红细胞渗透脆性.doc

红细胞渗透脆性试验实验目的： 学习测定红细胞渗透脆性的方法实验原理： 将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40%0.45%NaCl溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30%-0.45%NaCl溶液）。对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。实验对象 家兔实验器材 试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。实验步骤（一）低渗盐溶液的配制 取试管十支，洗净烤干，用玻璃铅笔编号，排在试管架上，参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2 ml。试管号试管123456789101%NaCl（ml）1.401.301.201.101.000.900.800.700.600.50蒸馏水（ml）0.600.700.800.901.001.101.201.301.401.50NaCl浓度（%）0.700.650.600.550.500.450.400.350.300.25（二）枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖，剥离颈总动脉，插管，将血放入烧杯内，烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液，血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1，轻摇烧杯使之混匀。观察项目用注射器向每个试管内加入兔血一滴，用拇指堵住试管口，将试管颠倒23次（不要用力振荡以免溶血），在室温下静置1小时，然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。1、试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。2、试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，才出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵力（最大脆性）。3、试管内溶液呈现透明红色，说明红细胞全部溶解，称为完全溶血，首先引起红细胞全部溶解的低渗盐溶液浓度，即红细胞的最大抵抗力（最小脆性）。通过试验，记录红细胞的脆性范围。思考题 1. 为什么同一个体的红细胞渗透脆性有最大值和最小值？ 2. 红细胞渗透脆性实验的临床意义。 3. 输液时为何要输等渗溶液？结果分析： 将红细胞悬浮于低渗盐溶液中，水将在渗透压的作用下渗入细胞，于是红细胞发生膨胀，由正常的双凹圆碟形变成球形，并开始破裂而发生溶血。红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力，这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性的指标。同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。生理情况下，衰老的红细胞可变形性减小，变成球形，因而对低渗盐溶液抵抗力低，会先发生破裂，正常人刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为0.46%0.42%NaCl溶液；而较幼稚的红细胞的抵抗力高，较后发生破裂，正常人出现完全溶血的NaCl溶液浓度为0.34%0.32% NaCl溶液。红细胞膜对水分子可自由通透，水分子依渗透压梯度进入红细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，红细胞在蒸馏水中立即发生溶血。红细胞膜对尿素分子可自由通透，尿素分子依浓度梯度进入红细胞，而红细胞内的物质不能自由通过红细胞膜，导致红细胞内渗透压增高，水进入细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液，但不是等张溶液。NaCl分子和红细胞内的物质都不易透过红细胞膜，故红细胞在等渗的0.85%的NaCl溶液中不会发生溶血，因此，0.85%的NaCl溶液既是等渗溶液又是等张溶液。1. 红细胞在小于或等于0.46%浓度的低渗盐溶液中会发生溶血。2. 正常人红细胞渗透脆性最高值为0.46%0.42% 的NaCl溶液，最低值为0.34%0.32% 的NaCl溶液。3. 红细胞在等渗盐溶液中为双凹圆碟形，在低渗盐溶液中为球形。4. 红细胞在等渗的尿素溶液或蒸馏水中会立即发生溶血。【实验报告要点】一、 为什么同一个体的红细胞渗透脆性有最大值和最小值？同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。生理情况下，衰老的红细胞可变形性减小，变成球形，因而对低渗盐溶液抵抗力低，会先发生破裂；而较幼稚的红细胞的抵抗力高，较后发生破裂。将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中，刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最大渗透脆性，出现完全溶血的溶液浓度，为该血液中红细胞的最小渗透脆性。二、 红细胞在等渗的1.9%尿素溶液中会发生什么现象？为何出现这种现象？红细胞在等渗的1.9%尿素溶液中会立即溶血。因红细胞膜对尿素分子可自由通透，尿素分子依浓度梯度进入红细胞，而红细胞内的物质不能自由通过红细胞膜，导致红细胞内渗透压增高，水进入细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液，但不是等张溶液。【参考内容】一、红细胞渗透脆性实验的临床意义【临床意义】 红细胞在低渗盐水中，水分透过细胞膜可使红细胞逐渐胀大而破坏。本试验是测定红细胞对各种浓度的低渗溶液的抵抗力。红细胞对低渗溶液抵抗力与其厚度有关，厚度越大，膜面积与体积比值越小，则渗透脆性越大。 1.红细胞