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江苏农林职业技术学院讲稿 第 3 页 共 3 页第七、八讲授课内容实训一 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备授课时数4教学目标掌握盐析沉淀法制备酪氨酸的原理和操作；掌握等电点沉淀法制备乳蛋白素的原理和基本操作。教学重点盐析和等电点沉淀法的原理和操作教学难点盐析和等电点沉淀法的原理教材教具教学内容（含教学步骤、时间分配、教法学法、作业布置等）实训一 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备（4学时）一、目的和要求1、掌握盐析法的原理和操作；2、掌握等电点沉淀法的原理和基本操作。二、实验原理牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，乳蛋白素是一种广泛存在于乳品中，合成乳糖所需要的重要蛋白质。酪蛋白在pH4.8左右会沉淀析出，但乳蛋白素在pH3左右才会沉淀。利用此一性质，可先将pH降至4.8，或是在加热至40的牛奶中加硫酸钠，将酪蛋白沉淀出来。酪蛋白不溶于乙醇，这个性质被利用来从酪蛋白粗制剂中除去脂类杂质。将去除掉酪蛋白的滤液的pH调至3左右，能使乳蛋白素沉淀析出，部分杂质即可随澄清液除去。再经过一次pH沉淀后，即可得粗乳蛋白素。三、实验材料1、材料脱脂牛乳或低脂牛乳（50ml）、蒸馏水2、器材100ml量筒、100ml烧杯（2个）、250ml烧杯、水浴锅、玻璃棒、滤布、布氏漏斗、滤纸、抽滤瓶、真空泵、pH计、pH试纸、离心机、离心管、磁力搅拌器、干燥箱（器）。3、试剂无水硫酸钠、无水乙醇、浓HCl、NaOH、五氧化二磷。0.1mol/L HCl溶液配制：用洁净的量杯（或量筒）量取9mL浓盐酸，注入盛有1000mL水的试剂瓶中，盖上玻璃塞，摇匀。0.1mol/L NaOH溶液配制：称取4克氢氧化钠固体，用少量蒸馏水溶解，将溶液转移到1L的容量瓶中，定容，摇匀。四、实验步骤1、盐析沉淀法制备酪氨酸（1）将50ml牛乳倒入250ml烧杯中，于40水浴中加热并搅拌。（2）向上述烧杯中缓缓加入（约10min内分次加入）10g无水硫酸钠，再继续搅拌10min。（3）将溶液用细布过滤，分别收集沉淀和滤液。沉淀悬浮于30ml乙醇中，倾于布氏漏斗中过滤除去乙醇溶液，抽干。将沉淀从布氏漏斗中移出，在表面皿上摊开以除去乙醇，干燥后得到的是酪蛋白。准确称重。2、等电点沉淀法制备乳蛋白素（1）将制备酪蛋白操作步骤（3）所得滤液置于100ml烧杯中，一边搅拌，一边利用pH试纸以浓盐酸调整pH至30.1。（2）将溶液倒入离心管中，6000r/min离心15min，倒掉上层液。（3）取出沉淀干燥，并称重。五、注意事项离心机的使用安全：1、使用前，离心管和离心物一定要对称平衡；2、离心开始时，设置好了转速和时间，一定要等到转速稳定了后，人才能离开；3、离心结束，只有仪器报警了，且转速完全为零后，才能打开离心机盖。六、结果与讨论1、计算出每100ml牛乳所制备出的酪
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