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科 室 培 训 BNP的检测及临床意义 检验科: 2018年6月 目 录 BNP概述及其生物学特性 1 BNP临床意义 2 BNP检测原理及方法 3 概述 1 1BNP概述 利钠肽家族作为内分泌激素,能够通过调节心脏和肾脏的功能达到维持机体的内稳态。对 利钠肽的研究表明,心力衰竭等心脏病患者的利钠肽水平升高,升高的利钠肽提示心血管事 件的高危险性,监测利钠肽能够帮助诊断和判断预后。利钠肽能够抑制心肌的过度增殖和 纤维化,具有改善心肌梗死和心衰时的心肌重构作用。 分类:A型利钠肽(心钠素/房钠肽,ANP)、B型利钠肽 (脑钠肽/钠尿肽,BNP)、C型利 钠 肽、D型利钠肽、肾素利钠肽 1 它们分别是心钠肽( atrial natriuretic peptide, ANP )和脑钠肽( Brain Natriuretic Peptide, BNP), ANP主要是由心房分泌,而BNP主要由心室分泌。 两种激素的生理生化功能相互依赖。它们是平衡机体水 钠代谢和维持血压的主要调控因子。 目前为止,已经确认有两种多肽可由由心脏分泌通过 心肌细胞拉伸进入血液循环。 BNP概述 1 脑钠肽(Brain Natriuretic Peptide ,BNP)又称B型利钠肽(B-type Natriuretic Peptide)、脑利钠肽, 由于它首先是由日本学者Sudoh等于1988年从猪脑分离出来因而得名,实际上它主要来源于心室。 BNP具有重要的病理生理学意义,它可以促进排钠、排尿,具较强的舒张血管作用,可对抗肾素-血 管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的缩血管作用,同ANP一样是人体抵御容量负荷过重及高血压的一个 主要内分泌系统。心功能障碍能够极大地激活利钠肽系统,心室负荷增加导致BNP释放。 BNP概述 1 BNP的分布体与降解 BNP广泛分布于脑、脊髓、心肺等组织,其中以心脏含量最高。脑内以延髓含量最高,中枢神经系 统的BNP含量高于ANP,脑与脊髓内BNP含量约较ANP含量高13倍。心脏内BNP主要存在于左、右 心房,其中右心房含量为左心房3倍多,心室的BNP含量约不足心房的1/20,心室BNP含量少是因为 BNP前体并不储存在心室中,只有当室壁张力升高时才迅速刺激BNP基因高表达,大量合成BNP分 泌入血,换句话说,BNP在心室肌内储存极少。在房间隔、房室瓣、主动脉、肝动脉与肺静脉壁内 亦含有少量BNP。 BNP概述 1 BNP的分布体与降解 BNP的清除主要通过两条途径: 第一:通过C受体介导将BNP内吞入胞内,再由溶酶体酶降解; 第二:由中性肽链内切酶对BNP降解,此酶在肺脏及肾脏中浓度较高。 ANP较BNP对中性肽链内切酶的亲和力要大的多,但第二种途径仍为BNP代谢的主要途径,再由于C 受体对ANP的亲和力亦高于BNP,这样造成BNP的生物半衰期(20分钟)长于ANP(约3分钟)。 BNP概述 1BNP生物学特性 BNP的结构与分泌 人的心肌细胞首先合成的是含有108个氨基酸的BNP 前体,在受到刺激后在内切酶作用下被切割为含有76 个氨基酸的N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)和含 有32个氨基酸的活性C端多肽(BNP),释放入血。 1 由心室分泌,通过心肌细胞拉伸进入血液循环,是含76个氨基酸的多 肽 直链结构,不具有生物学活性,由肾脏清除(肾小球滤过) 半衰期为90-120min,体外稳定,BNP为22min 血液中浓度高(为BNP 1520倍),血中浓度与心功能障碍程度呈 正相关 NT-proBNP水平不受体位、日常活动等因素的影响,也不存在日内 或日间的波动,具有良好的重复性 NT-proBNP 2 NT-proBNP的临床应用 心源性(心力衰竭)与非心源性呼吸困难的鉴别 判断心力衰竭的严重程度和心衰患者的管理 指导和监测心力衰竭的治疗 评价ACS的心功能与预后 评估心力衰竭的预后 2 NT-proBNP与急性心力困难 有急性呼吸困难症状的病人 病历,体格检查,CXR, ECG,NT-proBNP水平测定 NT-proBNP 300ng/ml NT-proBNP 灰区 NT-proBNP 年龄截点 NT-proBNP 10,000ng/ml 心衰不可能 进一步评估非心源 性的呼吸困难 心衰有可能 必要的临床相关性 ,要进行合理的分 类和治疗,可能会 早夭。 心衰很可能 进行合理的分类和 治疗 有心衰且可能很严 重 住院,严密监控 图示:急性呼吸困难病人诊断流程 2 NT-proBNP的临床应用 NT-proBNP400pg/ml,心衰可能性很小,其阴性预测值为90% NT-proBNP1500pg/ml,心衰可能性很大,其阳性预测值为90% 急诊就医的明显气急患者,如果NT-proBNP水平正常或偏低,几乎可以除 外急性心衰的可能性。 急性心力衰竭诊断和治疗指南 NT-proBNP可用于评估急性心衰的预后 临床过程中,NT-proBNP的持续走高,提示预后不良。 3 NT-proBNP的检测原理 检测卡卡槽 内置打印机 触摸显示屏 手写笔 ID芯片插口 按键 电源开关 以太网接口 USB接口 操作模式选择开关 电源接口 串口 (用R232数据线连接电脑 ) 3 NT-proBNP的检测原理 一、工作原理 使用蓝光LED作为激发光源,检测时,将经缓冲液充分混匀后的检测样本加入到检测卡的加样孔,样 本中的被分析物在层析过程中形成免疫复合物。当检测卡被插入到检测仪中,光源照射到检测卡的检 测区和质控区域,激发附着的荧光物质,发射光被收集并转化为电信号,电信号的强弱和荧光分子数 量严格相关,检测仪自动扫描并计算出待测样本中被分析物的含量。 3 NT-proBNP的检测原理 方法:双抗体夹心法 硝酸纤维素膜包被的BNP单克隆抗体、荧光标记的抗兔IgG多克隆抗 缓冲液主要为磷酸盐缓冲液(PBS) 3 NT-proBNP的临床应用 打印系统 核心板 屏幕驱动板 控制板 检测器 传送系统 3 NT-proBNP的临床应用 1.开机4.加样样5.测试测试 6.结结果录录 入 2.2.模式模式选择选择选择选择3.3.插入插入IDID芯片芯片 基本操作流程 操作模式 选择开关 电源 接口 电源 开关 3 NT-proBNP的临床应用 吸取血液样本,全血75ul或 血清/血浆57ul,加入缓冲液 中混匀. 取出铝袋中检测卡,将 稀释后的样本混合物 75ul加入检测卡样本孔 将加好样本的试剂卡插入 试剂卡承载器。插卡时的 最佳方式为食指托住卡条 架,拇指向里推到位 4 心衰的病因 1.基本病因 几乎所有的心血管疾病最终都会导致心力衰竭的发生,心肌梗死、心肌病、血流动力学负 荷过重、炎症等任何原因引起的心肌损伤,均可造成心肌结构和功能的变化,最后导致心 室泵血和(或)充盈功能低下;早产儿-动脉导管未闭。 2.诱发因素 在基础性心脏病的基础上,一些因素可诱发心力衰竭的发生。常见的心力衰竭诱因如下: (1)感染 如呼吸道感染,风湿活动等。 (2)严重心律失常 特别是快速性心律失常如心房颤动,阵发性心动过速等。 (3)心脏负荷加大 妊娠、分娩、过多过快的输液、过多摄入钠盐等导致心脏负荷增加
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