课件：血液标本采集.ppt

introduction,临 床 检 验 基 础,授课教师：李宗吉,,Company Logo,医学检验学（clinical laboratory medicine）临床检验基础是我国高等医药院校检验专业学生的必修课之一。属于实验室医学。 临床检验基础是借助细胞学、生物化学、微生物学、免疫学和寄生虫学等先进的检测技术，对患者的血液、体液、分泌物、排泄物和细针穿刺吸取物等标本进行检验、分析、以获取病原体、病理变化和脏器功能状态等资料的一门学科。,,Company Logo,,Company name,临床检验的一般方法,1、目视检查,直接观察标本：颜色、透明度、性状，有无 凝块或寄生虫,2、理学检查,液体的相对密度、血液比粘度、红细胞沉降 率、红细胞比积等病理变化,3、化学检查,定性和定量检测标本化学成分的病理变化,4、显微镜检查,观察有型成分的数量和形态,5、自动化仪器检查,电子技术、程序控制的发展,,Company Logo,,Company name,绪 论,一、临床检验现状和特点 二、临床检验基础教学目的 三、学好临床检验基础的基本要求,,Company Logo,现状：虽然现代仪器检验已经部分替代了手工的筛检项目，但是对于患者异常标本的检测，仍需依赖于手工复核。,,Company name,一、临床检验基础的现状和特点,1.临床检验进入仪器化时代的特点,,Company Logo,生化仪 免疫仪 血液/尿液仪 自动生化分析仪 酶免疫测定仪 血细胞分析仪 血气分析仪 放射免疫测定仪 尿液分析仪 电解质分析仪 免疫荧光测定仪 血液凝固分析仪 电泳仪 化学发光免疫仪 血小板聚集仪 干化学分析仪 流式细胞仪 血液流变仪 即时检验仪 免疫电泳仪 凝血酶生成仪,,Company name,自动化仪器（举例）,,Company Logo,微生物仪 分子生物学仪 血培养检验系统 PCR扩增仪 微生物鉴定/药敏仪 核酸定量杂交技术 厌氧培养系统 DNA测序仪 核酸合成仪 生物分子图象析 生物芯片仪,,Company name,,Company Logo,,Company name,上世纪，血液学检测项目仪器化的发展过程 50年代初:美国学者Coulter研制了血细胞计数仪 60年代:普遍应用，可检测RBC、Hb、WBC 70年代:增加了PLT的测定 70-80年代:开发了白细胞分群及RDW等新项目 90年代:增加了白细胞分类、网织红细胞技术、幼稚细胞检 出等指标,,Company Logo,2.临床仪器检验需要需要实施全程质量保证 （1）分析前：涉及标本的采集和转运 标本采集的基本原则：保持当时生理或病理状态下离体标本质和量的完整性。 转运：及时送检标本 影响检测结果的因素：1）生理因素；2）饮食因素； 3）药物因素 （2）分析中：包括检测方法、仪器和试剂的质量等。 （3）分析后：结果复核（患者信息检验结果疾病）,,Company name,,Company Logo,实验的质量控制 全面质量控制：分析前、分析中和分析后三个环节。,,Company name,分析前,分析中,申请检验,病人准备,标本采集,标本运送,临床医师,报告信息与临床情况的吻合度,运送报告,标本处理,分析测定,分析结果,室内审核,保留标本,登记填发报告,分析后,全面质量控制图,,Company Logo,3.现代仪器检验需要合格的检验人员和标准化的检验方法,,Company name,,Company Logo,4.现代仪器检验更强调生物安全 生物安全对操作者本人，对患者及其他人员，对环境同样重要,,Company name,,Company Logo,1.为疾病诊断和鉴别诊断提供实验室检查客观依据,,Company name,二、临床检验基础教学目的 在医学中的作用,临床检验的结果是支持诊断、鉴别诊断、甚至确定诊断的 主要依据。,例：anemia,依据：血中红细胞和血红蛋白量减少,leukemia,依据：血象和骨髓象,肾脏有实质性损伤的依据,尿液中出现蛋白、细胞 管型,问：tumor？,,Company Logo,2.为疾病疗效检测和预后判断提供动态变化依据 3.为预防疾病提供检测依据 4.为科学研究提供医学检验基本数据、基本检验方法和操作技能,,Company name,在疾病过程中，血液、体液、分泌物和排泄物也 会随之发生相应的变化,如血象和肿瘤细胞学的普查等,,Company Logo,,Company name,1.掌握临检的基本理论。,2.掌握临检的基本实验技能。,3.熟悉方法学的评价。,4.熟悉检验项目的参考值和临床意义。,三、学好临床检验基础的基本要求,,Company Logo,一、血液的组成及理化特性 二、血液标本采集 标本采集的一般要求 血液标本类型 血液标本采集方法 血液标本抗凝 三、血液标本采集质量保证 采血服务 患者的要求 采血操作对检验结果的影响 血液标本运送、保存与处理,,Company name,第一章 血液标本的采集,,Company Logo,第一节 血液标本的采集,,Company Logo,,Company name,一、血液的组成及理化特性,（一）组成,全血,,Company Logo,,Company name,,Company Logo,,Company name,一、血液的组成及理化特性,（1）血量 血浆量与血细胞量的总和 成人约45升，约占体重的6%8% （2）颜色 红色, 血红蛋白 动脉血: 鲜红色。 静脉血: 暗红色。 严重贫血患者的血:红色变浅。 严重CO中毒或氰化物中毒:樱红色 高脂膳食后血浆:呈乳白色 溶血:呈不同程度的红色。,（二）理化特性,,Company Logo,均匀混悬状态: 1.红细胞膜唾液酸根带有负电荷，形成Zeta电位 2. 血浆成分、血浆粘度及血流动力学等,,Company name,（3）红细胞在血浆中的悬浮稳定性,,Company Logo,取决于血细胞比容和血浆粘度 健康成人: 全血粘度为生理盐水粘度的45倍 血浆粘度为生理盐水粘度的1.6倍左右,,Company name,（4）粘滞性,,Company Logo,全血比重: 男性约为1.0551.063 女性约为1.0511.060； 与红细胞的百分比有关 血浆的比重约在1.0251.030之间，与蛋白浓度有关。 血浆渗量（渗透压）： 290310mOsm/kgH2O。,,Company name,（5）比重和渗透浓度,,Company Logo,（6）pH 血液pH值为7.357.45 （7）凝固性 与凝血因子激活有关,,Company name,,Company Logo,（1）运输功能 氧气、营养成分、代谢产物 （2）协调功能 激素、酶类 （3）维护机体内环境稳定 水、电解质、体温、酸碱度 （4）防御功能 白细胞、抗体、补体、细胞因子；血小板、凝血因子,,Company name,（三）血液的功能,,Company Logo,1.全血 静脉全血（最多）、动脉全血、毛细血管全血 2.血浆 血浆（plasma）：全血抗凝离心后除去血细胞后的成分。 化学成分测定和凝血试验 3.血清 血清（serum）：是血液离体自然凝固后分离出来的液体。 临床化学和免疫学检测 4.分离或浓缩的血细胞成分 特殊检验,,Company name,（二）血液标本的类型,,Company Logo,血液标本的采集按部位分为皮肤（毛细血管）采血、静脉采血和动脉采血；按采血方式分为普通采血法和真空采血法。,,Company name,（三）血液标本采集方法,1、毛细血管采血：手指或耳垂，用于需血量少的检验，也主要用于儿童。左手中指或无名指指端尖内侧。,3、动脉血：血气分析多使用（，p）,2、静脉血：是最常用的标本，静脉穿刺是最常用的采血方法,,Company Logo,,Company name,1.毛细血管采血法,（1）器材：微量吸管、稀释液、消毒器材、采血针,,Company Logo,,Company name,采血针的宽度和采血深,,Company Logo,,Company name,（2） 采血部位,婴幼儿：大拇趾或足跟内外侧缘,耳垂：,不宜使用,手指：,严重烧伤患者：皮肤完整处,成人：左手无名指或中指指端内侧(WHO),,Company Logo,,Company name,1.轻轻按摩采血部位，使其自然充血。75%酒精棉球消毒。,2.待酒精挥发干后，用左手拇指和食指捏紧采血部位，右手持采血针，迅速刺入23m m。,3.擦去第一滴血，按需要依次采血。,4.采血完毕，用干棉球压住伤口片刻。,（3）采血步骤,,Company Logo,,Company name,（4）注意事项,1.采血部位不能有冻疮、紫绀、水肿和炎症等。,2.消毒后，待酒精干后采血。,3.取血时切忌用力挤压。,4.手工法时，采集标本的次序为: PLT RBC Hb WBC及分类,,Company Logo,,Company name,（5）方法学评价,1.操作方便； 2.每人的皮肤厚度不同，无法控制采血刺入的深度； 3.常需挤压诱导，导致组织液混入，影响结果准确性； 4.标本不能重复应用； 5.取血量少。,,Company Logo,2.静脉采血法,,Company name,（1）采血器材,注射器、压脉带、垫枕、75%酒精、碘酒、无菌棉签(球),用于需血量较多或全自动血液分析仪测定。,,Company Logo,,Company name,（2）采血部位,常用肘部静脉。也可手背或外踝静脉等。,（3）步骤（普通采血法）,核对 容器准备 病人准备体位 前臂肘窝正中静脉 采血 采血成功后，松止血带（30s） 将血液沿管壁缓慢注入 容器 松拳，按压 拔针头。,扎止血带 常规消毒,l 5度一30度角,,Company Logo,,Company name,,Company Logo,,Company name,（4）注意事项,1.防止标本溶血。,2.压脉带压迫时间不能过长。,3.切忌将注射器往静脉内推。,,Company Logo,,Company name,真空静脉(负压)采血法,器材：采血针和真空采血管,,Company Logo,,Company name,优点: 1、在完全封闭状态下采血,避免血液外溢,有利保存。 2、标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和试验用途。可根据需要选择相应的盛血试管,,Company Logo,,Company name,血清生化血库试验,快速血清分离生化免疫,惰性胶体+促凝剂,全血血液血常规试验,K2EDTA 或K3EDTA,血浆凝血试验 PT， TT， 凝血因子试验,枸橼酸钠,全血血细胞沉降率试验,血清葡萄糖试验,氟化钠+草酸钾,枸橼酸钠,,Company Logo,,Company name,多管血液采集顺序,,Company Logo,血液标本的处理、运送和保存,血液标本检测前的预处理 血液标本的运送 血液标本的拒收 血液标本的保存 检测后血液标本的处理,,Company Logo,血液标本检测前的预处理,1分离血清或血浆 2分离细胞 3添加剂的选择 为了快速获得血清有时还要使用促凝剂和分离胶等。常用添加剂的用途和特点见表1-3。,,Company Logo,,Company Logo,（二）血液标本运送 血液标本的运送可采用人工运送、轨道传送或气压管道运送等，无论采用哪种运送方式，都应该注意以下3个原则。,,Company Logo,血液标本的运送 实验室要制定标本接收的标准文件。因不同的检验项目对标本的要求不同，还要制定拒收标准。因“让步”而接收的不合格标本，其检验报告单上应注明标本存在的问题，在解释结果时必须特别说明。,,Company Logo,,Company Logo,需要注意的是，标本拒收不但造成检验费用增高和时间浪费，还可能延误诊治甚至危害患者。因此，涉及血液标本采集的所有工作人员，都必须在标本采集、转运和处理各个环节进行全面而规范的培训。,,Company Logo,（四）血液标本保存 血液标本保存应当在规定的时间内、确保标本特性稳定的条件下，按要求分为室温保存、冷藏保存、冷冻保存（表1-3-3）。,,Company Logo,,Company Logo,（五）检测后血液标本的处理 根据实验室生物安全通用要求要求： 将操作、收集、运输及处理废弃物的危险 减至最小。 将其对环境的有害作用减至最小。,,Company Logo,第二节 血液标本采集的质量保证 标本采集是检测前质量管理的主要内容，检测前的大部分工作是由患者、医生、护士、运送人员及检验人员在实验室以外的空间和进入检验过程前完成的，临床实验室难以监控这一过程中的每个环节。,,Company Logo,一、血液标本采集环境要求与生物安全 （一）环境要求 应该人性化设置，空间宽敞，光线明亮，通风良好，血液标本采集的台面高低和宽度适宜，座位舒适。 （二）生物安全 1防止交叉感染 2环境消毒,,Company Logo,二、血液标本采集的过程要求 （一）检验申请单 检验申请单或电子申请表中应包括患者最基本的信息，以识别患者和经授权的申请者，同时应提供相关的临床信息。相关的临床信息至少包括姓名、性别、年龄，以用于解读检验结果。,,Company Logo,（二）标本采集和处理的具体要求 实验室应向负责采集标本的人员提供标本采集和处理的具体要求（表1-4）。,,Company Logo,（三）标本信息完整性与接收 血液标本可通过检验申请单溯源到特定的个体，实验室不应接收或处理缺少标识的检验申请单和标本（表1-4-1）。,,Company Logo,,Company Logo,三、血液标本采集及检测结果的影响因素 （一）饮食和生理状态 患者饮食和生理状态对检验结果的影响见表1-5。,,Company Logo,,Company Logo,（二）药物 药物干扰检验结果主要有4条途径： 影响待测成分的物理性质。 参与检验过程的化学反应。 影响机体组织器官生理功能和（或）细胞活动中的物质代谢。 对机体器官的药理活性和毒性作用。,,Company Logo,（三）采血操作 1采血时间 2采血部位 3采血时体位 4压脉带的使用 （四）其他 1输液。 2溶血（表1-6） 3某些抗凝剂对标本的影响 4低温保存对标本的影响,,Company Logo,* 假设HCT为0.50,,Company Logo,显微镜及计数板的使用,显微镜和计数板的使用,,Company Logo,1、目镜,5、粗准焦螺旋,6、细准焦螺旋,3、镜臂,9、物镜,2、镜筒,10、标本推进尺,11、载物台,13、光阑,8、物镜转换器,1,6,5,4,3,15,14,13,12,11,10,9,8,2,7,4、标本移动旋钮,7、电源插座,12、聚光器,14、照明灯,15、镜座,,Company Logo,认识显微镜,,Company Logo,作用：进一步放大。 放大倍数常为10, 16。 目镜和物镜放大倍数的乘积就是显微镜的放大倍数。,目镜,,Company Logo,镜 筒,作用：安放镜头 连接目镜与物镜转换器，是光线的通道,,Company Logo,作用：握持部位。 支持镜筒和镜台的弯曲结构。,镜 臂,,Company Logo,作用：安放玻片标本。 中间有通光孔，上部有标本移动推进器。,载物台,,Company Logo,物镜转换器,作用：安放和转换 物镜镜头。,,Company Logo,物 镜,作用：放大物象。 标有放大倍数，如10、 20、 40、100等。 主要光学部件，决定光镜分辨力的高低。,,Company Logo,粗调螺旋,细调螺旋,调焦器,作用：调节焦距，使物象更加清晰。 粗调螺旋：升降载物台，升降幅度较大。向后旋转上升载物台；向前旋转下降载物台。 细条螺旋：升降镜筒，升降幅度较小。向后旋转上升载物台；向前旋转下降载物台。,,Company Logo,聚光器,作用：将光线集中到所观察的标本上，增加视野的亮度。,,Company Logo,显微镜的使用步骤,擦油,油镜观察,高倍镜观察,低倍镜观察,放玻片标本,调光,检查,用后放置,用前放置,,Company Logo,显微镜的操作步骤,一、取镜和安放,右手握住镜臂，左手托住镜座,把显微镜放在实验台距边缘合适位置,,Company Logo,二、对光,转动转换器，使低倍物镜对准通光孔（注意不要用手扳物镜！）,,Company Logo,把光圈对准通光孔，一只眼睛注视目镜，一只眼睛注视物镜与载玻片之间的距离，调整入射光的强度。,,Company Logo,三、观察,把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔,,Company Logo,转动粗准焦螺旋，顺时针旋转，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止 注意：此时眼睛一定要看着物镜！,,Company Logo,左眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗焦螺旋，使镜筒缓缓上长升直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰,,Company Logo,四、复原放回,1、观察完毕，先提升镜筒，再取下玻片标本（避免划伤镜头） 2、转动物镜转换器，将物镜调到最低放大倍数的状态 3、如操作过程中使用了油镜，要使用擦镜纸擦拭干净 4、使用结束后，先关闭电源，再拔掉插头，然后将其归位,,Company Logo,1、必须遵守操作规程，严格认真地按要求操 作。取送显微镜时，应右手握住镜臂， 左 手托住镜座，平拿平放。切勿用一只手斜 提，前后摆动，防止目镜滑出跌落。 2、保护好镜头，揩试目镜、物镜上的灰尘或 污物，必须使用专用的擦镜纸(油镜使用后， 一定将油镜头和标本擦干净)。切勿用手指、 手帕、纱布和普通纸擦。,使用注意事项,,Company Logo,3、物镜镜头的切换一定要使用转换器，以免 使镜头脱落和损坏。 4、转动粗、细准焦螺旋时，不要用力过猛， 以防止机件损伤，调节失灵。 5、镜检时，坐姿端正，一般用左