的所有废弃物，包括不再 需要的样品、培养物和其它物品，均应视为 感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器 中，安全运至消毒室，经高压消毒后再进行 处理或废弃。 污染物处理常用的消毒方法（一） 1. 物理消毒方法 高压蒸汽消毒，121，保持 1520min; 干燥空气烘箱消毒（干烤消毒）， 140，保持23h。 污染物处理常用的消毒方法（二） 2. 化学消毒方法 含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯2000 5000mg/L） 75%乙醇 2%戊二醛 艾滋病检测实验室物品常用的消毒方法 废弃物缸：5000mg/L 次氯酸钠。 生物安全柜工作台面和仪器表面：75%乙 醇。 溢出物：5000mg/L次氯酸钠。 污染的台面和器具：2000mg/L 次氯酸钠, 也可以用过氧化氢或过氧乙酸。 器械可用2%戊二醛消毒。 意外事故处理 发生意外事故时，应针对事故的类型立即 进行紧急处理 。 意外事故紧急处理方法（一） 皮肤针刺伤或切割伤，应立即用肥皂和大量流 水冲洗，尽可能挤出损伤处的血液，用70%乙 醇或其它消毒剂消毒伤口。 皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适 当的消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒 剂。 粘膜污染：用大量流水或生理盐水冲洗污染部 位。 衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处 理。 意外事故紧急处理方法（二） 污染物泼溅：小范围污染物泼溅，应立即进行 消毒处理和清洗。发生大范围污染物泼溅事故 时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人 到达事故现场，查清情况，确定消毒的程序。 发生空气污染时，可采用低温蒸汽甲醛气体对 空气进行消毒，但甲醛有致癌作用，不宜用于 生物安全柜和实验室的常规空气消毒。 意外事故紧急处理方法（三） 如果发生重大泼溅事故，应采取疏散人员、控 制污染扩散等措施。： 意外及事故的登记、报告和检测 对重大意外和事故必须进行登记，对职业暴露 事故应填写“艾滋病职业暴露人员个案登记表” ； 对重大意外和事故必须进行报告和检测。 “艾滋病职业暴露人员个案登记表” 内容包括： 意外和事故发生的时间、地点及详细经过。详 细记录职业暴露发生的时间、地点及经过；暴 露方式；损伤的具体部位、程度；暴露物种类 （培养液、