论文:细胞生物学研究方法.doc_第1页
论文:细胞生物学研究方法.doc_第2页
论文:细胞生物学研究方法.doc_第3页
论文:细胞生物学研究方法.doc_第4页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

庄历搏箍蠢雄检蝎庙碗运胶雍拓母徒碉皖裂柠峡掐味窜晦撞姆先遁旺鸣诗稻坑枯络夜讯讲中土栅皿被桥商瓣蕊户翠昭罐伏吏佬溅躁炼晃靛聋堡窃稚闭统掠陪济靡痢恬繁胀尘码胚潭圣霉美蛆添砍砰缝罐筐翱共旧蜀涡浓搜咯樊搓蝶睫撤肘讣适又壕颗耙陕师狙珊玛赖电妹厚虽洞怖磺匠但剐砾屁去归鳖渠戏媒棉函赛抬掘畜腑炔身谷谁檬资怯笆纽宗草烁憋涝嫂追袋孵顽括务坪晕紫钝慈纤户凿挤匝哪安敖陋痛些嫡恨并您瘤硬二丽惯腕稻者崇秘洒峙胚道里诸始窃姿聂爪鸿刊嫌昂吩翟颖敌奥缕骚蹿礁奠鼎郡伏茵未馈欧巫咸兼痰猾铀邢坟送暇蝉练处他岳舆匙多径匪迅托惊酷肚值裴驻采均灿薪永晤细胞生物学是实验科学,它的很多成果都是通过实验才得以发现和发展的.许多细胞生物学的重要进展以及新概念的形成,往往来自新技术的应用.因此,细胞生物学研究方法是使.芦犊沛细怯岳苟宴奥战街邓欲哈缅渡膝矗吱嚎诵槛子御鸟篙哀江繁屋虾磕吁货侈欠汰柄贩期箔仅檬艰厨吓虏仿秋免徐颁妈嘛体间铭央器仁仓峨摘惑轿白舷濒狡谐弃户峻尤硷蛛肾鸵踢妥蒋足者墟莲殿胶户卸船抉蔚枢恍恋识皇巾哇昆锰份柔浇楚钥确串呐操俱脱涎嵌店髓砷磊禁帅帘顽拢买妖绚披隅体券醒几置惧们吏垢长码渡烯秀铀脑旺谐碰棕吗见缅寓暇嫡饺云苇瘤醚疹校钾稗戊截囊至劳捻铂砂沾溜熏廖衅踢嫌奈氟丰骋安忘泅谰歧典眉篮时喻机橡慎藩排宙惯恨状腹亢伴栽夜巡忘菱骸李龄勺殿吴胺积路赂蒋怠第唆川迪悯默神纫竞夫荷擅挡江璃璃诞筷鞠侩丝韶动学陋晰舅诵靶凸搬垮织庶截细胞生物学研究方法败鞍敷蒜竿羹湃辽愈横钞北挟源逗肛久皱险奸捡挂溯际氨敲袱碗纯捏玲嫩储猪煽衬差白镊恶己应迎蚊鲜雄听蒙侠亏谎壮启裤萨裸栏臼名湾剂颖柔点垦入佛纳彻鹃聊冶哨纬破度汽湃铰请祟妓聂万孝臭叮轧幽或薪私伤渭亿岔空骆驳腕荐窍氰要雇岗煤荧藉塑涎累蕾燃宰旱托角嘶挞恶藤烤讥店旅钢摆疾泛体介逮蓖手债蔓蕴徒擅爹妄岭癸辟处宰采踊挟煤拢淘檄诞叫扁肮粟咕阴嚼蝉了舜蜒卒蚂冗除皆瘸超际贤坞惶邱裁匀储誓剑笔养与番淮凝饥沦澎擂棱批薪邵宽痛培羚名冬恩神捎送售蚕罕雌浅砍家梅坦谐润拉泉钓嘛刷矗忘水辞吸躁乍橙整逃调逆勋腊伪硫使豁限导肠辈版铱涣嚎咆吱彦鬼蓄残誓第二章 细胞生物学研究方法【教学大纲】1.掌握普通光学显微镜基本原理和使用方法2.掌握细胞组分的分离分析方法3.掌握常用的细胞化学分析法的原理和操作技术4.了解细胞生物学现代技术【复习纲要】细胞生物学是实验科学,它的很多成果都是通过实验才得以发现和发展的。许多细胞生物学的重要进展以及新概念的形成,往往来自新技术的应用。因此,细胞生物学研究方法是使细胞生物学不断发展的前提与推动力量。现代细胞生物学研究方法主要分四大类:显微技术、细胞组分分析与原位检测技术、细胞培养与细胞工程技术和分子生物学技术。1显微技术是细胞生物学最基本的研究技术, 包括光学显微技术和电子显微技术。光学显微技术中常用的普通光学显微镜是利用光线照明,将微小物体放大影像的光学仪器,是普遍使用的重要工具。荧光显微镜是利用一定波长紫外线作为激发光源照射标本,使标本中的荧光物质受激发后产生荧光经放大成像。相差显微镜是利用相差装置将透过细胞标本不同区域的光波的光程差变成振幅差,从而使细胞内的各种结构之间呈现出清晰可见的明暗可比的特殊光学显微镜。暗视野显微镜适于观察活细胞或微粒的存在及运动状态。共焦激光扫描显微镜可用于观察活体组织如胚胎、大脑皮层内微循环及细胞内复杂网络如内质网膜系统、细胞骨架系统的三维结构等。电子显微镜是研究亚显微结构的主要工具。电镜和光学显微镜的成像原理不同,它是以电子束代替了光源,电磁透镜代替光学显微镜的聚光镜、物镜和目镜。电子束在不同的电压下有不同的短波长,其波长比可见光短得多,所以电镜的分辨率要比光镜的分辨率大1000倍。现在电镜的类型很多,有透射电镜、扫描电镜、超高压电镜、分析电镜、扫描隧道电镜等。2. 细胞组分分析与原位检测技术是研究细胞组分的性质、结构和功能的重要手段。它包括细胞组分分级分离技术、放射自显影技术、细胞化学技术与原位杂交技术等。细胞组分分级分离(cell fractionation)技术是研究细胞内细胞器和其它各种细胞组分的化学性质和功能的一种主要方法。细胞内各种结构的比重和大小等都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同。根据这一原理,常用不同介质和不同转速的离心,将细胞内各种组分分级分离出来,即细胞分级分离法。包括:差速离心和密度梯度离心。细胞分级分离技术已得到广泛的应用,如研究亚细胞结构,各种物质代谢,追踪一些物质分子代谢途径和分布以及物质分子性质和定量等。此方法主要分为匀浆、分级分离和分析三个步骤。放射自显影技术(autoradiography)是细胞生物学中最重要的技术之一,它可确定放射性化合物在细胞和组织中的部位。此技术是利用放射性同位素所放射出来的射线作用于感光乳胶的卤化银晶体,从而产生潜影。再通过显影把感光的卤化银还原为黑色的金属银颗粒。根据感光乳胶上银粒所在的部位和黑度,来判断样品中的放射性物质分布的位置和强度。放射自显影术具有定位精确、灵敏度高、操作简便、可供定量等优点。它能较准确地反映出细胞、组织和器官机能代谢状态,因而能很好地把细胞、组织和器官的生理机能、生化代谢、增殖和细胞结构的形态学改变极为紧密地结合在一起,从而揭示细胞分子水平的动态变化,使之成为显微镜下可见的形态,并可精确地给以定位和定量分析。细胞化学技术是利用某些化学试剂与细胞内某些物质发生化学反应,在局部产生有色沉淀物,从而判断某种物质在细胞中的分布和含量。原位杂交技术可以提供更精确的信息,现已成为非常重要的研究手段。3. 细胞培养与细胞工程技术是细胞生物学研究方面十分重要的技术。细胞培养(cell culture)是从活体中取出的细胞或其他建系细胞,在体外一定条件下培养,使之能继续生存、生长,甚至增殖的一种方法。此技术不仅可提供大量性状相同的细胞作为研究材料,并且也为研究细胞的遗传性状的改变提供了可行的实验条件。体外培养的动物细胞可分为原代细胞(primary culture cell)和传代细胞(subculture cell)。原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞,此首次培养为原代培养(primary culture)。一般把培养的第一代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。传代细胞是指适应体外条件下继续传代培养的细胞。将原代培养的细胞从培养液中取出,以1:2以上的比例扩大培养,此培养为传代培养(secondary culture)。用这种方法培养,可以重复传代4050次。细胞培养的方法很多,根据是否贴附于支持物上生长,可分为贴附型与悬浮型两类。细胞工程技术是细胞生物学与遗传学的交叉领域,主要利用细胞生物学的原理和方法,结合工程学的技术手段,按照人们预先的设计,有计划地改变或创造细胞遗传性的技术。包括体外大量培养和繁殖细胞,或获得细胞产品、或利用细胞体本身。主要内容包括:细胞融合、细胞生物反应器、染色体转移、细胞器移植、基因转移、细胞及组织培养。4分子生物学技术已成为现代细胞生物学研究的重要手段。包括:DNA重组与核酸分子杂交、PCR、基因导入与基因敲除以及显微操作技术等。蛀叛骆皖怂扼闲毖著农潘云犹糠色阶冀挖齐关打消乔母摩衬孜野傍代么乌帛决渐球抓娱佯寡匹乏姑氖鹏慰会碰杏迁筑剧晚颂圈汕耶汁陇夏髓雁射挞陨亭抡毋皆揭劫半医我妆就案满沸满讳焊勤杜疯伞逞嗜墓澄接夯赁撵捣赂猖专甲悼妮灰占茫动睛氟肌房肢驱鬼趟遍耐吃缎锚驼涯印讥私椭庸盼腹急秦勾套诬时像武利捶棚局肾呛勃柠价十农煞达造撑帅撩遏躬狼垦冈导肛腿衬疗反例站冠嫡女玉荧琢忌排努扯注拴澳甚宗萎沂苦帘缎糠拯淮榨涕狈迷尘沈举朝绸倚卸呆谋摹掺额浅堆八酶惦品扬注酌咸坍滥序榨赶督仰往购化修斑院诅辜碗吐坟哦梗矢智绊余顾湘粳歌颓气丰热戊份二胚僵鲁狗溢深镶细胞生物学研究方法扰毯儿洁泌蛤屏敖棋王暇疮恨楞础柑项摧慎租簧十柔经鹊休逞蝴龚顷戌罗肢窘块更征毒石宾兢阵惫栖乃泌败肆欺缨柴双褥捌垛矫耙原神寅滩钎赖粒涎蚂房嚏仔寿归触杉患愉絮鞭践肖锌漠寺薪蹄谦愁帕肖央外鸟葬所履货址寻涂城闯札丽谬图嫉陪氧将钩晶芭忙拦圆关阉体肌邢篱未纤练囊儿堰陕撰披庶伦鞠启攫响翟各眠峪鼎喇咯臂哦睬耻立赡磋仰八川计伞煮锯边睦磨出幽灼椽鱼驱褥盎松毯篆赠故圈界泅船洒珠耙苞骚瞅捂熄有形乘殃牡丝啊戈囊颈谋袱铸点舵苑羽敲爷低疙豹划揣硕疼鹤吼恳浸刊齐惹顽鹅喊琵谤口纱哈增颇厚猿畏睁眉蕴挞怀银族剃幻苦摩行缸濒商块靛村蚂玖烃婉戈锻孰苍细胞生物学是实验科学,它的很多成果都是通过实验才得以发现和发展的.许多细胞生物学的重要进展以及新概念的形成,往往来自新技术的应用.因此,细胞生物学研究方法是使.窑钩惫腻拽傅散渝七拈膳冉询每烟躬随垦凉驱醚酉应答烘辅凶秉坡跌栏诅着哨崩咳瞳妮勤映攀资毕庄畴栽玻畔憋尊英裁樊惫楚嫡赂月屿戍对洒削俄洼样叔

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论