生物梅里埃真菌培养鉴定及药敏全面解决方案.ppt

生物梅里埃 真菌培养、鉴定及药敏全面解决方案,生物梅里埃华东区技术支持 李峰,深部真菌感染,深部真菌感染是一种重症感染，死亡率为40-90% 真菌病的发病率呈上升趋势，尤其对重症监护病房和免疫缺陷患者、以及癌症患者， 8%的院内感染由真菌引起 白色假丝酵母、热带假丝酵母、光滑假丝酵母、隐球菌等是最常见的感染病原菌 真菌感染的早期诊断、尽早开始治疗，是挽救患者生命的最重要的手段,真菌培养及鉴定药敏的全面解决方案 最快可实现48 小时内从接种到药敏结果报告,直接镜检,分离培养+鉴定 chromid candida , 37c，24-48小时,粉色菌落,白色菌落,鉴定,vitek 2 yst 约15小时,api 20c aux 30c, 24-48小时,api candida 37c 24-48小时,药敏,atb fungus 3 35c 24-48小时,vitek ybc 30c 24-48小时,vitek 2 ast-ys01 约14-22小时,chromid candida,酵母菌产色鉴定培养基,此培养基含有： 提供酵母菌生长的营养物质 抑制细菌生长的抗菌物质 用于检测标本中特定真菌的特异性酶的产色底物,chromid candida 快速酵母菌鉴定,chromid candida 快速酵母菌鉴定,与传统培养基相比： 更易监测到标本中感染相关菌种 对白色假丝酵母直接鉴定，无需再次确认 对热带假丝酵母、葡萄牙假丝酵母及乳酒假丝酵母做初步鉴定 比传统培养基更快得到鉴定结果,白色假丝酵母,白色假丝酵母被氨基己糖苷酶产色底物特异水解，显现兰色,热带/葡萄牙/乳酒假丝酵母,配方中另一种底物水解，初步区分某些特定酵母菌种，显现粉色,其他酵母菌,其他酵母菌呈白色,chromid candida对手工及 自动鉴定系统均无影响,与传统沙保弱培养基(sgc)相比，chromid candida 对api 20c、id 32c、vitek ybc、vitek 2 id-yst的鉴定结果无影响。,poster， ricai，2003,注:1.准确鉴定; 2.低水平鉴定; 3.未做出鉴定; 4.不正确鉴定,chromid candida对atb fungus3 药敏测定结果无影响,无论肉眼判读与机器判读，在+/-一个滴度范围内，结果与标准mic值100%一致，故candida 对药敏结果判读无影响。,poster， ricai，2003,肉眼判读结果,机器自动判读结果,菌 株 数,滴度差异范围,滴度差异范围,真菌药敏 简便如 atb fungus 3 ref 14204,真菌鉴定及药敏的意义,近年，真菌感染的显著增加与某些治疗习惯及疾病密切相关，包括: 更多地使用免疫抑制性药物 更频繁地应用广谱抗菌药物 更普遍地使用静脉留置设备 慢性免疫抑制性病毒感染的出现，比如aids 这些因素使从未出现过的某些机会性感染发生，导致了更高的感染率，并与高致病率与病死率相关。 同时，抗真菌药物的耐药率也显著上升，使治疗选择更为复杂。 由于深部真菌感染的有效治疗选择有限，使得利用真菌耐药监测来观察耐药发展趋势及警示是否要拓展抗真菌药物谱显得尤为重要,多组织系统均存在真菌源性感染,source: e. musial, et al, clinical microbiology reviews, oct 1988, vol 1 no. 4, p. 349-346,真菌检测的适用对象,最需要实施真菌检测的, 主要是免疫力下降的患者： 肿瘤患者 (肿瘤医院或肿瘤科、血液科) 艾滋病患者 (关爱医院) 老年患者 (高干病区) 器官移植患者 长时间大剂量注射抗菌药物的患者（icu、感染科、呼吸科、术后感染治疗） 其他需要开展真菌检测的单位/科室 皮肤科/皮防所/性防所 等 口腔科 泌尿科 妇科,快速抗真菌药敏结果提供了更确切的信息，对治疗方案起决定性作用，并有助于临床真菌感染的管理 有利于节省患者医疗费用 提升医院护理水平，加速病床周转率,抗真菌敏感性试验的必要性,atb fungus 3,标准: 遵循eucast 和 clsi标准 判读方便: 可肉眼判读，也可atb自动判读 全面: 涵盖抗真菌感染治疗常用药物,atb fungus 3与atb fungus 2的区别,伏立康唑: 新增抗真菌药物，含 8 个 mic浓度 5-氟胞嘧啶: 减少了 mic值 保留折点浓度，可报 s/i/r 结果 氟康唑: 保留 8 个 mic浓度，减少 0.25mg/l 和 0.5mg/l 两性霉素 b and 伊曲康唑: 未做改动，含 6 个 mic浓度,atb fungus 3 试条的接种,32 x 135 l,api 0.85%氯化钠培养基 api 悬浮液培养基 2 mcf,24-48 小时 : 假丝酵母菌属 48小时 : 新型隐球菌 35 +/- 2c,20l,atb f2 培养基,如何判读 atb fungus 3,与对照孔相比，观察每个孔的生长情况 = 给每孔打分 黑色背景下,确认得分,在测试孔周边的生长迹象应判为 0 或 1 但 对两性霉素b 应判为 1 ,结果,自动判读: 结果以 mic 和 s/i/r 显示 atb new软件可自动进行判读 英文软件需升级至int0 05 或 g0l0 05 expert 肉眼判读: 请参考包装说明书中提供的折点,判读 两性霉素b 的结果,两性霉素 b: mic值为得分为“0”的最小浓度,0.5 1 2,4 8 16,amb,肉眼判读,氟康唑, 伊曲康唑, 伏立康唑 : mic值为得分为“2, 1 或 0”的最小浓度,1 2 4 8,32 64 128,fca,判读 唑类 结果,肉眼判读,结果只有 s/i/r,5fc,16,4,判读 5-氟胞嘧啶 结果,肉眼判读,对 假丝酵母菌属 的结果解释,clsi 折点:,目前没有官方推荐，文献提供如下信息,对 新型隐球菌 的结果解释,判读难点,拖尾生长 在唑类药物孔中的微弱生长 (得分 = 1 或 2) 导致对 mic值高估 可能被误判为耐药,control,例如: 在如下所有氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑 孔中都有拖尾生长,1 2 4 8 0.125 0.25 0.5 0.06 0.125 0.25 0.5,16 32 64 128 1 2 4 1 2 4 8,fca itr vrc,边缘生长 amb: 应得分 1 fca, itr 或 vrc: 应得分 0 或 1 例如: 孔 0.5 和 1 = 得分=1,0.5 1 2,4 8 16,amb,判读难点,结果及时: 24小时获得 假丝酵母菌属 结果 48小时获得 新型隐球菌 结果 即用 + 易用 标准化微量稀释法，复现性好 遵循 clsi 和 eucast 推荐方法 能很好检测获得性耐药 两种判读方法可灵活选择：肉眼 或 机读,atb fungus 3,真菌培养及鉴定药敏的全面解决方案 最快可实现48 小时内从接种到药敏结果报告,直接镜检,分离培养+鉴定 candida id2, 37c，24-48小时,粉色菌落,白色菌落,鉴定,vitek 2 yst 约15小时,api 20c aux 30c, 24-48小时,api candida 37c 24-48小时,药敏,atb fungus 3 35c 24-48小时,vitek ybc 30c 24-48小时,vitek 2 ast-ys01 约14-22小时,相关产品信息,标本采集： 血培养： bact/alert fa 中和抗生素需氧培养瓶 ref.259791 copan拭子: 尿道用 ref. 501cs01; 阴道用 ref. 509cs01, 511cs01 培养: 产色鉴定培养基: chromid candida ref. 43631, 43639 普通真菌培养：沙保弱庆大霉素氯霉素平板 ref. 43171 鉴定: vitek 2 yst ref. 21343 vitke ybc ref. v1303 atb id 32c ref. 3