碳酸氢根(HCO3-) PEP-C法.doc

项 目碳酸氢根（HCO3-）方 法PEP-C法目 录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理PEPC+Mg2+PEP + HCO3- - 草酰乙酸 + H2PO4 MDH草酰乙酸 + NADH + H+ - 苹果酸 + NAD+ 2标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况。孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3 抗凝剂：血浆使用肝素作为抗凝剂。2.4 标本处理：血标本室温放置30min45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8保存。3试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技责任公司CO2试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：组 成试剂浓度Tris缓冲液 25mmol/L，PH=6.5 Phosphoenolpyruvate(PEP) 6.3 mmol/LNADH 0.45 mmol/LPEPC 200U/LMg2+ 8.0 mmol/L苹果酸脱氢酶 (MDH)600U/L3.2 校准血清：使用湖南永和阳光科技责任公司提供的40项校准血清。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3 试剂与校准血清的稳定性：原原包装试剂储存在2-8至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。多项校准血清在2-8储存至标签所示失效日期，复溶后-20保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。试剂盒配备的水标准液在2-8储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8储存避免污染，可稳定2个月。4仪器KONELAB 30型号仪器。性能：波长405nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5操作样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6计算A测定C = C oA标准 式中：c 测定二氧化碳浓度，mmol/L；A测定 标本管吸光度；A标准 标准管吸光度；CO 校准血清二氧化碳浓度，mmol/L；7操作性能7.1 精密度：批内CV8.0%，批间CV10.0%。7.2 准确度：检测结果的相对不准确度10%。7.3 灵敏度：二氧化碳浓度为：25mmol/L时，吸光度为1.36251.4750。7.4 可报告范围：血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为50.0g/L。7.5 特异性：测量值在给定值的90%-110范围内。7.6 干扰：内源性干扰物为Hb1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml对测试结果无明显影响。8参考值20.029.0