课件：抗核抗体谱检测及临床意义虞伟.pptxVIP

两,者,的,关,系,自身免疫,也就是产生自身抗体和,的现象。,正性应答、,样作用 而被清除。-“清道夫,缔合性（ ）特异性抑制作用,免疫网络，,自身免疫和自身免疫病,自身抗体在自身免疫病诊断中的 价值与临床意义 南京军区南京总医院 全军临床检验医学研究所 报告人：虞 伟 自身免疫病的分类 1. 器官特异性自身,自身免疫（autoimmunity）: 指机体免疫系统对自身抗 原产生免疫应答也就是产生自身抗体和/或自身致敏淋 巴细胞的现象。 自身免疫病（Autoimmunity Diseases）:指免疫系统对 宿主自身抗原发生正性应答、造成其组织或器官的病理性 损伤、影响其生理功能、并最终导致各种临床症状的状 态。 自身免疫引起疾病; 疾病引起自身免疫; 某些因素引起前两者; 自身免疫病相关学科,免疫病： 局限某特定器官, 器官特异性抗原引,临床特征 症状：发热、雷诺现,急诊,免疫学,肾内,起的免疫应答导致 自身免疫病。,象、晨僵等 体征：关节肿胀、皮,2.非器官特异性自 身免疫病,疹、肌无力等 辅助检查,皮肤,自身免疫病 （风湿病）,血液,病变见于多种器 官及结缔组织；又 称结缔组织病或胶,自身抗体(ANA, dsDNA, RF, AnuA) 、免疫球蛋白,骨科,呼吸,消化,原病。,补体,常规化验及影像学,检查等,大量误诊病例,自身免疫病的基本特征： 血液中测得高效价的自身抗体/致敏淋巴细胞。 自身抗体/致敏淋巴细胞作用于自身组织而引起损伤 或功能紊乱。 动物实验可复制出相似的病理模型。 确认自身免疫病的条件： 证实自身抗体或自身反应性T细胞的存在； 找到自身抗原； 用该自身抗原免疫动物能够诱发同样的自身免疫病； 通过被动转移实验证实抗体或者T细胞的致病能力。,关于自身抗体的作用 天然自身抗体 (natural autoantibody) 清道夫”样作用以可溶性CIC而被清除。 - 非特异性低亲和力Auto-Ab，可阻止自身抗 原与自身反应性细胞的作用 -缔合性（connectivity）特异性抑制作用：可 形成独特型(Id)-抗独特型抗独特型(A-Id)免疫网络，使自 身抗体不致过度产生，有利于维持机体内环境的 相对稳定。,1,破坏细胞。,沉积局部:,的理解已不再局限于核成分，,Sm抗体与 CCP抗体与,而非选干扰素；,抗体等。,常规检查对AID诊断、,分类：,抗体（,复合物）,抗体（,抗 和类风湿因子（ ）,等多种自身抗体的检测。,类风湿因子(RF),试验：,尚未在临床广泛推广，,金标准”,抗体、-抗核抗体,单特异性自身抗体确认),多肽抗体谱)、,病理性自身抗体 自身抗体引起的细胞破坏: 激活补体、调理吞噬、介导 ADCC破坏细胞。如自身免疫性溶血性贫血、药物过敏性血 细胞减少症。 抗受体抗体与受体结合：刺激或阻断细胞的功能。如 Graves 病、重症肌无力。 自身抗体与自身抗原形成ICIC沉积局部: 活化补体引起组 织、细胞损伤。如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎。 抗细胞外成分自身抗体与相应物质结合: 激活补体、调 理吞噬作用杀伤破坏自身细胞。如肺出血肾炎综合征。 抗核抗体（ANA） 传统定义：顾名思义是指抗细胞核抗原成分的自身抗体 的总称 （狭义定义）； 现代定义：指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的 总 称。对ANA的理解已不再局限于核成分，而是指抗核 酸 （nucleic acid）和核蛋白（nucleoprotein）抗体的总称 （广,病理性自身抗体的临床意义 疾病诊断与鉴别诊断： 如： 抗dsDNA、抗 抗体与SLE；抗 抗体与RA；AoAb与 POF、女性不育、流产者有关； 疾病分期： 如：EM-Ab 与EMT、女性不育有关；EM-Ab在EMT 期阳性率 依次为86%、60%、43%和14% ； 疾病监测、预后判定 如：抗dsDNA, ANA为SLE疾病活动标志 指导临床用药： 如：ANA、ASMA（+）与AIH-1 激素治疗,而非选干扰素； 与疾病的临床表现有关：抗CCP抗体等。 因此，自身抗体常规检查对AID诊断、治疗与病情监测至关重要! 抗核抗体谱（ANAs）分类 根据细胞内靶抗原分子理化特性和分布部位将ANAs分类： 抗DNA抗体（anti-dsDNA，anti-ssDNA ） 抗组蛋白抗体（histons: H1 , H2A , H2B , H3 , H4 , H2A-H2B复合物） 抗ENA抗体（抗体: Sm , nRNP , SSA/Ro , SSB/La, rRNP , Scl-70 , Jo-1 , PCNA , RA33 , Ku , RANA ,义定义）；,ANAs,抗非组蛋白抗体,Mi-1, Mi-2, PL-7, PL-12.）,靶抗原分布： 细胞核成分； 细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期 抗核抗体用于疾病诊断的临床应用指南,抗着丝点抗体（ anti-CENP -A , B , C ，D，F，G） 抗核仁抗体（抗体: RNA-polymerase-1 , PM-Scl/PM-1，Th/To, U3nRNP/Fibrillaria，4-6-S-RNA） 抗其他细胞成分抗体（高尔基体，中心体，纺锤体，线粒体，溶酶体， 肌动蛋白，Vimentin，细胞角蛋白，Lamin) 自身抗体免疫学测定方法,（%） 琼脂双向扩散或对流免疫电泳 -抗ds-DNA，抗Sm，抗U1RNP和类风湿因子（RF） 胶乳凝集试验:类风湿因子 Farr试验：抗ds-DNA抗体 放射免疫沉淀法： -尚未在临床广泛推广，但已有报道用于抗U1,U2,U3-RNP等多种自身抗体的检测。 间接免疫荧光技术：细胞内抗原自身抗体筛查的“金标准 抗核抗体(ANA)、抗ds-DNA抗体、抗平滑肌抗体(ASMA)、ANCA等 酶联免疫吸附试验(ELISA):单特异性自身抗体确认 免疫印迹免疫斑点技术(单特异性自身抗体确认 -ANA谱(含ENA多肽抗体谱 、AMA(M2/M4/M9)、抗LKM-1、抗LC-1、抗SLA/LP等 悬浮芯片/或液态芯片技术 微阵列免疫芯片技术 2,皮肤、 多脏器和/或 症状，,排除类似特定组织、,阳性等）-球蛋白 增高、,RibP蛋白,均质型),95,50,50,SLE。,60S,的标志抗体.,系统性自身免疫病相关自身抗体谱,临床症状与特征 有难以解释的皮肤、关节、血管及多脏器和 或多系统损害症状，后者可影响包括肝、 肾、肺、胸腺、胰腺、甲状腺、胃肠道及神经和血液系统等表现,核染色体染色质核小体DNA,染色体,染色质,疑似自身免疫病患者,注意排除类似特定组织、器官及肿瘤和感染性疾病，并与之鉴别,常规实验室（含临检、生化、免疫和病原体）检查，免疫功能异常者 （如血清 球蛋白、IgG增高、补体降低和CIC阳性等）,血清自身抗体指标测定,抗nRNP, 抗Sm,抗SS-A,抗SS-B,ASMA,抗LKM-1,抗,pANCA,cANCA,抗Scl-70,抗PM-Scl,抗Jo-1,抗PCNA 抗 蛋白,ANucA,抗dsDNA等 （+）,LC-1,抗SLA/LP, AMA: - M2/M4/M9,抗PR3,抗MPO （+）,核小体,ANA (IIF),抗dsDNA,抗心磷脂,抗CCP,AILD抗体谱,ANCA,抗GAb,ASCA,抗PCA,抗TG,抗GAD,抗2GPI,AKA,RF,抗PAb,抗IFAb,抗TPO,抗IA2,抗TSHR,抗IAA,组蛋白,DNA SLE、MCTD、SS、PSS、DM/PM、 APS、 RA、 AIH、PBC、PSC、 MPA、WG、CSS、UC、CD、萎缩性胃炎、恶性贫血、Graves 病、桥本氏甲状腺炎、型糖尿病 核小体:是染色体功能亚单位,为DNA与组蛋白的复合体,ANA(均质型),抗RNP/Sm抗体,系统性红斑狼疮相关自身抗体,抗 体 抗核抗体 (ANA) dsDNA抗体 抗Sm抗体 膜DNA抗体 核小体抗体 U1RNP抗体 SS-A 抗体 SS-B 抗体 抗心磷脂抗体 类风湿因子,敏感性 (%) 99 70 25 78 85 50 25-35 15 20-40 25,特异性 (%) 80 95 99 94 92 87-94 70 40 75 30,主要相关自身抗体: 抗ds-DNA, 核小体和组蛋白抗体等. 主要见于SLE。,抗原: 核糖体60S亚单位的3种蛋白： P0, P1, P2 (38, 19, 17 kDa)。在碳端的具有相同的 免疫反应表位。 疾病: SLE: 5% - 15%;,为SLE的标志抗体.,PCNA抗体 组蛋白抗体 核蛋白抗体,5 30-80 58,3,%RA*,%RA*,dsDNA、,蛋白的一个多肽序列（Sm复合抗原物中,可以达到70%，,(IBT)法,病情活动度及肾损害有关，,SLE继发肾病的敏感性和特异性分别为,0/50,3/50,0/50,和双链DNA自身抗体检测 其敏感性和特异性分别为91%,AnuA及抗dsDNA-NcX抗体在,特异性为91%SLE中的阳性率为,dsDNA抗体的产生具有相关性,N-甲基,研究证实,RA相关自身抗体,抗体：,口腔),大鼠),症状前）,抗体：,患者： 抗体阳性、 阳性）,抗体临床诊断价值小结:,(无症状正常人,患者),骨破坏时,三种不同方法抗dsDNA、ANcA检测结果及在,抗SmD1抗体 SLE诊断的新标记 靶抗原：为 复合抗原物中Dl蛋白的一个多肽序列（氨基酸80-l19）,SLE疾病诊断中的价值, SLE：阳性率可以达到 ，其他疾病中少见 原因：抗Sm自身抗体直接与一个隐蔽的多肽表位结合,研究组别及 考察指标,IIFT法 抗dsDNA,抗dsDNA,免疫印迹(IBT)法 AnuA 抗dsDNA/AnuA,抗dsDNA,ELISA法 抗dsDNA-NcX,抗C1q抗体,研究组别: 自身抗体阳性例数/样本检测例数(%), 与SLE病情活动度及肾损害有关，适于监测狼疮性肾炎的活动度 对 继发肾病的敏感性和特异性分别为86%和95%,系统性红斑狼疮 疾病对照组,38/87 5/98,38/80 7/98,42/80 5/98,48/80 9/98,50/87 5/42,56/87 3/42, 联合采用C1q和双链 自身抗体检测,其敏感性和特异性分别为 和90%,正常对照组 1/50 0/50 0/50 抗dsDNA, 及抗dsDNA 抗体在SLESLE疾病诊断中的价值,抗端粒抗体 在 中的阳性率为60%,特异性为 该抗体与抗 抗体的产生具有相关性,可能是一种新的高特异性 SLE相关抗体 抗 甲基-D-天冬氨酸受体抗体 研究证实，该抗体与狼疮患者精神症状的发生有关。,敏感性(%) 特异性(%) Youden指数 阳性似然比 阴性似然比 阳性预测值 阴性预测值,43.7 95.9 0.396 10.66 1.288 0.864 0.743,47.5 95.3 0.428 10.11 1.105 0.844 0.77,52.5 96.6 0.491 15.44 0.905 0.894 0.79,60.0 93.9 0.539 9.84 0.667 0.842 0.813,57.5 91.3 0.488 6.61 0.739 0.862 0.694,64.4 96.7 0.611 19.52 0.553 0.949 0.742,与各自的疾病对照组和正常对照组比, P0.01 - 临床检验杂志. 2009; 27(4):292-294,相关自身抗体:APFAFAAKA抗CCP抗体,抗CCP抗体：可出现于RA临床症状之前,抗CCP抗体阳性,抗核周因子 (APF; 1964),核心抗原多肽衍生物: 环瓜氨酸肽 抗CCP抗体,抗角蛋白抗体 (AKA; 1979),70%,RA患者 80%,靶抗原: 纯化的丝聚蛋白 AFA,ELISA方法 测定,50%,60% 40%,上皮细胞 (口腔 靶抗原: 前丝聚蛋白去磷酸化产物,抗丝聚蛋白自身抗体 (APF AFA AKA ) 敏感度: 35-80%,食管 (大鼠 靶抗原:食道上皮前丝 聚蛋白及其酸性异构体,10%,20% 0%,特异性: 70-99%,10,8,6,4,2,什么是丝聚蛋白的抗原位点?,年（开始出现RA症状前） Rantapa-Dahlqvist et al., Arthritis Rheum, 2003,开始出现症状,抗CCP抗体：发展到RA的标志 从普通的关节炎（UA）发展到RA (318名UA患者：22%抗CCP抗体阳性、22% IgM-RF阳性）,抗CCP抗体临床诊断价值小结,100 75,抗CCP抗体 抗CCP抗体阳性 抗CCP抗体阴性,93%,100 75,IgM-RF IgM-RF阳性 IgM-RF阴性,75%,对RA患者具有良好的敏感度和特异性 与类风湿因子平行检测可提高RA患者血清学的诊出率 可检测RA临床症状出现前的人群 无症状正常人、未明,50,50,确的关节炎患者以及早期的RA患者,25,25%,25,31%,对于关节侵蚀损伤具有较高的阳性预测值,0,0,1,2,3,0,0,1,2,3,已经列入2009年ACR/EULAR RA分类标准和评分系统,（随访）年,随访（年）,PPV 93%, NPV 75% *根据ACR标准诊断,PPV 75%, NPV 69% Van Gaalen et al., Arthritis Rheum, 2004,无影像学典型RARA骨破坏时,依据评分表评分6分确诊为RA,4,年分类标准（,3个关节炎 ），持续,肿胀），持续至少6周,阳性。,4条阳性即可诊断,8%,注,1,2,3,4,高度特异)、,肾微粒体抗体（ 诊断与鉴别诊断、,-与疾病活动性相关,型抗体（ *-与疾病活动性相关,抗体）,抗体）,AMA）： 强烈提示为PBC*-高滴度,抗体）,为何 RA 的诊断标准（ACR）不停地发生变化？,类风湿关节炎相关自身抗体,1987年分类标准（RA）,名 称,敏感性(%),特异性(%),1958年标准,1、晨僵1h，持续至少6周； 2、 个关节炎（肿胀），持续 至少6周；,类风湿因子 RA33/36抗体,50-70 25-45,86 93.6,1963年标准 1987年标准 2009年标准,均不能满足RA 早期诊治要求 抗CCP抗体增列 其中,3、手关节（腕、掌、指关节） 炎（ ），持续至少 周； 4、对称性关节炎（肿胀）； 5、类风湿皮下结节； 6、影像学检查可见关节骨质破 坏（侵蚀性）； 7、RF阳性。,Sa抗体 抗角蛋白抗体 抗核周因子 抗CCP抗体 抗CB10抗体 抗BiP抗体,37 33 38-62 60-70 72 70,78-97 87-92 70-90 96 70-88 92, 条阳性即可诊断RA。,自身免疫性肝病 Autoimmune liver diseases （AILD） 主要包括三种与自身免疫密切相关的，以肝、胆损伤为主的疾病,PBC AMA ANA SMA,特殊类型的肝病，其诊断和治疗完全不同于一般慢性病毒性肝炎 自身免疫性肝炎（ AIH ） -Autoimmune hepatitis,HCV LKM ANA,10%,Autoimmun-,10%,AIC AMA neg. PBC, 原发性胆汁性肝硬化（ PBC） -Primary biliary cirrhosis,Hepatitis, 原发性硬化性胆管炎（PSC） -Primary sclerosing cholangitis 自身免疫性胆管炎（AIC） -Autoimmune cholangitis(AMA-negative PBC) 重叠综合征（Overlap Syndrome）,13% Andere(?),6%,PSC ANA,ANCA,指标/特性,自身免疫性肝炎积分系统 (1999) 分值 注 指标/特性 分值,AILD相关自身抗体谱,女性 ALP/AST (或 ALT) 比值 3.0 血清球蛋白或IgG 2.0 1.5-2-0 1.0-1.5 1:80 1:80 1:40 60 g/day,+2 +2 0 -2 +3 +2 +1 0 +3 +2 +1 0 -4 -3 +3 -4 +1 +2 -2,肝组织学 界面性肝炎 淋巴细胞浸润为主 肝细胞玫瑰花 无以上情况 胆道改变 其他改变 其他自身免疫性疾病 其他重要指标 其他特异性AutoAb HLA DR3 or DR4 对治疗的反应 完全 复发 累计分的提示 治疗前 明确的AIH 可能的AIH 治疗后 明确的AIH 可能的AIH,+3 +1 +1 -5 -3 -3 +2 +2 +1 +2 +3 15 10-15 17 12-17,5 6 7 8 9 10 11 12, 抗核抗体(ANA)：多核点型抗体(高度特异 、抗组蛋白抗体、抗DNA抗体 抗核膜抗体 - 核复合体210kDa糖蛋白抗体 - 核心蛋白p62抗体 - 核纤层蛋白B受体抗体 抗平滑肌抗体（ASMA） *- ANA/SMA 同时出现,1型AIH诊断与鉴别诊断 抗肝-肾微粒体抗体（抗LKM-1） *- 2型AIH诊断与鉴别诊断、判断预后 抗去唾液酸受体抗体（抗ASGPR） * 与疾病活动性相关(各型AIH) 抗可溶性肝抗原抗体（抗SLA /LP ） *- 诊断与鉴别诊断(3型AIH) 抗肝细胞溶质抗原I型抗体（抗LC-1） 与疾病活动性相关(2型AIH) 抗肝细胞膜抗原抗体（抗LMA抗体） 抗肝特异性蛋白抗体（抗LSP抗体） 抗胆管、胆小管抗体 *- PSC诊断与鉴别诊断 抗胃壁细胞抗体（PCA） 抗线粒体抗体（ ）：M2/M4/M8/M9 高滴度AMA-M2,强烈提示为 抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA） *- PSC诊断与鉴别诊断 抗甲状腺抗体（抗TG、抗TPO抗体） 抗板层素抗体（A/C） *- PBC诊断与鉴别诊断 类风湿因子（RF）,5,核点型（,好发于青年人。,是一组以血管,纤维素样坏死，,的一种全身性疾病。,患者并发溃疡性结肠炎。,相关。,抗体。,(ERCP)等技术,免疫沉积；,Type I-AIH ANA and ASMA,Type -AIH: LKM-1 and LC-1 Detection: IIFT,ANA (HEp-2 cells),ASMA (rat stomach),ASMA:,LKM (rat kidney),LC-1 (liver rat),ELISA, Immunoblot A-LKM-1,Detection: IIFT Prevalence: 40 - 90%, Prevalence: 2 - 4% (more common in childhood AIH) Target antigen:,Actin (HEp-2 cells) ANA: Detection: IIFT Actin (primate liver) Prevalence: 5 - 70% Target antigens: various, e.g. dsDNA (20%) High titers and ASMA suggest AIH,Target antigens: various, mostly F-actin High titers anti-F- actin and ANA suggest AIH (ANA seen in 70- 80% of the patients but not specific for AIH),LKM (rat liver),Cytochrome p450 2D6 Occurs also in Hepatitis C More severe disease? LC-1 Prevalence: 1 - 2% Target antigen: FTCD (formiminotransferase cyclodeaminase),PBC:AMA,ANA-nuclear dot,nuclear membrane,PBC: Diagnosis abnormal liver function tests,AMA(95%) Sens:90-95% Spec:96%,抗核点抗体 (30%) 抗核膜抗体 (2%), alkaline phosphatase usually 3-4 times elevated normal or minimally elevated transaminases (3x) elevated serum cholesterol and IgM often seen jaundice, hypoalbuminemia, and coagulopathy seen in later stages of the disease serologic testing AMA present in 90-95% (the best have sens=98%, spec=96%) RF found in 70% ASMA in 66% anti-thyroid in 40% ANA in 35% ANA:核点型（anti-sp100） in 30% ANA:核膜型 in 2% 1）Cholesterol：胆固醇 2）jaundice, hypoalbuminemia, and coagulopathy：黄疸，低蛋白血症，消耗性凝血病,原发性硬化性胆管炎(PSC) 以肝内外胆管炎症、纤维化为特征的慢性疾病。 PSC好发于青年人。 主要症状有疲劳、骚痒、色素沉积、黄斑瘤和黄疸。,系统性血管炎（SV） 基本概念：基于血管壁的炎症（动脉受累为主），），是一组以血管 壁炎症（炎性细胞浸润）和血管壁纤维素样坏死，并导致多系统 损害的一种全身性疾病。,近70%患者并发溃疡性结肠炎。 与HLA-B8、-DR3、-DRW52相关。 60-70%有pANCA，10有LSP和ASGPR抗体。 胆胰造影(ERCP)等技术，提高该病的诊断率。 主要免疫病理改变： 单核粒细胞浸润；可见有IgG/IgM 或IgA免疫沉积； 过敏反应类型：可见、 和 型； 每种疾病各有其模式（Disease pattern),normal liver,“onion skin fibrosis” in PSC,6,方法：,靶抗原进行确认，,捕获法的应用提高了检测敏感度;,MPA的敏感度分别为,系统性血管炎发病机制,ANCA-vasculitis,细菌、立克次体 螺旋体、病毒 直接损伤,乙肝病毒 A b+A g (CIC ) 激活补体 中性粒细胞,抗内皮细胞抗体 抗基底膜抗体,单核细胞 ANCA J. CHARLESJENNETTE, AND RONALD J. FALK, The New England Journal of Medicine 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）,ANCA = Anti-Neutrophil Cytoplasm Autoantibodies cANCA(靶抗原,间接免疫荧光法：4种核型 1、cANCA：靶抗原为PR3; 2、pANCA：靶抗原为MPO（甲醛抗性）; 3、非MPO-pANCA：不提示血管炎，而提示炎症性肠病或其它自身免 疫性疾病; （甲醛敏感）,中性粒细胞,为弱阳离子或 中性蛋白,如 PR3等) pANCA(靶抗原 为强阳离子蛋 白,如MPO, CG,4、非典型cANCA：靶抗原为BPI，常提示慢性感染。 ELISA方法： 可对PR3和MPO靶抗原进行确认，但不同试剂盒的反应性不同影响检 测敏感度,捕获法的应用提高了检测敏感度 两种方法共同检测： 对血管炎的特异性为99%，对WG和 的敏感度分别为73%和67%,LF等) ANCA与血管炎及相关疾病,ANCA 型 胞浆内抗原 c-ANCA 蛋白酶 3 （丝氨酸蛋白酶） 髓过氧化酶（+） p-ANCA 髓过氧化酶（） CG、LF、BPI、 unknown,疾病（敏感性） Wegener 肉芽肿 （30%90%） 特发性新月体肾炎 Churg-Strauss 综合征 显微镜下多动脉炎 Crohns 病（75%） 溃疡性结肠炎（20%） 慢性活动性肝炎（75%） 原发性硬化性胆管炎（70%） 原发性胆汁性肝硬化（30%） 正常对照（5%）,C.G. Dileep Sharma* and A.R. Pradeep*, J Periodontol August 2006 7,为主的IC沉积,+），,诊断考虑+），,检查等。,），进一步导致,SLE中有较高检出率），但,抗体却为阴性；,-胞衬蛋白 的一个高灵敏度及特异性标记物,早期发现, 的鉴别诊断，,抗体检测到；,诊断具有较高的特异性。,细胞浆不发荧光.,抗体(70kd),13,2,7,ANCA 检测: 推荐方案 ANCA检测和报告的国际共识 (Savige, van der Woude, Wiik et al., 1999),系统性血管炎诊断思路举例： 表现为可触性紫癜、腹痛、关节炎、血尿、蛋白尿,IIFT,肾穿显示IgA为主的 沉积，诊断考虑 肾穿显示血管内皮IgM（+）IgG（ ），有 循环冷球蛋白（ ），诊断考虑,过敏性紫癜 冷球蛋白血症性血 管炎,阴性,阳性,当免疫荧光无免疫复合物沉积，而ANCA,显微镜下多血管炎,（+），则诊断考虑,5%患者血清 仅在ELISA中 表现为阳性,最优检测,单特异性 ELISA检测,当有肉芽肿性炎症，而无哮喘，则诊断 倾向 当有肉芽肿性炎症，有哮喘史及嗜酸性粒,Wegener肉芽肿 Churg-Strauss 综合征,细胞增多，诊断,最低检测,结果,诊断依据：临床特点+病理改变+相关检查；想到本病：临床上有难以解释的系统性表现或 / 和多脏器缺血症状； 认识本病：熟悉分类标准，根据标准推断；诊断本病：尽量争取组织或血管活检、血管造影和MRIMRI检查等。,干燥综合征: 抗SS-A、抗SS-B抗体 一种原因不明的自身免疫疾病，淋巴细胞浸腺体（主要影响 泪腺和唾液腺），进一步导致干燥性结角膜炎和口干燥症 ； 自身抗体：抗SS-A、抗SS-B（在 中有较高检出率），但 在青少年型SS患者中抗患者中抗SS-A和抗和抗SS-B抗体却为阴性； 抗 胞衬蛋白：检测SS的一个高灵敏度及特异性标记物 有 助有SS早期发现 及与青少年SLE、RA的鉴别诊断，可先于 抗SS-A、SS-B抗体检测到； 抗腮腺抗体: 对SS诊断具有较高的特异性。,抗SS-A、,抗SS-B抗体 抗腮腺抗体,荧光模式: Hep-2细胞细胞:间期 细胞核呈现细颗粒 型荧光,核仁有部分 不发荧光。分裂期 细胞在染色体以外 显示颗粒荧光,而染 色体本身则不发荧 光. 灵长类肝组织切 片: 肝细胞核及部分 核仁可见细颗粒荧 光,细胞浆不发荧光 在某些细胞（如 淋巴细胞、巨噬细 胞）中的荧光反应 较强,干燥综合征相关自身抗体,其他自身免疫病相关自身抗体,自身抗体 ANA 抗SSA抗体 抗SSB抗体 抗a-胞衬蛋白抗体 抗M3受体抗体 类风湿因子 ANCA 抗M2抗体 ACA 抗RNP抗体,阳性率(%) 60-80 50-70 30-60 65-87 92 60-80 10-25,硬皮病(PSS) 皮肌炎/多肌炎 (DM/PM) 抗磷脂抗体综合征 混合性结缔组织病 (MCTD),Scl-70抗体 抗着丝点抗体(ACA) 抗核抗体(ANA) PM-1抗体 Jo-1抗体 抗核抗体(ANA) 抗磷脂抗体(ACL) 狼疮抗凝物质 U1RNP抗体 抗核抗体(ANA),8,蛋白复合物自身抗体家族，,与抗内因子(IF),抗体(抗2-糖蛋白,习惯性流产,血小板减少症,心肌坏死等），以及多种神经症状；,80%- (50%-,PCA抗体的靶抗原为H+/,抗磷脂抗体综合症（APS） 抗磷脂或磷脂-蛋白复合物自身抗体家族，靶抗原高度异质 性，其自身抗体成员包括： - 狼疮抗凝因子,抗胃壁细胞(PCA)(PCA)与抗内因子(IF)抗体,- 抗心磷脂抗体 - 抗磷脂酰丝氨酸抗体 - 抗 糖蛋白1抗体 抗2GPI) - 抗Annexin抗体 - 抗凝血酶原抗体 检测方法：ELISA法,直接抑制凝血反应, 导致凝 血因子依赖性凝血时间延长 APS相关的临床症候群,相关临床症状： 血小板减少症,复发性动静脉血 栓形成（肺栓塞,心肌坏死等），以及多种神经症状；,慢怪萎缩性胃炎: 胃壁细胞抗体(阳性率100%); 内因子抗体(少见); 恶性贫血: 胃壁细胞抗体(阳性率80%-90%); 内因子抗体(50%-70%); 抗 抗体的靶抗原为H+/+ATP酶,Fast and economic: -IgG(1:10) exocrine pancreas(PAb) goblet cells(GAb),慢性炎症性肠疾病（UC CD）诊断,pANCA -IgG(1:1000) S.cerevisiae(ASCA) PAb,GAb,pANCA ASCA Optimal: -IgG and IgA(all antigens) -1:10,1:100,1:1000 猴胰腺组织 猴小肠组织 人中性粒细胞 酿酒酵母细胞 抗胰岛细胞与抗胰岛素抗体 Autoantibodies against pancreas islet cells（ICA）- Target antigens: (1) Glutamate decarboxylase(GAD): Stiff-Man syndrome, type I Diabetes mellitus, 60-85% (2) Tyrosine phosphatase(lA2): Stiff-Man syndrome, type I Diabetes mellitus, 48-80% Autoantibodies against insulin (lAA) Type I Diabetes mellitus under 5 years of age the prevalence amounts to over 90%, while by the 12th year it decreases to 40%. Glutamate decarboxylase 谷氨酸脱羧酶; Tyrosine phosphatase 酪氨酸磷酸(酯)酶 9,受体( ):阳性率 ；（2 阳性率超过70%；（3 20%-,：（1 100%（,是风湿性疾病。,才能作出风湿性疾病的最终,检测与临床表现结合起来，,我们鉴别这些数量众多的风湿性疾病，,活动度进行,ANA（）,ANA（）结果的出现率取决于以下因素：,滴度结果不能直接进行比较。,（）与 选定的滴度值，,的呈阳性ANA反应,独立的诊断条件之一。,不相关，,ANA（）（）可出现在多种情况下,IIF法测定,阳性检出结果因病而异；,治疗。AID经皮质激素或免疫抑制剂,肾病。,而从肾脏丢失。,自身免疫性甲状腺疾病 Graevs 病：（1）抗TSH受体(TRAb):阳性率90%90%；（2）抗TP0:阳性率超过70%；（3）抗TG: 阳性率20%-50%.,桥本氏甲状腺炎：（1）抗TP0，阳性率100%（高滴度）, （2）抗TG：阳性率9%. 多分泌腺疾病: （1）抗甲状旁腺抗体 风湿病学中的自身抗体小结 单单出现自身抗体并不一定不一定是风湿性疾病。 试验结果（）（）常常并不能除外某种风湿性 疾病。 必须要根据临床临床才能作出风湿性疾病的最终 诊断。 将抗体检测与临床表现结合起来，能够帮助 我们鉴别这些数量众多的风湿性疾病，同时 抗体的检测也有助于对疾病的活动度进行监 测。 （）的原因,Hyperthyroidism 甲亢； Hypothyroidism 甲减； hashimotos tyroiditis 甲状腺炎 对ANA阳性结果的解释 （）结果的出现率取决于以下因素： 分析系统：由于不同厂家ANA检测系统的起始稀释度和稀 释因子不同，因而其ANA滴度结果不能直接进行比较。 区分血清（）与（）选定的滴度值，未加稀释的正常 人血清可有1/3的呈阳性 反应。 是SLE独立的诊断条件之一。 筛查风湿病，敏感性高，尤其是高滴度ANA。 滴度本身与疾病活动度并不相关，没有评价预后的 意义。 （）可出现在多种情况下，特异性差。 法测定ANA阴性的一些解释,风湿性疾病 SLE 多发性肌炎 干燥综合征 硬皮病 血管炎 RA 正常的健康人 女性男性，出现率 随年龄而增加 风湿性疾病患者亲属 ？孕妇,药物诱导 慢性肝脏疾病 慢性肺部疾病 慢性感染 血液系统异常 恶性肿瘤,技术方面：试剂来源、方法差