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全国血吸虫病监测点 家畜病情监测及查病技术 -粪便毛蚴孵化塑料杯顶管法 一、用水的准备 二、畜粪的采集和送检 三、其它器械的准备 四、操作 五、孵化和观察 六、清洁消毒 七、家畜血吸虫病监测的种类及数量 八、检查方法 一、用水的准备： 洗粪和孵化用水应选择未经工业、 农药及化肥等污染的水源，其PH值以 6.8-7.2为宜。 1. 河水、井水、池塘水必须进行杀灭水虫 和澄清水质的处理，处理后的水称清水。 n杀灭水虫 n澄清水质 2. 自来水处理 1.1 杀灭水虫 常用的方法有两种： n将水加温至60以上 n在每五十公斤水中加入含30%有效氯的漂 白粉0.35克或含有65%有效氯的漂白粉精 0.17克 杀灭水虫的具体操作 将漂白粉置于盛具中加少量水调成糊 状，倒入水缸内充分搅拌，在不加盖的情 况下存放20小时，待余氯自然逸出后方可 使用。如果急需用水，可在加入漂白粉后 一小时，按每五十公斤水加硫代硫酸钠 0.2-0.4克脱氯，经半小时后即可使用。 1.2 澄清水质 水质混浊时，每五十公斤水中加入明 矾3-4克（不宜过量），经充分搅拌后即 可迅速澄清。每天用水后必须将缸底沉渣 清除，洗净。 2. 自来水的处理 余氯较重的自来水，应在盛具中存入 过夜备用或进行脱氯处理。 二、畜粪的采集和送检 各地可根据具体情况，安排在5-10 月份进行,牛、猪、羊、犬一粪一检。 1. 采集量：大家畜200-400克；猪、羊、犬 50-60克。 2. 采集方法：粪样要新鲜，防止冰冻和日 晒。为了避免污染、采粪时所用采粪器具 不能连续使用，要求一具采一头畜粪；直 肠采粪样时每采一头后，必须将手洗净后 再采另一头 3. 包装送检：采得粪样可用容器盛装或使 用干净的塑料袋包装，详细填写家畜血 吸虫病粪样送检登记卡，送交化验组 三、其它器械的准备 1. 特制的塑料顶管杯。 根据各省设计的标准不一样，容量一般为 750毫升、1000毫升等，与之相适应的各类型塑 料顶管杯顶盖孔的玻璃试管，及管口上套用的 橡皮填圈或橡皮筋圈。 2、搪瓷杯、玻璃棒（或竹筷）40-60孔/寸2 铜筛。 3、其它：记号笔、脱脂棉、镊子、剪刀、 放大镜、温度计、PH纸、毛巾、纱布、 显微镜、酒精、碘酒、粪样送检登记卡、 动物（家畜）血吸虫病普查登记表等 四、操作 编号 登记 加清水 洗粪 沉淀换水 孵化 1、编号：首先对所用洁净的塑料粪检杯逐一编号 2、登记：将粪检登记卡上的内容详细记入粪检登 记表，做到粪检登记卡、粪检样杯号、粪检登 记表三对准，已免发生登记混乱。 3、加清水：将塑料杯内加至2/3容量。 4、洗粪：取牛、马属动物粪便50-100克，猪、羊 、犬各为30-40克，置40目/孔/寸2铜筛内，放入 加有清水的塑料杯内充分搅拌淘洗，而后取出 粪筛粪渣（一畜一具，不得混用），将杯内加 满清水，静置20分钟以上。 5、沉淀换水： 经淘洗滤出的粪液静置20分钟后进行 第一次换水，倒去粪杯中上1/2的粪水， 再加满清水，静置15-20分钟后进行第二 次换水，倒去杯中上1/2的粪水，再加满 清水。 沉淀换水注意事项: 换水时，要求轻拿轻放，动作缓慢均匀， 不可倒倒停停，以免激起沉渣上浮，把虫 卵倒掉。 当水温18以上时全部洗粪和沉淀用水均 改用1%盐水，以抑制毛蚴过早孵出，孵 化时应用淡水。 6、孵化： 盖上杯盖，另取与塑料杯盖孔相适 应的玻璃试管，装满清水倒插于杯盖孔 上进行孵化 。 五、孵化和观察 n孵化： 温度以22-26为宜，室温在20 以 上时，无需加温，可直接进行孵化。孵化 时应具有一定的光线。 n观察： 样品孵化后，于第1、3、5小时各观 察一次，每次每个样品的观察时间应在二 分种以上。发现毛蚴即判为阳性，并立即 进行登记。如有可疑，可用滴管吸出，在 显微镜下确诊。 毛蚴的观察 毛蚴往往在距水面4cm的范围内活动 ，灰白色、折光强、梭形，多呈与水面平 等或斜向的直线运动。 观察毛蚴应在光线充足的地方进行， 为了便于观察，可衬以黑色背景。 毛蚴与水虫严加区别： 观察时，尤其在孵化瓶中所见草履虫的形态、颜 色、运动方式等与毛蚴极为相似,应严加区别。 .大小： n毛蚴大小较一致。 n草履虫则因系分裂繁殖大小不一致，一般 所见略大于毛蚴。 .显微镜下观察： n毛蚴前端较宽，有一突起，体前部有明显 的原肠和头腺。 n草履虫体鞋底状，体侧有一明显的口沟， 前后端有伸缩泡，整体不表现明显伸缩， 呈自右至左旋转式前进运动。 六、清洁消毒 用过的器械，如铜纱筛、杯、竹筷、量杯等 ，要用清水反复洗涤干净，再以80以上的热 水浸泡杀死虫卵。 不宜用热水浸泡的器具，应用已通过灭虫处 理的水清洗。 剩余畜粪和粪水等，应倒在指定坑内，作无 害化处理，以防污染水源。 七、家畜血吸虫病监测的种类及数量 n主要监测牛、放牧羊、散养猪、种猪 n牛以村为单位进行