课件：金黄色葡萄球菌的检测方法的.ppt

金黄色葡萄球菌的检测方法金黄色葡萄球菌的检测方法 简介简介简介简介 一一一一 生物学特性生物学特性生物学特性生物学特性 （1 1）典型的金黄色葡萄球菌为）典型的金黄色葡萄球菌为）典型的金黄色葡萄球菌为）典型的金黄色葡萄球菌为球型球型球型球型 ，直径，直径，直径，直径 0.8m0.8m左右，显微镜下排列成葡萄串状。左右，显微镜下排列成葡萄串状。左右，显微镜下排列成葡萄串状。左右，显微镜下排列成葡萄串状。 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无 荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌 营养要求不高，在普通培养基上生长良好营养要求不高，在普通培养基上生长良好营养要求不高，在普通培养基上生长良好营养要求不高，在普通培养基上生长良好 ，需氧或兼性厌氧，最适生长温度，需氧或兼性厌氧，最适生长温度，需氧或兼性厌氧，最适生长温度，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37C37C， 最适生长最适生长最适生长最适生长 pH 7.4pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽。平板上菌落厚、有光泽。平板上菌落厚、有光泽。平板上菌落厚、有光泽 、圆形凸起，直径、圆形凸起，直径、圆形凸起，直径、圆形凸起，直径1-2mm1-2mm。 （2 2）血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球）血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球）血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球）血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球 菌有高度的耐盐性，可在菌有高度的耐盐性，可在菌有高度的耐盐性，可在菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl10-15%NaCl肉汤中生长。可肉汤中生长。可肉汤中生长。可肉汤中生长。可 分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲 基红反应阳性，基红反应阳性，基红反应阳性，基红反应阳性， VPVP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨反应弱阳性。许多菌株可分解精氨反应弱阳性。许多菌株可分解精氨反应弱阳性。许多菌株可分解精氨 酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄 球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但 对青霉素、红霉素等高度敏感。对青霉素、红霉素等高度敏感。对青霉素、红霉素等高度敏感。对青霉素、红霉素等高度敏感。 检测方法检测方法检测方法检测方法 1.1.纸片法纸片法纸片法纸片法 2.2.免疫学方法免疫学方法免疫学方法免疫学方法 3.3.分子生物学方法分子生物学方法分子生物学方法分子生物学方法 4.4.直接平板计数法直接平板计数法直接平板计数法直接平板计数法 一一一一. .纸片法纸片法纸片法纸片法 目前广泛应用的一种方法目前广泛应用的一种方法目前广泛应用的一种方法目前广泛应用的一种方法 用纸片、膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基用纸片、膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基用纸片、膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基用纸片、膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基 和显色物质附着在上面，通过观察微生物在测试片上和显色物质附着在上面，通过观察微生物在测试片上和显色物质附着在上面，通过观察微生物在测试片上和显色物质附着在上面，通过观察微生物在测试片上 面的生长、显色来测定食品中微生物。面的生长、显色来测定食品中微生物。面的生长、显色来测定食品中微生物。面的生长、显色来测定食品中微生物。 采用快速测试片检测具有显著的优点：采用快速测试片检测具有显著的优点：采用快速测试片检测具有显著的优点：采用快速测试片检测具有显著的优点：a.a.可测定少量检可测定少量检可测定少量检可测定少量检 品，不需要配制试剂，不需要大量的玻璃器皿，操作品，不需要配制试剂，不需要大量的玻璃器皿，操作品，不需要配制试剂，不需要大量的玻璃器皿，操作品，不需要配制试剂，不需要大量的玻璃器皿，操作 简便迅速简便迅速简便迅速简便迅速 b.b.易于消毒保存，便于运输携带方便，价格易于消毒保存，便于运输携带方便，价格易于消毒保存，便于运输携带方便，价格易于消毒保存，便于运输携带方便，价格 低廉；低廉；低廉；低廉； c.c.除纸片外无其他任何废液废物，大大减少了工除纸片外无其他任何废液废物，大大减少了工除纸片外无其他任何废液废物，大大减少了工除纸片外无其他任何废液废物，大大减少了工 作量；作量；作量；作量； d.d.可以在取样时同时接种，结果更能反映当时样可以在取样时同时接种，结果更能反映当时样可以在取样时同时接种，结果更能反映当时样可以在取样时同时接种，结果更能反映当时样 本中真实细菌数，防止延长接种时间时细菌繁殖造成本中真实细菌数，防止延长接种时间时细菌繁殖造成本中真实细菌数，防止延长接种时间时细菌繁殖造成本中真实细菌数，防止延长接种时间时细菌繁殖造成 的污染。的污染。的污染。的污染。 TitleTitle 技术优点：操作简单使用方便，避免了繁琐的操作。技术优点：操作简单使用方便，避免了繁琐的操作。技术优点：操作简单使用方便，避免了繁琐的操作。技术优点：操作简单使用方便，避免了繁琐的操作。 技术缺点：用时间比较长，无法准确定性及计数。技术缺点：用时间比较长，无法准确定性及计数。技术缺点：用时间比较长，无法准确定性及计数。技术缺点：用时间比较长，无法准确定性及计数。 此方法现在应用于快速检测领域，美国此方法现在应用于快速检测领域，美国此方法现在应用于快速检测领域，美国此方法现在应用于快速检测领域，美国3M3M公司公司公司公司 Petri filmPetri film 为载体的测试片应用最为广泛。但其也存在一些问题为载体的测试片应用最为广泛。但其也存在一些问题为载体的测试片应用最为广泛。但其也存在一些问题为载体的测试片应用最为广泛。但其也存在一些问题 ：Petri filmPetri film测试片上覆盖了一层薄膜，当样品粘液过多测试片上覆盖了一层薄膜，当样品粘液过多测试片上覆盖了一层薄膜，当样品粘液过多测试片上覆盖了一层薄膜，当样品粘液过多 时会出现菌落的扩散和融合，影响计数；时会出现菌落的扩散和融合，影响计数；时会出现菌落的扩散和融合，影响计数；时会出现菌落的扩散和融合，影响计数；Petri filmPetri film测试测试测试测试 片面积较小，当菌量大于片面积较小，当菌量大于片面积较小，当菌量大于片面积较小，当菌量大于250cfu250cfu时，准确计数较困难；时，准确计数较困难；时，准确计数较困难；时，准确计数较困难； 待测样品中含有的某些有机物可能使显色减缓。使目待测样品中含有的某些有机物可能使显色减缓。使目待测样品中含有的某些有机物可能使显色减缓。使目待测样品中含有的某些有机物可能使显色减缓。使目 视效果下降，导致计数偏低。视效果下降，导致计数偏低。视效果下降，导致计数偏低。视效果下降，导致计数偏低。 二二二二. .免疫学方法免疫学方法免疫学方法免疫学方法 免疫学方法的基本原理都是抗原抗免疫学方法的基本原理都是抗原抗免疫学方法的基本原理都是抗原抗免疫学方法的基本原理都是抗原抗 体反应。体反应。体反应。体反应。 抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异 性结合反应。性结合反应。性结合反应。性结合反应。 （1 1）抗原抗体技术）抗原抗体技术）抗原抗体技术）抗原抗体技术 （2 2）免疫学方法技术）免疫学方法技术）免疫学方法技术）免疫学方法技术 免疫学方法包括下面两个部分免疫学方法包括下面两个部分免疫学方法包括下面两个部分免疫学方法包括下面两个部分 （1 1）抗原抗体技术分析：）抗原抗体技术分析：）抗原抗体技术分析：）抗原抗体技术分析： 抗原抗体技术是免疫技术中的核心部抗原抗体技术是免疫技术中的核心部抗原抗体技术是免疫技术中的核心部抗原抗体技术是免疫技术中的核心部 分，对于金黄色葡萄球菌检测全菌免分，对于金黄色葡萄球菌检测全菌免分，对于金黄色葡萄球菌检测全菌免分，对于金黄色葡萄球菌检测全菌免 疫筛选抗体是很困难的事情，现在目疫筛选抗体是很困难的事情，现在目疫筛选抗体是很困难的事情，现在目疫筛选抗体是很困难的事情，现在目 前市场有的大多都是对金黄色葡萄球前市场有的大多都是对金黄色葡萄球前市场有的大多都是对金黄色葡萄球前市场有的大多都是对金黄色葡萄球 菌毒素类进行免疫得到的抗体菌毒素类进行免疫得到的抗体菌毒素类进行免疫得到的抗体菌毒素类进行免疫得到的抗体 （2 2）免疫学方法技术分析：）免疫学方法技术分析：）免疫学方法技术分析：）免疫学方法技术分析： 上述免疫学技术应用最多的是酶联免疫技术和胶体金侧上述免疫学技术应用最多的是酶联免疫技术和胶体金侧上述免疫学技术应用最多的是酶联免疫技术和胶体金侧上述免疫学技术应用最多的是酶联免疫技术和胶体金侧 向层析技术。向层析技术。向层析技术。向层析技术。 酶联免疫技术广泛应用于实验室检测，由于一次可以检酶联免疫技术广泛应用于实验室检测，由于一次可以检酶联免疫技术广泛应用于实验室检测，由于一次可以检酶联免疫技术广泛应用于实验室检测，由于一次可以检 测多个样本，此技术多用于体外诊断，目前也广泛用测多个样本，此技术多用于体外诊断，目前也广泛用测多个样本，此技术多用于体外诊断，目前也广泛用测多个样本，此技术多用于体外诊断，目前也广泛用 于食品安全。于食品安全。于食品安全。于食品安全。 （酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者（酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者（酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者（酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者ELISAELISA 法）法）法）法） 三三三三 分子生物学方法分子生物学方法分子生物学方法分子生物学方法 后面内容直接删除就行后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用 资料可以编辑