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蜜枣中维生素C和蛋白质含量的测定摘要：维生素C是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得的一类微量有机物质，在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用,蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。【3】本文用2，4-二硝基苯肼比色法测定的维生素C的含量。两种蜜枣维生素C含量的测定结果：麦加的蜜枣的维生素C含量15.53mg，伊拉克的蜜枣的维生素C含量16.42mg。用凯氏定氮法测定麦加，伊拉克的蛋白质的含量。两种蜜枣中蛋白质的总含量结果：麦加蜜枣的蛋白质含量0.32%，伊拉克蜜枣的蛋白质含量0.31%。关键词：蜜枣，维生素C，分光光度法，蛋白质，凯氏定氮法。凯氏定氮法测定麦加，伊拉克的蛋白质的含量。两种蜜枣中蛋白质的总含量结果：麦加蜜枣的蛋白质含量0.32%，伊拉克蜜枣的蛋白质含量 0.31%。 前言蜜枣( 又称蜜丝枣) ：是青枣中最甜的品种，品质极佳， 8一9月份盛花期，果为椭圆型，叶片圆形，花苞是淡黄色的。蜜枣果实树可分为公和母。公树不发育果实而母树能发育果实，刮风时公树刮到母树互相串花然后能发育果实。蜜枣的起源是我国的山东福建、国外的麦加、伊拉克、阿拉伯、印度等国家。【1】 蜜枣能提高人体免疫力，药理研究发现，蜜枣能促进白细胞的生成，降低血清胆固醇，提高血清白蛋白，保护肝脏。蜜枣中还含有抑制癌细胞，甚至可使癌细胞向正常细胞转化的物质；经常食用鲜枣的人很少患胆结石，这是因为鲜枣中丰富的维生素C，使体内多余的胆固醇转变为胆汁酸，胆固醇少了，结石形成的概率也就随之减少；对病后体虚的人也有良好的滋补作用；蜜枣所含的芦丁，是一种使血管软化，从而使血压降低的物质，对高血压病有防治功效；蜜枣还可以抗过敏、除腥臭怪味、宁心安神、益智健脑、增强食欲。【2】维生素C在胶原质的形成上扮演很重要的角色。胶原质对于人体的组织细胞、牙龈、血管骨骼、牙齿的发育和修复是一种重要的物质；帮助人体内铁的吸收；常被推荐为预防婴猝死症物质；抽烟者和老人需要更多的维生素(一支香烟可以破坏25100mg的维生素C）。增强治疗尿道感染的药物之疗效；并增强免疫系统功能；具有抗癌作用；有助防止亚硝基胺（致癌物质）的形成；在人体中缺泛维生素C可造成坏血病的早期症状是倦怠、疲乏、牙龈疼痛出血、伤口愈合不良、关节肌肉短暂性疼痛，易骨折等。【3】蛋白质是生物膜的另一种主要成分。根据蛋白质和膜的结合程度的不同，蛋白质分为整合蛋白和边周蛋白(又称外在蛋白)两类，整合蛋白约占膜蛋白总量的70%。各种蛋白质在膜上的分布是不对称的。膜蛋白不仅有机械支持作用，而且在物质运输以及受体、抗原和酶的形成等方面起着重要作用。蛋白质的缺泛可造成成年人：肌肉消瘦、肌体免疫力下降、严重者将产生水肿。未成年人：生长发育停滞、贫血、智力发育差。蛋白质过量：蛋白质在体内不能贮存，多了肌体无法吸收，过量摄入蛋白质，将会因代谢障碍产生蛋白质中毒甚至于死亡。【5】维生素C和蛋白质是人体不可或缺的微量元素。它们是人体的构造者，又是人体的调节者，是我们人体的生命之源。1.实验部分维生素C的测定1.1 实验原理原理：总抗坏血酸包括还原型，脱氢型和二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2,4-二硝基苯肼作用生成红色脎，其呈色强度与总抗坏血酸含量成正比，可进行比色定量。该法具有良好的选择性，仪器设备简单，操作简便，准确可靠，已用于药品和合成样品中维生素C的测定。1.2 仪器与试剂1.2.1 主要仪器 722 型光栅分光光度计（伤害第三分析仪器厂制造）;电子天平;202_AO型台式干燥箱（上海镜屏仪器仪表有限公司通州分公司）, SX2系列箱式电炉（上海镜屏仪器仪表有限公司通州分公司），KOM型可调控温电热板（山东鄄城华鲁仪器公司）。 1.2.2 主要试剂（1）4.5mol/L硫酸 量取250mL浓硫酸小心加入700mL蒸馏水中，冷却后用水稀释至1000mL；(2)85%硫酸 小心加900mL浓硫酸于100mL蒸馏水中；（3）2% 2,4-二硝基苯肼 溶解2g 2,4-二硝基苯肼于100mL 4.5mol/L硫酸中，过滤。保存于冰箱内，每次使用前必须过滤。（4）2% 草酸溶液 溶剂2g草酸于100mL 蒸馏水中；（5）1% 草酸溶液 溶剂2g草酸于100mL 蒸馏水中；（6）2% 硫脲溶液 溶剂2g硫脲于100mL 1% 草酸溶液中；（7）1% 硫脲溶液 溶剂1g硫脲于100mL 1% 草酸溶液中；(8) 1mol/L盐酸 取83.3mL盐酸，加水稀释至1000mL；(9)抗坏血酸标准溶液 称取100mg抗坏血酸溶液溶解于100mL 2%草酸溶液中，此溶液每毫升相当1mg抗坏血酸；(10)活性炭 将100g活性炭加到750mL 1mol/L盐酸中，回流1-2h,过滤后用水洗数次，至滤液无铁离子（Fe3+）为止，然后置于110烘箱中烘干。1.3实验方法1.31 最大吸收波长的选择吸取11.76g/mL的抗坏血酸标准溶液在450nm到550nm之间进行扫描，实验结果如下：波长450nm460nm470nm480nm490nm500nm510nm520nm530nm540nm550nm吸光度0.1430.1580.1750.1920.2070.2200.2300.2390.2310.2200.194(表-1)最大波长的选择实验结果明：在520nm处有最大吸收，因此本文选用520nm作为测定波长。1.3.2标准曲线的绘制（1）加入2g活性炭于50ml标准溶液中，振摇1min后过滤。吸取10.00ml过滤液放入500ml容量瓶中加入5.0g 硫脲，用1%草酸溶液定容。将抗坏血酸标准溶液稀释，使抗坏血酸浓度为19.96g/mL。吸取5ml,10ml,20ml,25ml,40ml,50ml,60ml此稀释液，分别放入7个100ml容量瓶中，用1%硫脲溶液定容，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为0.980g/ml, 1.960g/ml,3.920g/ml, 4.900g/ml,7.840g/ml,9.800g/ml, 11.76ug/ml,作为抗坏血酸标准使用液。（2）于7个试管中分别吸取4ml个不同浓度的抗坏血酸标准使用液，吸取4ml水于试剂作为空白管。各管再加入1.0ml 2% 2,4-二硝基苯肼溶液，混摇后，将8个试管放入38恒温水浴中保温3h。3h后将8个试管取出，全部放入冷水后，向每一个试管中加入5ml 85%硫酸，滴加时间至少需要1min 边加边摇。将试管自冰水取出，在室温放置30min后，以试剂空白管为参比，比色测定。 以吸光值为纵坐标，抗坏血酸含量为横坐标绘制标准曲线。（表-2）抗坏血酸标准溶液的曲线体积（ml）50010.0020.0025.0040.0050.0060.00浓度（g/ml）0.9801.9603.9204.9007.8409.80011.76吸光度（A）0.0210.0300.0660.0910.1490.1940.239Parameter valueA -0.00556B 0.02027 R 0.99791Y=A+B*X Y=-0.00556+0.02027X (Y:吸光度 X:对应的浓度)1.4 样品分析1.4.1 样品处理5g左右的样品加入等量的1% 草酸溶液磨成浆，倒入100mL容量瓶内，用1%草酸溶液定容并混和，过滤备用。量取25.0mL上述样品滤液，加入2g活性炭，振摇1min，过滤（弃去最初数毫升滤液）。吸取10.0mL滤液，加入10.0mL 2%硫脲溶液并混要，此为样品稀释液。取3支试管，各加入4mL经氧化处理的样品稀释液。其中一支试管作为空白，向其余两试管加入1.0mL 2% 2,4-二硝基苯肼溶液，将所有试管38恒温水浴中保温3h。3h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷到室温，然后加入1.0mL 2% 2,4-二硝基苯肼溶液，在室温中放置10-15min后冰水内。其余步骤同试样。当试管放入冰水冷却后，向每一试管（连同空白管）中加入85% 硫酸5mL,每管滴加时间至少需要1min,边加边摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置30min后比色测定。用1cm比色皿，以空白液为参比液，在最大波长处测定吸光值。2.实验结果按下公式计算维生素C的含量 X=式中： X每百克样品中总抗坏血酸含量；mg C由标准曲线差得或由回归方程算得试样测定液总抗坏血酸含量（g/ml）V-试样用草酸溶液（10g/L）定容的体积；mLF-样品氧化处理过程中的稀释倍数；m-试样质量；g（表-3）根据标准曲线和公式计算出麦加蜜枣中的维生素C含量的测定样品样品取样量（g）吸光度(A)样 液 浓 度（g/ml）蜜枣维生素含量 mg麦加（1）5.1770.0774.073015.73麦加（2）5.1670.0703.727714.43麦加（3）5.2540.0824.319716.44（表-4）根据标准曲线和公式计算出伊拉克蜜枣中的维生素C含量的测定样品样品取样量（g）吸光度(A)样 液 浓 度（g/ml）蜜枣维生素含量 mg伊拉克（1）5.1850.0854.467717.23伊拉克（2）5.1730.0743.929915.19伊拉克（3）5.2480.0844.418416.84(表-5)两种蜜枣的平均值 样品样液吸光度（A）样液浓度（g/ml）维生素含量 mg平均值相对平均偏差麦加0.0774.093215.7315.534.76%0.0703.738714.430.0824.436316.84伊拉克0.0854.498217.2316.424.99%0.0743.941315.190.0844.447616.843. 蛋白质的测定3.1 实验原理蛋白质是含氮的有机化合物。食品与浓硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。3.2 仪器与试剂3.2.1 主要仪器AL204-IC电子分析天平（精确度0.0001g）凯氏蒸馏装置；凯氏瓶；3.2.2 试剂（1）所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。（2） 硫酸铜；（3） 硫酸钾；（4） 浓硫酸；（5） 2% 硼酸溶液：溶解2g硼酸于98mL蒸馏水中。（6）混合指示液：用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。（7）40% 氢氧化钠溶液：溶解40g氢氧化钠于60mL蒸馏水中。（8）0.05mol/L盐酸标准溶液：取4.2ml盐酸于1000mL蒸馏水中。3.3 实验方法3.3.1 样品的测定1.样品的消化：精密称取2.0g左右的固体样品（约当氮30-40mg），移入干燥的100mL定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20毫升硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5小时。取下放冷，小心加20mL水，放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸同一方法做试剂空白试验。2. 蒸馏装置准备：于水蒸气发生器内装水约2/3处加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸。3.蒸馏：向接收瓶内加入10mL 2%硼酸溶液及混合指示剂1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0mL样品消化液由小玻璃杯流入反应室，并以10mL水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将10mL 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其缓慢流入反应室，立即将玻璃盖塞紧，并加水于小玻璃杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏，蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏5min。4.滴定：移出接收瓶，以0.05mol/L盐酸标准溶液定至灰色为终点.同时吸取10.0ml试剂空白消化液进行蒸馏，滴定操作。3.3.2 结果与分析X=式中： X-样品中蛋白质的百分含量，%； V1-样品消耗盐酸标准液的体积，mL；V2试剂空白消耗盐酸标准液的体积，mLC-盐酸标准溶液的当量浓度；moL/L0.014-1N盐酸标准溶液1ml相当于氮克数；g； m-样品的质量（体积），g（mL）； F-氮换算为蛋白质的系数。地名样品质量（m）样品消化盐酸标准溶液的体积(mL)空白消耗盐酸标准溶液的体积（mL）蛋白质的百分含量（%）平准值相对平准偏差麦加1.84613.760.010.33%0.32%3.13%1.97813.850.010.31%1.78613.400.010.33%伊拉克1.96613.960.010.31%0.31%2.26%1.86013.800.010.33%1.98014.000.010.31%各地蜜枣中蛋白质的含量（表-6）4. 分析与讨论4.1 分析实验表明，在不同地区采取的蜜枣中维生素C含量和蛋白质含量也不同：麦加蜜枣中维生素C含量：15.53mg；伊拉克蜜枣中维生素C含量：16.42mg；麦加蜜枣中蛋白质含量：0.32%；伊拉克蜜枣中蛋白质含量：0.31% 。通过比较可以得出：伊拉克蜜枣中维生素C的含量比麦加蜜枣中的维生素C含量高，而麦加蜜枣的蛋白质含量比伊拉克蜜枣的蛋白质含量高。4.1.2 讨论维生素C在胶原质的形成上扮演很重要的角色。胶原质对于人体的组织细胞、牙龈、血管骨骼、牙齿的发育和修复是一种重要的物质。蛋白质是生物膜的另一种主要成分。根据蛋白质和膜的结合程度的不同，蛋白质分为整合蛋白和边周蛋白(又称外在蛋白)两类，整合蛋白约占膜蛋白总量的70%。用分光光度法测定蜜枣中维生素C含量的测定方法,用凯氏定氮法测定蜜枣中蛋白质含量的测定，通过精密度和准确度的考察，证明本法测定蜜枣中维生素C和蛋白质含量切实可行的好办法。该法准确，选择性好，能有效消除干扰离子的影响。5. 总结通过实验测定， 用2，4-二硝基苯肼比色法处理时不同国家蜜枣中的维生素C含量时：不同国家的蜜枣中维生素C的含量分别为麦加15.53，伊拉克16.42。维生素C含量多得是：伊拉克。用凯氏定氮法处理蜜枣中蛋白质时不同国家蜜枣中蛋白质的含量也不同，测定结果：麦加0.32%，伊拉克0.31%。两种地区中蛋白质含量最大的是：麦加。 在人体中缺泛维生素C可造成坏血病的早期症状是倦怠、疲乏、急躁、呼吸急促、牙龈疼痛出血、伤口愈合不良、关节肌肉短暂性疼痛，易骨折等。蛋白质在体内经过消化被水解成氨基酸被吸收后，重新合成人体所