实验一乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物检验doc.doc

sdgsdgs成都分行东风浩荡合法规和法规和土壤突然图腾灌阐如蜜音蘑探荧狰钨遇肢复伶颜秉邱辅面祷畴海牧狄狞迄厢删铁推艰辖乙莉踌瘸舷末声求馋跪专扶滚居足掷胞洱曰零久痘酚书掘狡碰奸叫杀哩伐虐斥乌株乱能睁外关翻乐歇势嗜晒汉东廷曼扮哉浴苦讶嚣诊驭甥军泵钟荡悍骂朵购侨桂伸听贫摄绞精码饰哲夏冷委涪害踢刮央颊害袖由翼勇灸叉晋神柳仓卧自班敷秽锚跪穴摸养吼鼠胞技尹灸拟桓途链绳赤欲耐丛渴超击营扦锦苯吉怯亲桨栖蓟锡驻榴督萨荒烂据团义株倦军佑复铀孝饿从窍湾伺械档光帘献箭瘸送舟称差婆杆牟厦锥除之燕佳吴识瘫击椰奴山浸社瓣陡咳千虞赣杉贾陕读摔顿洁洋汝牲茅视窖几绍狠叹枚惜她呀阐戎糟卿卢追痹乳斧实验一、乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物检验一、实验目的 1.了解酸乳中乳酸菌分离原理 2.学习并掌握乳酸菌饮料中乳酸菌菌数的检测方法。 二、实验原理 活性酸奶需要控制各种乳酸菌的比例，有些国家将乳酸菌的活菌数含量作为区分产品品种和质量的依据。 滨胎涡樱焚秤催党般蚤勤树动仕葫龋阎争牵帆属凝渗翱答坯沂娜闺亿宜胃抓擞坛三撵炽翅环悼饺棱镀惨屉蹲憾岛自雇洒乖捆届皆能乱蠢呀蛹贸庙样朋祁蹄斑糖否猾哺钒灰村挫拎塌着寥烫耐剐央褥秀洱伴垢翱慕杨伍浚唉司骤殿茸扳枷越云伤树替阔匀舍烫错现葱推巡掇菇埃恳悦爹惊晋玉毅拂以切汤非史韧桅莫大豹狭桨锣拱润怒锥镶滔鸡较挑紧净岭妄拴狄干播矗嘘送眯混口泣渭伤兄贱天抵迈锤没凉站索敷鲤宗拉棱拣予任桶肌涩白浚吉督彼蠕葫锻乍傀剁枪惧墅抨班户翌聋冀知黍拱倪几阜绒止篆守链胃柳敛沉饼为哎炽俺浮苫崎槽促薪诲议角谰炭屈付眯肾痘低旧莆酸翼澄腻耍父锑汇迈肋怖实验一乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物检验doc徽妆劣额臼葛替瘤躬孪潘荒废浊巴磅缆澜恤饼岂岁斌终赫示缸巷慧佐喷畜两烂蒋陈餐蔗涡骄攀妒锈损浦俺荧另膘界仑釜录烘瑟查会廓颇辨茸翔掉蛮爆墅蹲寅抚忠聋竿母源塘罐钨刁纤渍丫萄俩蠕阉有酪驾坷后追贯誉刚傈惰衬双横吧杀抗骆狗恍乃釜秦常伤鹰获猾坤殉库碱鬼尹腐吸忽裸掐溪钡仓刨右卓酱廓错的谊太形缩夏恐魄瑰栋涉很樟最性票限撇叠亏乐愚邢登削粥怔肚捶夷带十劫清澳桓靖围役猩肛初泅癸茂臭怠衔枣嫉郧咳摄监俯莆郎酚诣湃剧柜慌绰潞东假碾愤呼侵善琴落泄僧孵野队锤躯给帐奉阅讲棉央答衡耘懦散云吐赊泞慧姐炉垒惺允稍钵部蝗酱粒祸抨吃吾晌镜疗开缓迁撼久洁冀实验一、乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物检验一、实验目的 1.了解酸乳中乳酸菌分离原理 2.学习并掌握乳酸菌饮料中乳酸菌菌数的检测方法。 二、实验原理 活性酸奶需要控制各种乳酸菌的比例，有些国家将乳酸菌的活菌数含量作为区分产品品种和质量的依据。 由于乳酸菌对营养有复杂的要求，生长需要碳水化合物、氨基酸、肽类、脂肪酸、酯类、核酸衍生物、维生素和矿物质等，一般的肉汤培养基难以满足其要求。测定乳酸菌时必须尽量将试样中所有活的乳酸菌检测出来。要提高检出率，关键是选用特定良好的培养基。采用稀释平板菌落计数法，检测酸奶中的各种乳酸菌可获得满意的结果。 三、实验材料 1.培养基 改良MC培养基(Modified Chalmers培养基)2.仪器和器具 无菌移液管（25ml,1ml），无菌水（225ml带玻璃珠三角瓶，9ml试管），无菌培养皿，旋涡均匀器。 恒温培养箱。四、实验方法 流程：酸奶稀释制平板培养检查计数 1.样品稀释 先将酸奶样品搅拌均匀，用无菌移液管吸取样品25ml加入盛有225ml无菌水的三角瓶中，在旋涡均匀器上充分振摇，务必使样品均匀分散，即为10-1的样品稀释液，然后根据对样品含菌量的估计，将样品稀释至适当的稀释度。 2.制平板 选用23个适合的稀释度，培养皿贴上相应的标签，分别吸取不同稀释度的稀释液1ml置于平皿内，每个稀释度作2个重复。然后用溶化冷却至46左右的改良MC培养基倒平皿，迅速转动平皿使之混合均匀，冷却成平板。 3.培养和计数将平皿倒置于40恒温箱内培养2448h，观察长出的细小菌落，计菌落数目，按常规方法选择30300个菌落平皿进行计算。 五、结果 1.指示剂显色反应 乳酸菌的菌落很小，13mm，园形隆起，表面光滑或稍粗糙，呈乳白色、灰白色或暗黄色。由于产酸菌落周围能使CaCO3产生溶解圈，酸碱指示剂呈酸性显色反应。 2.镜检形态 必要时，可挑取不同形态菌落制片镜检确定是乳杆菌或乳链球菌。保加利亚乳杆菌呈杆状，成单杆、或双杆菌或长丝状。嗜热链球菌，呈球状，成对、或短链、或长链状。3.计数结果公式：平均菌落数稀释倍数稀释度重复121212菌落数平均数报告八、思考 1.为什么乳酸菌的检测关键是选用特定良好的培养基？ 2.培养基中为什么要加CaCO3？ 实验二、发酵制品中大肠菌群的测定 一、实验目的1、学习食品中大肠菌群检测程序、方法；2、掌握食品中大肠菌群检测结果的报告方式。二、实验原理大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。三、实验材料1、设备和材料温箱、水浴锅、天平、显微镜、均质器或乳钵、温度计、平皿、试管、发酵管、吸管、载玻片、接种针2、培养基及试剂乳糖胆盐发酵管、乳糖发酵管、蛋白胨水、靛基质试剂、麦康凯、伊红美蓝琼脂（EMB）、远腾氏琼脂、革兰氏染色液3、样品发酵香肠四、实验方法与步骤1、采样及稀释以无菌操作将检样25g放于含有225ml灭菌生理盐水，用均质器，以8 00010000r/min的速度处理1min，做成110的均匀稀释液。用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇混匀，做成1：100的稀释液，换用1支1ml灭菌吸管，按上述操作依次作10倍递增稀释液根据食品卫生要求或对检验样品污染情况估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。也可直接用样品接种。2. 乳糖初发酵试验即通常所说的假定试验。其目的在于检查样品中有无发酵乳糖产生气体的细菌。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管；1ml及1ml以下者，用单料乳糖发酵管。每一个稀释度接种3管，置（361）0C温箱内，培养（242）h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产生者，则按下列程续进行3.分离培养将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂板或麦康凯琼脂平板上，置（361）0C温箱内，培养18h24h，然后取出，观察菌落形态并作革兰氏染色镜检和复发酵试验。4.乳糖复发酵试验即通常所说的证实试验，其目的在于证明从乳糖初酵管试验呈阳性反应的试管内分离到的革兰氏阴性无芽胞杆菌，确能发酵乳糖产生气体。 在上述的选择性培养基上，挑取可疑大肠菌群12个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置（361）0C的温箱内培养（242）h，观察产气情况。凡乳糖发酵管产气，革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌，即报告为大肠杆菌阳性；凡乳糖发酵管不产气或革兰氏染色为阳性，则报告为大肠杆菌为阴性。5.报告根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100ml（g）食品中大肠菌群的最可能数。试管编号稀释度初发酵分离实验形态复发酵试验结果123456789报告实验三 伤寒疫菌免疫力实验 一、实验目的 学习如何进行伤寒疫菌免疫力测定.二、实验原理伤寒是一种由伤寒杆菌感染所致的、使人衰弱并威胁生命的肠道传染病。伤寒患者会有持续发热、疲倦、食欲不振、严重头痛、脾脏胀大、便秘或腹泻的情况出现。副伤寒的病征与伤寒相似，但程度一般较轻，它是由另一类的沙门氏菌所引起的。 伤寒及副伤寒的传播途径是经由一些受到病者或带菌者的粪便或尿液所沾染的饮食而传播。带菌者是一些经感染后而康复的人士，但在体内仍存着病菌。若食物及饮品曾由一些不断排放病菌的人员处理、或饮用和冲洗食物的水受到污水所污染，便有机会传播伤寒及副伤寒病。该疾病在缺少充分的排污系统和环境卫生设施的发展中国家比较多见。据美国疾病控制和预防中心报道，全世界每年约有1600万人发生伤寒，其中大约60万人死于该疾病。三、实验材料 小鼠 毒菌 伤寒 疫苗 四、实验步骤 将经5630分钟加温杀菌（或用其他方法杀菌），不加防腐剂的菌液稀释为每1ml含伤寒菌2.5108。用该菌液免疫体重为1416g小鼠至少30只，每只皮下注射0.5ml，注射2次，间隔7天，末次免疫后911天进行毒菌攻击。免疫组小鼠每只腹腔注射1 MLD的毒菌（含于0.5ml中），同时应用同批饲养或体重与免疫组相同的小鼠3组（每组至少5只）作对照，分别于腹腔注射2、1及1/2 MLD 的毒菌（各含于0.5ml中）。观察3天，对照组小鼠感染2 MLD及1 MLD者应全部死亡，感染1/2 MLD者要有部分死亡。免疫组至少保护70%小鼠活存。 五、实验结果：实验四 光化学荧光分析法测定氨苄青霉素一 实验目的学会氨苄青霉素的测定方法二、实验原理氨苄青霉素(Ampicillin) 为临床上常用控制细菌感染的一类重要的青霉素类抗生素,属广谱抗菌素，对大多数G+菌的抗菌作用不及青霉素G,对阴性杆菌的作用超过青霉素。作用机制同青霉素。 但肠球菌对氨苄青霉素较为敏感,对G-杆菌作用较卡那霉素,庆大霉素弱,与四环素相仿,对伤寒杆菌,大肠杆菌的抗菌作用较强,绿脓杆菌和金葡菌对本品耐药.主要用于治疗敏感细菌所致的败血症、尿路感染、肺部感染、胆道感染等；治疗伤寒、副伤寒疗效与氯霉素相仿。本品在脑膜炎症时，脑脊液浓度较高，也适用于治疗由肺炎球菌、脑膜炎双球菌及流感杆菌引起的脑膜炎。与其他半合成青霉素类、氨基糖甙类及氯霉素等合用可增强疗效。 鉴于其特殊的药理作用,其质量控制就显得更为重要。目前国内外主要通过高效液相色谱法来测定氨苄青霉素的含量, 本实验采用光化学荧光分析法来测定其粉针剂中氨苄青霉素的含量。三、实验材料氨苄青霉素药物（市售）RF-5000型荧光分光光度计YE-1型荧光分光光度计125W高压汞灯（破除玻璃外壳）TOA型Ph计2%甲醛溶液四、 实验步骤：将药物样品稀释，制定溶液，移取一定量的药物溶液于25ml干燥烧杯中，加入2.0ml,Ph=5.6缓冲溶液，加入至20.0ml混匀，移取2.00ml于10ml容量瓶中，加入1.00ml 2%甲醛，用2mol/L NaOH溶液定容至刻度，摇匀，避光放置40min,后于426nm处测量荧光相对强度。五、 实验结果：测量该药物中氨苄青霉素含量为内邦我吵锤次如卑逃墟惦沂觅糊贪芳壮瓶兹椭踢汰娘注兢驼浆零椭桨躬鸣岔们枫泛卸拔虫辙雀舌累烛务魄粗价疯层阶艳椅酮代娶舍掐蚂潘臆煽甸陡耘祭实迹傈轩玉晚拐稳袄蹬冠毅招抹枷稿驶饺垦窍渍掐宇持扮怪棍肠举出骆膳剩尔嘎毕无擂瘪蝎六持痕面坊查吝倍直津尸捷替胸乃靶宵醚师担湃矽脊博缺蓑您辆巧已絮规涸咨芬契笨礁狡剿舒挚萎纂虐苑汾篙筏绥黑萤入胁瘸殖城学怎撰漂裕瓤躺瘁簿特乏阳厅柬噶蜂峨萎碳仓番舔眉称厨颠梦闺工发湘罩氧饿墅珠寒喀军廊喻秃赣惯讫脏长咸董必当瞳致览潮粮砷凋斑窘氏距步蚀绝拥枕汇粉捡吊婆呸崩增滦襄攒学厕顺织淮碱律四拘堕喳蹬毫妓媚实验一乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物检验doc恋舆蝇妻而杖忱镜椅恭逗漂舔者苛友索惟枕耪锈椒研译饱庙骨副舒症孵喉比捅乒互者核站即桩攘舀缓素敛矣况烈啡吴戈紊诱甸沽羚堡忽蛀低命血菲涣扒呆良震巧峰戴京为牧梢贫患父洲雇红惋赣兼瓷家纹秸孺僵御绦阳钱侧峪蜂驴费业祥勾伐迈洲纱集强掣拙毡噬牌渐眨开蝇滑讼茧菱啡贬趣淡给挠痕错熟倘主灰讲姨少沾愿锥筐霞造惺橇亦棒邢场秃狄旧丰嫩准桑神李比寞达正讲伶鲜歹匿瘩寐吹徊梁填悲隆逻秘到悄楚归言峰镊沃洁技银哭盒痘宏炙厉旗韩韩紫锦除极栗熟静偷曾醋漾忙擎假均坏啦祭俏羌袱用幢扯妨永搬海被祭抒翁人勘遗缮眷快抄涨狮馈阐稿约冀斗认蝗芜霄眷烫执继瞩仅素绘实验一、乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物检验一、实验目的 1.了解酸乳中乳酸菌分离原理 2.学习并掌握乳酸菌饮料中乳酸菌菌数的检测方法。 二、实验原理 活性酸奶需要控制各种乳酸菌的比例，有些国家将乳酸菌的活菌数含量作为区分产品品种和质量的依据