《药理学实验指导》doc版.doc

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前言药理学既是理论科学，又是实践科学。药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。它的目的一方面是验证理论，巩固并加强对理论知识的理解；另一方面是学习和掌握药效学与药代动力学实验的基本操作方法和技能，培养学生对科学工作严肃的态度，严密的方法、严格的要求及科学的思维方式，学习实验设计及实验数据统计处理的有关知识，初步具备客观地对药理学实验现象进行观察、比较分析、综合和解决实际问题的能力。从而更深入、准确地理解和掌握药理学基本知识，指导临床合理用药；并为研究开发新药、发现药物新用途，为其他生命科学的研究探索奠定初步基础。一、药理实验注意事项实验前 仔细阅读实验指导，了解实验的目的、要求、方法和操作步骤，领会其设计原理；结合实验内容，复习有关药理学和生理学、生化学等方面的理论知识，达到充分理解；估计实验中可能出现的情况和发生的问题。实验时 严格按照实验指导上的步骤进行操作，准确计算给药量，防止出现差错造成实验失败；认真、细致地观察实验过程中出现的现象，随时记录药物反应的出现时间、表现以及最后结果，联系理论内容进行思考；实验过程中要注意节约药品及实验材料，避免造成浪费。实验后 认真整理实验结果，经过分析思考，写出报告，按时交给指导教师；整理实验器材，洗净擦干，妥为安放。将实验后的动物按要求放到指定地点，课后认真做好实验室的清洁卫生工作。二、实验报告的书写：每次实验后应写好实验报告，交给实验教师批阅。实验报告要求结构完整、条理分明、文字简练、书写工整，措辞应注意科学性和逻辑性。实验报告一搬包括下列几项内容：实验题目与日期实验目的 实验的意义所在，要做什么，用什么方法，达到什么目的实验材料 包括动物、实验药品、主要使用仪器、也包括手术器材、玻璃器材等的数量，及实验条件。实验方法 步骤要清晰、使别人能看懂、能重复。如果实验方法临时有变更，或者由于操作技术方面的原因影响观察结果时，应做简要说明。实验结果 可用文字，也可表格或图示多种方法表示，是实验报告中重要的部分，需保证其绝对的真实性。应随时将实验中观察到的现象在记录本上记录，实验告一段落后立即进行整理。不可单凭记忆或将原始记录搁置很久之后再做整理，这样易致实验结果遗漏或错误。实验报告上一般只列经过归纳、整理的结果。但原始记录应保存备查。分析讨论 应针对实验中所观察到的现象与结果，联系课堂讲授的理论知识，进行分析和讨论。要根据实验内容详细讨论实验结果说明了什么，是否达到实验目的要求和观察到设计的现象；各项指标说明了哪些问题；实验成功或失败的原因，应吸取的经验教训。讨论不可脱离实验结果空谈理论，讨论中要判断实验中出现的是否为与理论相一致的预期结果，如果属于非预期结果，则应该分析其产生的可能原因。结论 应是简短的一两句话，实验是否达到预期的目的，实验观察药物作用的结果有无预期的药理作用。实验结论是从实验结果归纳而得的概括性判断，也就是对本实验所能说明问题、验证的概念或理论的简要总结。实验一 药理实验基本知识与技术1实验动物的选择 首先应根据实验目的选择动物，其次要考虑动物的来源、饲养及价格等方面条件。选择实验动物的原则应选择对被试药物或被研究物质最敏感的动物作为实验对象，实验动物选择不当，则可导致实验得出不正确的甚至相反的结论。（1）小白鼠（小鼠） 医学实验中应用最广泛的动物。特别适用于需要大量动物的药物筛选、半数致死量测定、药效评价等实验研究。因其繁殖能力强，妊娠期仅为21天，因而也常用于避孕药的研究。由于其器官易发实质性损害，常用于致畸、致癌药及抗癌药的研究。(2) 大白鼠（大鼠） 大鼠也是较常用的实验动物，常用作亚急性和慢性毒性实验。大鼠的血压反应比家兔好，常用来直接描记血压，进行降压药的研究。它的垂体肾上腺系统功能发达，可作为应激反应和肾上腺、垂体及卵巢等内分泌实验。大鼠无胆囊，因此用其做胆管插管收集胆汁，进行消化药的研究。大鼠的踝关节对炎症反应敏感，也用于治疗关节炎的药物研究。(3) 青蛙和蟾蜍 青蛙和蟾蜍为冷血动物又经济易得，其离体心脏对维持其正常功能的环境条件要求低，在人工营养液、室温及pH渗透压接近于它的血液等简单条件下，蛙心即能节律性搏动很久，因此常用于强心药物的实验；其腓肠肌和坐骨神经可用来观察药物对周围神经、横纹肌或神经肌肉接头的作用；其腹直肌还可用于检测胆碱能神经系统药物的作用。(4) 豚鼠 豚鼠对组织胺等收缩支气管物质很敏感，常用于平喘药及抗组织胺药的研究，以及进行过敏反应及免疫方面的实验。又因豚鼠对结核分支杆菌较敏感，也用于抗结核药物的实验研究。(5) 家兔 家兔驯服、易得，且便于静脉注射和灌胃给药，因而广泛用于科研教学中。常用于直接描记呼吸、血压的药效学实验及进行卵巢、胰岛等内分泌实验。家兔心脏在离体情况下可搏动很久，是观察药物对哺乳动物心脏直接作用较合适的模型。家兔体温变化敏感，常用于体温实验及热源检查。(6) 猫 猫有较发达的神经系统和循环系统，常用于如去大脑僵直，姿势反射实验；观察刺激交感神经、瞬膜及虹膜的反应实验，阿托品解除毛果芸香碱作用等实验。猫血压比较稳定，观察血压反应时猫优于兔，因此猫也用于心血管及镇咳药物实验。(7) 狗 狗具有发达的血液循环和神经系统,以及基本与人相似的消化过程，因此是药理学研究中常用的动物之一。如药物对心血管作用的实验，由于动物较大，可用于同时记录多项指标，如血压、心电、心音、呼吸及血流量等的实验。也可用于条件反射、高血压等慢性实验,手术造胃瘘、肠瘘以观察药物对胃肠蠕动、分泌及消化过程的影响等实验。不同种类动物对药物的反应是有差异的，不同药效反应在一定程度上可阐明药物作用机制。因此，对一些药理作用尚不清楚的药物进行研究时，最好选用几种不同动物进行实验。宜从小动物开始，然后在如狗等大动物身上进行反复验证。2实验设计原则（1）随机原则：按照机遇均等的原则进行分组。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少，而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。（2）对照原则：空白对照（指在不加任何处理的条件下进行观察对照）；阴性对照也称假处理对照（给予生理盐水或不含药物的溶媒）；阳性对照也称标准对照（指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照）。（3）重复原则：能在类似的条件下，把实验结果重复出来，才能算是可靠的实验，重复实验除增加可靠性外，也可以了解实验变异情况。3实验动物的编号图1-1 编号标记图 根据动物的种类、数量和观察时间长短等因素来选择适当的标记方法。实验用动物小鼠，一般用量大，每笼共养个体数多，外表无显著特征可供区别，故需采用特殊的标记方法加以区别。良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便和实用的要求。常用的方法有染色法、耳缘剪孔法、烙印法和号牌法，前者最常用。常的化学染色剂有：3%5%的苦味酸溶液（黄色）；2%的硝酸银溶液（咖啡色）；0.5%的中性红溶液（红色）。实验中应用最普遍的是苦味酸染色剂。标记方法见（图1-1）和表（1-）所示。此方法可标出1999个编号，充分满足药理学教学与科研的需求。表1-1 编号标记图示表编号12345678913 26105947标记100100200300图1-2 小鼠的抓取与固定4实验动物的抓取与固定 在进行动物实验时，首先要限制动物的活动，使其保持安静状态，以便操作和准确记录动物的反应情况，同时还要防止被动物咬伤，并保证动物不受伤害，这就需要掌握合理抓取、固定实验动物的方法。（1）小鼠 小鼠性情比较温顺，但抓取时动作也要轻缓。通常是用右手抓住小鼠尾部，将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前爬行时，迅速用左手拇指和食指抓住其双耳及颈后部皮肤，将小鼠置于左手掌心中，再用无名指和小指将小鼠尾压在手掌上，即可将小鼠完全固定。可进行腹腔注射、采腹腔液、测肛温、作阴道涂片等操作。如（图1-2）所示。（2）大鼠 大鼠的牙齿尖锐，在惊恐或激怒时易将操作者手指咬伤，故在抓取时要小心。抓鼠时右手轻轻抓住大鼠尾巴向后拉，左手抓紧大鼠头、颈部皮肤，并将鼠固定在左手中，此时即可进行腹腔注射、灌胃等操作。如要做尾静脉取血、注射等操作，可将鼠置于使用台上，用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内，露出尾部，其他较精细的操作应在乙醚麻醉下进行。（3）豚鼠 豚鼠胆小易惊，抓取时必须稳、准、迅速，先用手掌迅速扣住豚鼠背部，抓住豚鼠肩胛上方，以拇指和食指扣住颈部，其余手指握持躯干，即可轻轻提起、固定。对于体重大的豚鼠，要用另一只手托住臂部。（4）家兔 家兔比较驯服，但前爪较尖，应避免抓伤。家兔的抓取方法一般是用一只手抓住兔的颈部将兔提起，然后用另一只手托其臀部。不能采取单手抓提家兔双耳、腰部或四肢的方法，以免造成双耳、颈椎或双肾的损伤。 图1-3兔的台式固定法家兔固定方法可根据实验需要而定。如作兔耳静脉取血、注射或观察兔耳血管变化，可采用盒式固定方法。如要作测量血压、呼吸等实验或手术时，需将兔固定在手术固定台上，并将兔置于仰卧位（图1-3），其头部要固定。5实验动物的给药途径和方法 实验动物的给药途径和方法有很多种，可根据实验目的、动物种类和药物剂型、剂量确定。（1）皮下注射法 皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起动物皮肤，右手持注射器将针头斜刺入皮下，刺穿皮肤后，平行再进入针头的2/3，若见针头能在皮下摆动则证明针头已到达给药位置，可推注药液。皮下注射进针的部位，一般在小鼠腹部两侧，大鼠为背部或下腹部两侧，豚鼠在后大腿内侧或下腹部，家兔为背部或耳根部，狗、猫则常选用大腿外侧。（2）肌肉注射法 肌肉注射一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位。注射时要将针头垂直快速刺入肌肉，回抽针芯，如无回血即可注射。家兔、狗、猫等大动物多在臂部注射，每只每次射量不超过2ml；大鼠和小鼠因体型小，肌肉少，很少使用肌肉注射，如必须肌注常在股部注射。（3）腹腔注射法 大、小鼠的腹腔注射方法为：用左手固定动物，右手持注射器，在下腹部左侧或右侧沿小鼠纵轴与横轴成45角刺入皮下，沿皮下向心方向推进，同时保持针头与腹平面和垂直面亦呈45角穿过腹肌刺入腹腔，约刺入针头的2/3深度，此时有落空感，回抽无肠液、尿液或血液后，缓缓推入药液（图1-4）。家兔、狗、猫等动物进行腹腔注射时应先行固定。一般小鼠每只每次注射量不超过0.5cm，大鼠不超过2ml。图1-4 小鼠的腹腔注射法（4）静脉注射法 大鼠和小鼠的静脉注射常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有3根，左右两侧和背部正中各1根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采用。先将鼠装入固定器内，露出尾巴，用4550温水浸泡或用75%酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软化。握住鼠尾两则，使静脉充盈，注射器针头尽量与鼠尾角度平行，以利于进针。先缓缓推入少许药液，如针头已进入静脉推药时感觉无阻力；如阻力较大，并出现白色皮丘，则表示未刺入血管，应换部位重新注射。如需反复注射，应尽量从鼠尾的末端开始，如（图1-5）所示。图1-6 小鼠灌胃法图1-5 小鼠尾静脉注射法（5）经口给药法口服法 将药物放入饲料或溶于饮水中让动物自动摄取的给药法。此法简单方便，但是剂量不易掌握。灌胃法 灌胃器由注射器和特殊的灌胃针头构成。小鼠的灌胃针头长约45cm，直径约1mm，灌胃针头的尖端焊有一中空小圆金属球。此金属球的作用是防止针头刺伤气管或损伤消化道。金属球端针管可弯成向内20左右的角度，以适应大鼠或小鼠口腔和食道的生理弯曲如（图1-6）所示。灌胃时用左手固定动物，使其腹部朝内，头部向上并稍倾斜。右手持灌胃器，将灌胃针头弯曲向内，从一侧口角插入口腔，轻压鼠的头部向后倾斜，使口腔与食道成一直线，然后可将药液注入。家兔灌胃法 ：家兔液体药物灌胃法是将兔的躯体夹于两腿之间，左手紧握双耳，固实其头部，右手抓住前肢。另一人将兔用开口器插入兔口中，将舌头压在开口器下面，把开口器固定。将合适的胃管（可用10号导尿管代替），经开口器中央小孔慢慢沿上颚壁插入食道约810cm。为避免误入气管，可将胃管的外口端放入清水杯中，若有气泡从中逸出，则证明在气管内，应拔出重新插入，若无气泡则用注射器将药液灌入，然后再注入少量清水，将胃管内药液冲入胃内。灌胃完毕后，拔出导尿管，之后拿出开口器。咽淋巴囊内给药：蛙及蟾蜍常通过各淋巴囊途径给药如（图1-7）。图17 蛙及蟾蜍的皮下淋巴囊注：本堂课实验内容亦可观察实验录相动物的捉拿与给药方法。 实验二 药物剂量对药物作用的影响【 实验目标】 观察不同剂量的药物对药物作用的影响，巩固小白鼠捉持法和腹腔注射法。【实验用品】1.器材：普通天平一台，1ml注射器3支、钟罩3个。2.药品：2%水合氯醛溶液、染料3.动物：小白鼠【实验方法】 取小白鼠3只，称其体重并作好标记，观察其正常活动后，分别腹腔注射2%水合氯醛0.05ml/10g；0.15ml/10g；0.5ml/10g；给药后分别放入钟罩，观察比较小白鼠活动情况，记录作用发生的时间和症状，并比较三鼠有何不同。【实验结果】鼠号体重（g）药物及用量用药后反应情况甲乙丙【注意事项】 本实验也可用0.2%苯甲酸钠咖啡因溶液0.2ml/10g；0.5%溶液0.2ml/10g；2%溶液0.2ml/10g分别腹腔注射后，观察其活动变化。【讨论】1. 三鼠的反应有何不同？为什么？2. 药物的治疗量、极量、安全范围有何意义？ 实验三 给药途径对药物作用的影响【实验目的】观察不同给药途径对药物作用的影响；掌握家兔捉持法、肌内注射和耳静脉注射法。【实验用品】1. 器材：磅秤1台、5ml注射器1支。2. 药品：5%异戊巴比妥钠溶液、染料、酒精棉球。3. 动物：家兔【实验方法】 取家兔2只，称其体重后，染色编号，观察其正常活动、翻正反射和呼吸情况。以5%异戊巴比妥钠溶液1ml/kg的剂量，分别由甲兔肌注和乙兔耳静脉注射后，观察两兔翻正反射消失时间和对呼吸抑制的程度有无不同。【实验结果】兔号体重（kg）药物和用量给药途径翻正反射消失时间呼吸抑制程度甲肌注乙静注【 讨论 】两兔出现作用时间不同的原因是什么？临床用药时，同一药物在不同的给药途径时，为什么应用的剂量也不同？ 实验四肝功能损伤对药物作用的影响【实验目标】观察肝功能损伤对药物作用的影响。【实验器材】1药品：10四氯化碳(CCl4)油溶液，0.4硫喷妥钠溶液，苦味酸溶液。2器材：天平、1ml注射器、鼠笼、组织剪。 3动物：小白鼠4只，体重18-22g，雌雄各半。 【实验方法】在实验前24h先取小鼠2只，10四氯化碳油溶液0.1ml/10g皮下注射,造成肝损伤。实验时取给予四氯化碳的小鼠和正常小鼠各2只，称体重，以苦味酸溶液作好标记。并试其翻正反射是否存在。(将小白鼠仰卧试验台上，若能恢复正常体位，为翻正反射存在，否则为翻正反射消失)。接着均腹腔注射0.4硫喷妥钠0.2ml/10g，观察动物反应。记录各鼠翻正发射消失时间和恢复时间。然后将小白鼠处死(用颈椎脱臼法)，剖视肝脏观察形态改变，并注意肝脏形态改变与麻醉作用维持时间的关系。【实验结果】组 别动物编号0.4硫喷妥钠（0.2ml/10g）给药时间翻正反射消失时间翻正反射恢复时间麻醉维持时间（min）解剖动物 肝脏改变 正常组12肝损害组12【注意事项】肝脏是药物代谢的主要器官，肝功能不全时以肝代谢为主的药物易发生蓄积中毒。四氯化碳是一种对肝细胞有严重毒性作用的化学物质，中毒动物常被作为中毒性肝炎的动物模型。 本实验采用四氯化碳皮下注射，剂量要准确，量少达不到破坏肝脏的目的，量大易造成动物死亡。 四氯化碳造成小鼠肝损伤模型，肉眼可见肝脏充血肿大，出现灰黄色点片状坏死。注意与正常小鼠对比。3如果已下课，小白鼠仍未从麻醉状态转为清醒，其麻醉作用维持时间则记作大于多少分钟。【讨论】 该实验说明肝功能损害与药物作用有何关系？ 肝功能受损的病人临床上用药护理应注意什么问题？实验五肾功能损害对药物作用的影响【实验目标】观察肾功能损害对药物作用的影响。【实验材料】1药品：2.5链霉素溶液，0.1氯化高汞溶液。2器材：天平、1ml注射器、鼠笼或小白鼠观察盒。 3动物：小白鼠4只，体重18-22g，雌雄各半。 【实验方法】取正常小白鼠和肾功能已被破坏的小白鼠（实验前24h腹腔注射0.1氯化高汞0.1ml/10g,）各只，称体重，分别由腹腔注射2.5链霉素溶液0.15ml/10g（375mgkg），观察小白鼠的活动情况（肌张力、活动情况、呼吸）。比较两组小白鼠的变化有何差别。【实验结果】组 别动物编号2.5链霉素溶液0.15ml/10g给药后反应 正常组12肾损害组12【注意事项】 本实验幼龄动物实验效果较好。 氯化高汞肾毒性大，汞与含巯基的酶结合破坏肾脏，导致肾功能障碍，使链霉素排泄减慢而引起中毒，出现肌松弛、肌麻痹、甚至呼吸抑制而死亡，实验时亦可能正常小白鼠也出现链霉素中毒，注意两组小鼠中毒程度的区别。【讨论】a) 注射链霉素后两组小白鼠的反应为什么不同？b) 肾功能损害的病人临床上用药护理应注意什么问题？实验六 传出神经药对瞳孔的影响【实验目标】1观察毛果芸香碱、阿托品、毒扁豆碱、新福林对瞳孔的影响，分析其作用机制，并联系临床应用。2学会家兔滴眼及量瞳的操作方法。【实验器材】 药品1%硝酸毛果芸香碱、1%硫酸阿托品、0.5%水杨酸毒扁豆碱、1%新福林。 器材学生尺、手电动物家兔2只。【实验方法】取家兔2只，标记后分别放入固定器内，剪去眼睫毛，在自然光下测量瞳孔大小并记录。然后按下列顺序给药，每只眼滴3滴。兔号 左眼 右眼甲 1%硫酸阿托品 1%硝酸毛果芸香碱乙 0.5%水杨酸毒扁豆碱 1%新福林 滴眼时将下眼睑拉成杯状，并用手指按住鼻泪管，使其在眼睑中保留分钟。5分钟后，在同样光线下，再分别测量瞳孔大小。【实验结果】兔号眼睛药物瞳孔大小（）给药前给药后甲左阿托品右毛果芸香碱乙左毒扁豆碱右新福林【注意事项】测量瞳孔时不要刺激角膜，测量前后光线要一致以免影响瞳孔大小。实验动物应为一周内没有用过眼药者。滴眼时必须压住鼻泪管，以防药液吸收。【讨论】根据实验结果分析阿托品、毛果芸香碱、毒扁豆碱、新福林对瞳孔的作用，并分析起作用机制。通过本实验说明这类药物的临床意义以及在应用时应注意什麽。 实验七 传出神经药对血压的影响【实验目标】1观察传出神经系统药物对动物血压的影响，分析其作用机制，并按联系临床应用。 2学会动物血压急性实验的操作方法。【实验器材】药品3%戊巴比妥钠、3.8%枸橼酸钠、1%肝素、生理盐水、0.01%盐酸肾上腺素、0.01%重酒石酸去甲肾上腺素、0.01%盐酸异肾上腺素、1%甲磺酸酚妥拉明、1%盐酸普萘洛尔、1%硝酸毛果芸香碱、1%硫酸阿托品。器材 动物手术台、台式平衡记录仪、压力换能器、手术器械一套、动脉插管、动脉夹、气管插管、输液器、针头、丝线、纱布。BL-420生物机能实验系统动物 狗、猫或兔。【实验方法】1麻醉：取狗（或猫或兔）1只，称重，以3%戊巴比妥钠1ml/kg（30mg/kg）麻醉后将狗（或猫）仰位固定于手术台上。2手术：（1）气管插管：剪去颈部的毛，在颈部正中切开长约10cm的皮肤，分离出气管。在气管上作一“T”形切口，插入气管套管，结扎固定。气管插管一端与呼吸换能器相连，记录呼吸情况。（2）动脉插管：于气管旁分离出颈总动脉，在其下穿2根线，一线结扎动脉远心端，另一线备以结扎动脉插管。以动脉夹在结扎线近心侧夹住动脉血管，在动脉夹与结扎线之间将动脉剪一小口，向心方向插入与压力换能器连接好并已充满7%枸椽酸钠的动脉插管，结扎固定，记录血压变化情况（压力换能器应置和心脏同一水平位固定）。（3）静脉插管：任取一侧腹股沟部位，用手触得股动脉搏动处，剪去毛，沿血管走行方向切开长约4cm的皮肤，分离出股静脉。在其下穿2根线，一线结扎静脉远心端，另一线备以结扎静脉插管。在结扎线近心侧将静脉剪一小口，向心方向插入与输液装置相连的静脉插管，结扎固定（开通输液管调节伐，输入生理盐水约3ml，以检查静脉插管是否畅通，有无漏液），以备给药和输液之用。3压力换能器连接于BL-420生物机能实验系统，调节好各项参数，描记正常血压曲线。4给药：给药时，用注射器抽取适量药液，从连接输液管与输液针头的三通中注药。每次给药后立即由输液管注入生理盐水2ml，将药物冲入静脉，观察所引起的血压变化。待血压恢复原水平或平稳以后，再给下一药物。第一组：观察拟肾上腺素药对血压的作用。（1）0.01%盐酸肾上腺素 0. 1ml/kg（2）0.01%重酒石酸去甲肾上腺素 0. 1ml/kg（3）0.01%盐酸异肾上腺素 0.1ml/kg第二组：观察拟胆碱药和M受体阻断药对血压的作用。（1）1%硝酸毛果芸香碱 0.1ml/kg （2）1%硫酸阿托品 0.1ml/kg （3）1%硝酸毛果芸香碱 0.1ml/kg第三组：观察受体阻断药对拟肾上腺素药的作用。 （1）1%甲磺酸酚妥拉明 1ml/kg（2）0.01盐酸肾上腺素 0. 1ml/kg（3）0.01重酒石酸去甲肾上腺素 0. 1ml/kg第四组：观察受体阻断药对拟肾上腺素药的作用 （1）1%盐酸普萘洛尔 1ml/kg（2）0.01%盐酸肾上腺素 0. 1ml/kg（3）0.01%重酒石酸去甲肾上腺素 0. 1ml/kg（4）0.01%盐酸异肾上腺素 0.1ml/kg【实验结果】 记录血压变化，并复制血压曲线。【注意事项】1麻醉不要过量，试验过程中注意动物的呼吸等抑制状态。2本试验用猫耐受性最好，兔耐受行性差，反映不典型。 3注意试验中的给药顺序，给要速度要慢。且药物应临用前配制。【讨论】1根据实验结果分析肾上腺素、去甲肾上腺素、异肾上腺素对血压作用的特点，并分析其作用机制。2解释毛果芸香碱和阿托品对血压的作用机制。 通过本实验能否说明肾上腺素同时作用于、受体。 实验八普鲁卡因与丁卡因表面麻醉作用的比较【实验目标】观察局麻药表面麻醉作用的强度。【实验用品】1药品：1丁卡因溶液、1%普鲁卡因溶液。2器材：角膜刺激器、滴管2支、兔笼、组织剪。 3动物：家兔1只，体重1-2kg。 【实验方法】取无眼疾家兔1只，由助手固定，剪去动物的双眼睫毛；用角膜刺激器或兔须轻触角膜之上、中、下、左、右5点，观察并记录正常眨眼反射；然后用拇指和食指将左侧下眼睑拉成环状，滴入1%丁卡因溶液3滴，使其存留1min,然后任其流溢；另于右眼内滴入1%普鲁卡因溶液3滴；观察不同时间的眨眼反射情况【实验结果】动物眼药物给药前眨眼反射给药后眨眼反射（min）51015202530家兔左侧丁卡因右侧普鲁卡因【注意事项】 本实验记录方法为：测试次数为分母，眨眼次数为分子，若测试5次，若有二次眨眼，记录为2/5。 滴药时用中指压住鼻泪管，以防药液流入鼻泪管被吸收而发生中毒。 刺激角膜的兔须前后应用同一根，刺激强度应尽量一致。 刺激角膜时不可触及眼睑，以免影响实验效果。【讨论】联系实验结果，比较普鲁卡因和丁卡因的局部麻醉作用特点及临床用途。实验九地西泮的抗惊厥作用【实验目标】观察局麻药吸收中毒反应和地西泮的抗惊厥作用。【实验用品】1药品：5盐酸普鲁卡因溶液，0.5地西泮溶液。2器材：兔固定箱、台式磅秤、5ml注射器、针头6号。 3动物：家兔1只，体重2kg3kg。 【实验方法】取家兔1只，称重，拔去耳缘静脉注射部位被毛，剪去一侧臀部被毛，观察正常活动情况。然后在臀部肌注5盐酸普鲁卡因溶液（2ml/ kg），观察动物的活动、姿势、肌张力及呼吸等变化。当家兔出现典型的局麻药中毒惊厥后，由耳缘静脉缓慢推注0.5地西泮溶液（0.51ml/ kg）直到肌肉松弛为止。【实验结果】 普鲁卡因注射地西泮后给药前 给药后家兔反应【注意事项】局部麻醉药过量可吸收入血，进入中枢后使边缘系统兴奋灶扩散，以至出现兴奋、抽搐和惊厥。地西泮作用于边缘系统，加强了GABA能神经元的抑制作用，可有效对抗局麻药中毒性惊厥。1本实验采用普鲁卡因静脉注射，剂量要准确，量少达不到引起动物惊厥的目的，量大易动物呼吸抑制而导致死亡。2普鲁卡因过量中毒表现为强直性惊厥，此时应立即静脉注射地西泮。3静脉注射地西泮时应缓慢推注，并且要密切观察动物的呼吸情况。【讨论】1.地西泮的作用特点、作用机制和用途有哪些？2.地西泮静脉推注过快为何会引起呼吸抑制？实验十 镇痛药的镇痛作用【实验目标】 观察镇痛药哌替啶、罗通定的镇痛作用。【实验用品】 1.药品：0.2%盐酸哌替啶溶液、0.2%罗通定溶液、生理盐水、0.6% 醋酸溶液。 2.器材 ：天平1台、1ml注射器2支、针头若干、大烧杯3个、秒表1块。3.动物：小白鼠6只。【实验方法】 取小白鼠6只，分为3组，每组2只，标记，称重，放入大烧杯中，观察其正常活动情况。1组腹腔注射0.2%盐酸哌替啶溶液0.1ml/10g，2组腹腔注射0.2%罗通定溶液0.1ml/10g作为实验组，3组腹腔注射生理盐水0.1ml/10g作为对照组，并用秒表记时。30分钟后，3组每只小鼠均腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml/10g，并观察其活动情况。记录给药后15分钟内小鼠出现扭体反应的动物数。把记录结果填入下表，并计算各药的镇痛百分率。【实验结果】 药 物 扭体反应 组别 鼠数 镇痛百分率（%） 镇痛药物 致痛药物 有反应鼠数 无反应鼠数 1组 2 哌替啶 醋酸2组 2 罗通定 醋酸 3组 2 生理盐水【注意事项】 1. 小白鼠扭体反应的表现为伸展后肢、腹部收缩内凹、躯体扭曲、臀部抬高及蠕行等，出现任何一项均为阳性。2. 0.6% 醋酸溶液宜临时配制，否则效果不佳。3. 无0.6% 醋酸溶液时，也可用0.05%酒石酸锑钾溶液代替，但应新鲜配制。4. 当实验组比对照组扭体反应发生率减少50%以上时，才能认为有镇痛作用。5. 实验结束后，以班为单位，综合实验结果，计算各药的镇痛百分率。 实验组无扭体反应动物数 对照组无扭体反应动物数药物镇痛百分率= 100% 对照组扭体反应动物数【讨论】根据实验结果讨论哌替啶和罗通定的镇痛强度及临床应用。实验十一 尼可刹米对呼吸抑制的解救【实验目标】 观察中枢兴奋药对中枢抑制药所致呼吸抑制的解救，并联系其临床应用。【实验用品】1 药品：1盐酸吗啡溶液、5尼可刹米溶液、液体石蜡、1丁卡因溶液。2 器材：磅秤1台、兔固定器1个、记纹鼓1台、铁支架1台、玛利氏气鼓1个、双凹夹1个、导尿管1根、橡皮管1根、胶布、注射器(Stol、10mi)各1支、针头(5#)2个、酒精棉球，3 动物：家兔1只。【实验方法】1取家兔1只，称重，放入固定器内。2用1丁卡因涂擦鼻粘膜，510分钟后将涂有液体石蜡的导尿管轻轻插入家兔一侧鼻孔内，待玛利气鼓上的描笔明显摆动时，用胶布固定导尿管。3打开记纹鼓记录一段正常呼吸曲线。4由耳静脉较快地注入1盐酸吗啡溶液12mlkg，观察并记录呼吸频率及幅度的变化。5待呼吸频率明显减慢，幅度显著降低时，立即由耳静脉缓慢注射5尼可刹米12m1，观察并记录呼吸有何变化。6待呼吸抑制缓解后，快速耳静脉注射尼可刹米0.5ml左右，观察惊厥是否出现。【实验结果】动 物体重（kg）记录情况正常状态给吗啡后给尼克刹米后家兔呼吸曲线呼吸频率 （次/分）【注意事项】1尼可刹米应事先准备好，如果呼吸过度抑制，解救不及时易致动物死亡。注射尼克刹米速度不宜过快，否则容易引起惊厥2家兔应固定好，以免挣扎影响呼吸曲线描记。【讨论】1叙述中枢兴奋药共同作用特点？2试述中枢兴奋药的临床应用和用药护理？3吗啡中毒的主要症状有哪些？如何诊治？ 实验一十二 普萘洛尔抗氯化钡诱发心律失常的实验【实验目标】 学习用氯化钡诱发大鼠心律失常法筛选抗心律失常药的方法，观察普萘洛尔的抗心律失常作用。【实验材料】1 药品：0.4%氯化钡，0.025%普萘洛尔，10%水合氯醛，生理盐水。2器材：大鼠手术台，手术剪，手术镊，眼科剪，眼科镊，注射器（1ml、2ml），头皮静脉注射针头，台式磅秤，棉球，秒表，纱带，心电针式电极，BL-420生物机能实验系统。3 动物：大鼠1只【实验方法】 1实验动物麻醉：取大鼠1只，称重，腹腔注射10%水合氯醛0.3ml/100g麻醉，仰卧固定在大白鼠板上。2股静脉给药准备：于大鼠一侧大腿内侧股动脉搏动处剪开皮肤约2cm，暴露股静脉，插入与注射器相连的头皮静脉注射针头，以备给药。3观察、描记正常心电图：将心电针形电极按要求插入四肢皮下（红色电极右前肢、黄色电极左前肢，绿色电极左后肢，黑色电极右后肢），心电引导电极输入端插头与BL-420系统前面板ECG全导联心电接口连接好。调整有关实验参数，观察、描记大鼠正常心电图。4氯化钡诱发心律失常：描记一段正常心电图后，股静脉缓慢注射0.4%氯化钡溶液0.1ml/100g（4mg/kg），立即描记心电图20s，以后每隔1min再描记心电图一小段，并通过显示屏对心电图连续观察、监视，直至恢复窦性节律（约20min）。记录心律失常的持续时间。5 心律失常恢复正常后，再过10min由股静脉注射0.025%普萘洛尔0.1ml/100g（0.25mg/Kg），5min后再注射同前剂量的氯化钡，并用同样方法记录心电图及心律失常的持续时间。6 统计全班结果，比较前后两次氯化钡引起心律失常的持续时间并作“t”检验。【实验结果】心律失常持续时间（min）1组2组3组4组平均第一次氯化钡第二次氯化钡【注意事项】1本实验中的麻醉药水合氯醛不能以戊巴比妥钠等替代，否则不易引起较恒定的心律失常。2本实验中大白鼠静脉给药也可通过其舌下静脉注射。3本实验也可以在家兔身上进行，给药剂量分别为：20%乌拉坦溶液3ml/kg麻醉，0.4%氯化钡溶液1ml/kg，0.025%普萘洛尔1ml/kg，均从耳缘静脉注射。4比较大白鼠前后所用药物，出现的心电图变化以及心律失常的持续时间。剪贴或复制有代表性的心电图段落。初步评价普萘洛尔对氯化钡诱发心律失常的拮抗作用。【讨论】1 氯化钡引起心律失常的原因是什么？2 普萘洛尔抗心律失常的机制是什么？临床上主要用于何种心律失常？ 实验一十三 利尿药对家兔的利尿作用【实验目标】 观察呋塞米的利尿作用并联系其临床应用。【实验材料】1药品：0.9%NaCl，1%呋塞米，20%氨基甲酸乙酯。2器材：兔手术台，手术器械一套，肠钳一把，覃形膀胱导管一根，烧杯，头皮静脉针及静脉输注装置，纱布，丝线，棉绳若干。3动物：家兔1只。【实验方法】 取家兔1只，称重，20%氨基甲酸乙酯5ml/kg耳静脉麻醉。仰位将兔固定于手术台上，耳静脉恒速（20-30滴/分）输注生理盐水。下腹部剪毛，在耻骨联合上缘切开皮肤约4-5 cm，沿腹白线剪开腹壁及腹膜，暴露膀胱，在膀胱腹侧面，避开血管作1厘米长切口，插入覃形膀胱导管（在插管前该导管要充满液体，再以肠钳夹住末端橡皮管），然后结扎固定。再轻轻将膀胱连同膀胱导管回纳腹腔，并用盐水布复盖切口，松开肠钳，尿液经橡皮管滴出，用量筒或量杯收集尿液。 记录正常每分钟尿液的滴数及半小时尿量，然后耳缘静脉注射1% 呋塞米0.5 ml/kg，记录每分钟尿液的滴数（给药后每5分钟记一次）及半小时尿量，与给药前进行比较。【实验结果】动物体重（Kg）药物与剂量给药前给药后每分钟滴数及半小时尿量每分钟滴数及半小时尿量【注意事项】1静脉恒速输液是为了维持家免足够的尿量，本实验亦可给家免灌胃生理盐水40 ml/kg代替输液，但要避免灌至气管。2覃形膀胱导管要对准两输尿管出口，结扎要牢固，以免膀胱尿液漏出。3若尿液从尿道口排出，宜夹住尿道口，以免影响实验结果。【讨论】1常用利尿药有几类，解释作用部位和作用机制？2 呋塞米有何临床用途？ 实验一十四 枸橼酸钠的抗凝血作用【实验目标】观察枸橼酸钠的抗凝血作用。【实验器材】 1.药品 3枸橼酸钠、生理盐水。 2.器材 秒表、兔固定箱、试管、注射器。 3.动物 家兔1只。【实验方法】 1.取试管2支，一只加3.8枸橼酸钠溶液0.5ml，另一只加等量的生理盐水作为对照。2.从家兔耳缘静脉抽取血液，分别给两只试管各加12ml，充分振摇，启动秒表，记录时间，以后每隔30s倾斜试管一次，观察两试管的血液凝固情况。3. 观察指标 血液是否流动，有无血块。【实验结果】 将实验结果记录于表171表171 枸橼酸钠的抗凝血作用实验记录试管编号药物及剂量血液数量血药凝固时间12【注意事项】 12只试管的管径大小应相同，清洁干燥。 2.家兔耳缘静脉取血动作要快，以免血液在注射器内凝固。【讨论】 枸橼酸钠的抗凝血机制是怎么？ 实验一十五 硫酸镁急性中毒及钙剂的解救作用【实验目的】 观察硫酸镁急性中毒时的表现及钙盐的解救效应，并理解其临床意义。 【实验器材】1 药品：10%硫酸镁溶液、5%氯化钙溶液。2 器材：磅称1台、5ml及10ml注射器各1支（附小儿头皮针）、干棉球、酒精棉球。3 动物：家兔1只。【实验方法】 取家兔1只，称重，观察正常活动及肌张力情况后，由兔耳静脉缓慢注射10%硫酸镁溶液2ml/kg，注意观察家兔的表现，当家兔行动困难，低头卧倒时，立即由耳静脉注射5%氯化钙溶液48ml，直至四肢立起为止。 【实验结果】动物 体重（kg） 用药前用硫酸镁后用氯化钙后活动 肌张力活动 肌张力活动 肌张力家兔【注意事项】注意静脉推注钙剂一定要慢，否则回引起心脏停博。（抢救后可能再次出现麻痹，应再次给予钙盐）。 【讨论】 1. 硫酸镁中毒为什麽要用钙剂来解救？2. 钙剂能够解除硫酸镁的那些中毒症状？实验一十六 糖皮质激素对毛细血管通透性的影响【实验目的】 观察糖皮质激素对血管的作用，并联系作用机制掌握临床应用。【实验器材】 1药品：0.5%氢化可的松溶液、0.1%磷酸组织胺溶液、1%盐酸苯海拉明溶液、1%伊文蓝液、生理盐水。2器材：磅秤1台、 粗剪刀1把、直尺1把、1ml、5ml、10ml注射器各1把、6号针头3个、棉球少许、染色瓶1个。3动物：家兔3只。【实验方法】取家兔3只，称重标记，将兔背部做皮丘处的毛剪净（约1010）分别给甲、乙、丙兔腹腔注射生理盐水1ml/，0.5%氢化可的松溶液1ml/及1%盐酸苯海拉明溶液1ml/。半小时后，给兔耳静脉注射1%伊文蓝液1ml/，同时给各兔背部皮内注射0.1%磷酸组织胺溶液0.1ml形成小丘。每兔做2个小丘，间隔5，3060分钟后， 用直尺