论文资料-药理学实验（word）可编辑.doc

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实验室规则一、课前预习实验指导，对实验目的和步骤应充分了解，对与实验有关的理论课内容也应作好复习，以便在实验课中进行讨论。二、进入实验室，必须穿好实验服，保持室内安静、整洁，不得高声喧哗和打闹，不得乱丢纸屑杂物。三、实验前先检查仪器、药品等，实验器材是否与清单相符，然后仔细阅读实验指导。根据实验内容进行分工，尽可能使每人都有操作机会，使每一实验过程全组同学都能看到。四、必须严格准确地按照实验指导中的方法进行操作，仪器用后必须放回原处，药品用后必须用原瓶塞塞好，玻璃器皿等必须清洗轻放。注意节约药品，爱护器材及动物。五、进行实验时，应认真、仔细、耐心，实验结果必须正确可靠。根据每次实验课的不同要求，作好实验报告。六、实验完毕，将器材洗干净擦干并还回保管室，各组轮流搞好室内清洁。死亡动物放在指定的废料筒内，活动物放入指定的笼中，并随手关好水、电、门窗。前言药理学是一门生物学科，药理学的知识和其他自然学科一样，都是根据实践和观察获得的。药理实验是药理教学的一个重要组成部分，通过实验将会更好地理解教材和教师讲授的科学知识，因此，实验课是为了更牢固的掌握药理学的基本概念，更全面的掌握药理学知识。药理实验课的目的在于通过实验，使学生掌握药理实验的基本技能，了解获得药理学知识的科学途径；培养同学们勤于动手，善于观察、认真思考和分析、有条不紊的实验室工作作风，为今后进行科研工作打下基础。 药理学是一门实验性医学学科，它的理论来自生物实验，因此，药理实验的特点是做实验离不开动物。但每一个动物都受各种外界因素和个体差异的影响，有时实验结果不一定和预期一致，因此，要求在实验过程中要如实详细记录，并经过自己的思考、分析，找出成功和失败的原因，以获得真正的知识，为今后临床实践和科学研究打下良好的基础。要把每一次实验做好，必须进行充分准备，要真正掌握实验知识，必须对实验指导进行预习。实验报告是对结果分析，培养独立思维能力的重要手段之一，任何轻视实验报告的想法对加深理解和进一步巩固药理学知识都将是一种障碍。 对使用的仪器，不但要学会使用，而且要理解测试仪器的原理，只有这样才能更好地使用仪器和排除仪器误差，得到正确的测试结果。本实验指导所叙述的实验方法，并不一定是达到每项实验目的的最好方法，仅是一般的常用的方法，我们期待同学们在药理实验方法上去努力创新。目 录第一章 药理实验的基础知识一、 药理学实验课的目的和意义1.验动物的捉持和给药方法31.1蛙和蟾蜍的捉持和给药方法1.2小鼠的捉持和给药方法1.3家兔的捉持和给药方法附：其它动物的给药法1.4实验动物的性别鉴别、编号和处死法一、实验动物给药量的计算二、实验结果的整理和实验报告的撰写第二章 药理学总论实验2.1药物的局部作用与吸收作用2.2药物的协同作用与拮抗作用2.3不同给药途径对药作用的影响2.4溶液pH值对某些药物吸收率的影响2.5肝脏功能对药物作用的影响2.6肾脏功能对药物作用的影响2.7药物的配伍禁忌2.8戊巴比妥钠半数致死量和半数有效量的测定第三章 各 论3.1普鲁卡因与丁卡因表面麻醉作用的比较3.2肾上腺素对普鲁卡因浸润麻醉的增效作用3.3氯丙嗪镇静作用及其强化麻醉的观察3.4解热镇痛药对发热家兔体温的影响3.5强心甙、肾上腺素、咖啡因对离体蛙心的作用3.6利多卡因对家兔电致颤阈的影响3.7利多卡因对氯化钡诱发心律失常的治疗作用3.8药物对离体家兔(或豚鼠)心脏冠脉流量的影响3.9利尿药和脱水药对家兔尿量的影响3.10药物的祛痰作用3.11药物对胃肠道蠕动的影响3.12药物对实验性胃溃疡的防治作用3.13糖皮质激素的红细胞膜稳定作用3.14胰岛素的过量反应及其解救3.15应用管碟法测定抗菌药的抗菌浓度3.16药物MIC的测定3.17药物的体内抗菌实验3.18硫酸链霉素的急性中毒及其解救3.19糖皮质激素对单核巨噬细胞吞噬功能的影响3.20环磷酰胺对小忌血清抗体形成的影响3.21环磷酰胺对抗体分泌细胞的影响3.22敌百虫的急性中毒与解救3.23注射液的溶血性实验第四章 药理学研究实验设计基本知识药理实验设计的原则药理实验设计的要点附录一 常用实验动物的选择与饲养管理附录二 常用实验动物的一些生理常数附录三 实验动物非挥发性麻醉药的剂量附录四 常用生理溶液的成分和配制附录五 人和动物的体表面积计算法、不同种类动物之间药物剂量换算法附录六 换能器与平衡记录仪附录七 实验动物的血压记录法附录八 实验动物的采血法附录七 常用血液抗凝剂第一章 药理学实验的基础知识一、 药理学实验课的目的和要求药理学实验课的目的在于通过实验，使学生掌握进行药理学实验的基本方法，了解获得药理学知识的科学途径，验证药理学中的重要基本理论，更牢固地掌握药理学的基本概念。药学院校的学生还要在药理学实验中学习进行新药临床前药理学研究的方法，以及定量药理学实验和药物的生物检定法等。 在实验课中还应培养学生科学工作的严肃的态度、严格的要求、严密的工作方法和实事求是的作风，并初步具备客观地事物进行观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力。为了达到上述目的，要求做到下列事项：实验前（1）仔细阅读实验指导，了解实验目的、要求、方法和操作步骤，领会其设计原理；（2）结合实验内容，复习有关药理学和生理学、生化学等方面理论知识达到充分理解；（3）估计实验中可能出现的情况和发生的问题。实验中（1）将实验器材妥善安排，正确装置；（2）严格按照实验指导书上的步骤进行操作，准确计算给药量，防止出现差错意外；（3）认真、细致地观察实验过程中出现的现象，随时记录药物反应的出时间、表现以及最后转归，联系课堂讲授内容进行思考；（4）注意节约实验材料。实验后（1）整理实验结果，经过分析思考，写出实验报告，按时交给指导教师；（2）整理实验器材，洗净擦干，妥为安放。将存活和死亡动物分别送至指定处所。做好实验室的清洁卫生工作。二、 实验动物的捉持和给药法实验1.2 小鼠的捉持和给药法目的 学习小鼠的捉持和各种给药法。材料 小鼠34只鼠笼 天平 注射器 针头 灌胃针头 小鼠尾静脉注射用固定筒生理盐水方法1 捉持法 以右手提鼠尾，将小鼠放于鼠笼或其它粗糙面上，将鼠尾向后轻拉，使小鼠固定在粗糙面上，以左手的拇指及屈成“V”状的食指捏其双耳及头颈部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤和尾部，这样便可将小鼠完全固定，并可保持头颈部平直。2. 灌胃法 以左手捉持小鼠，使其头部朝上，颈部拉直。右手持配有灌胃针头（以16号输血针头磨去针尖后制成）的注射器，自口角插入口腔，再从舌面紧沿上腭进入食道。如手法正确，不难成功。若遇阻力，应退出后再插，不能用力强插，以免刺破食道或误入气管，使动物致死。灌胃的药液量一般为0.10.3ml/10g。试以生理盐水作灌胃练习。3. 皮下注射 可由两人合作。一人左手抓住小鼠头部皮肤，右手拉住鼠尾。另一人左手捏起背部皮肤，右手持注射器（5号或6号针头），将针头刺入背部皮下。如由一人操作，可按前法捉持小鼠，右手持注射器，针尖从右侧肋缘上穿入皮下，向前推至右前肢腋下部位，将药液推入即可。小鼠皮下注射的药液量一般为0.050.2ml/10g。试以生理盐水进行练习。4肌内注射 可由两人合作。一人左手抓住小鼠头部皮肤，右手拉住鼠尾。另一人持注射器（4号或5号针头），将针头刺入后肢外侧部肌肉。如一人单独操作，以左手拇指和食指抓住小鼠头部皮肤，小指、无名指和掌部夹住鼠尾及一侧后肢，右手持注射器刺入后肢肌肉给药。注射器每腿不宜超过0.1ml。试以生理盐水进行练习。5腹腔注射 以左手抓住小鼠，使腹部在上面，头部下倾，右手持注射器（5号或6号针头），取30度角将针头从一侧下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜太高，刺入不能太深，以免伤及内脏。注射量一般为0.10.2ml/10g。试以生理盐水进行练习。6尾静脉注射 将小鼠置特制的固定筒内（或倒置的大漏斗、乳钵下），使鼠尾露出在外。用酒精（或二甲苯）棉球涂擦尾部，或将鼠尾在50度热水中浸泡半分钟，使血管扩张。用左手拉住尾尖，从左右两侧尾静脉中，选择一条扩张最明显的尾静脉，右手持注射器（4号针头），将针头刺入血管，推入药液。如推注时有阻力，且局部肿胀变白，表明针头没有刺入血管，应拨出后重新穿刺。穿刺血管时宜从鼠尾末端开始，以便失败后可在第一次穿刺点的近心端重新进行。小鼠尾静脉注射的药液量一般为0.10.2ml/10g。试以生理盐水作尾静脉注射练习。实验1.3 家兔的捉持和给药法目的 学习家兔的捉持和各种给药法。材料 家兔12只兔固定箱 兔开口器 磅称 导尿管 注射器 生理盐水方法1捉持法 用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。2灌胃 需由两人合作进行。一人取坐位，用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢，另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头，并固定之。取8号导尿管，从开口器中部小孔插入食道，深约1518cm。插管时易误入气管。区别之法主要在于谨慎观察插管后动物的反应。插入气管时将引起剧烈挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水中，如有气泡吹出，表示已误入气管内，此时应拨管重插。于判明导尿管确定插在食道内以后，取注射器接在导尿管上，将药液推入。再推注少量空气，使导尿管中不致有药液残留。然后抽出导尿管，取出开口器。如用兔固定箱，亦可一人操作。左手将开口器固定于兔口内，右手将导尿管插入食道。家兔灌胃给药时的药液容量一般为520ml/kg。试以生理盐水进行练习。3皮下、肌内及腹腔注射 给药方法基本上同小白鼠，唯针头可稍大（6号或7号），给药量可稍多（皮下与肌内0.51.0ml/kg，腹腔1.05.0ml/kg）。4静脉注射 将家兔置固定箱内，拨去耳壳外缘的毛，选择一条比较明显的耳缘静脉，用酒精棉球涂擦皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖，以食指垫在兔耳拟进针部位的下面，右手持注射器（6号），从近耳尖处将针头刺入血管。如见到针头确在血管内，即以左手将针头固定在兔耳上，将药液推入。推注时如有阻力，局部出现肿胀，表明针头不在血管内，应立即拨针重新穿刺。家兔的静脉注射量，一般药液为0.22.0ml/kg，等渗药液可达10ml/kg。试以生理盐水进行练习。实验2.1药物的局部作用与吸收作用目的观察药物对动物机体的局部作用和吸收作用材料兔子只兔固定箱、镊子、注射器、兔用麻醉口罩松节油、0.1硝酸士的宁、麻醉乙醚、5%水合氯醛注射液方法1、取兔一只放于兔固定箱内，对光观察兔耳血管粗细及颜色等情况，然后对一只兔耳涂擦松节油，待两分钟后对比两只兔耳有何不同？2、将兔称重，先观察正常活动，用镊子轻击四肢和背部，看有何反应。（1）给兔皮下注射0.2%硝酸士的宁注射液0.2ml/kg，用药后每隔二分钟用镊子轻击四肢，观察兔有何反应。（）待兔出现典型的士的宁中毒症状（表现为全身痉挛，角弓反张，呼吸暂停等）后，立即套上有麻醉乙醚的兔品罩，再观察兔的反应。（）当兔的中毒状态消失后，除去麻醉口罩，静注水合氯醛注射液2ml/kg。讨论题记录实验结果，说明哪种作用是局部作用？哪种作用是吸收作用？实验2.2药物的协同作用和拮抗作用目的观察激动剂与拮抗剂之间的相互作用材料兔子只0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%盐酸肾上腺素注液,0.2%硝酸毛果芸香碱注射液方法、取兔放于兔固定箱内固定，避免阳光直射眼睛，用毛剪剪去兔两眼睫毛，然后用瞳孔量尺测量瞳孔大小，连续三次，取平均值。、在兔左眼滴入.2%毛果芸香碱3滴，滴药时用姆指和食指将下眼睑提起,使成囊状,再用中指压住鼻泪管开口处,防止药液流入鼻泪管而不起作用，再用右手滴入药液。15分钟后再测量瞳孔大小，连续三次，取平均值，并进行比较。3、滴入毛果芸香碱20分钟后，分别在两眼滴入0.1%肾上腺素3滴，15分钟后测量两瞳孔大小，连续3次，取平均值并进行比较。4、滴入肾上腺素15分钟后，分别于两眼滴入0.05%硫酸阿托品注射液3滴，15分钟后观察两眼瞳孔变化，并测量其大小，连续3次，并取平均值。记录项目正常毛果芸香碱肾上腺素阿托品瞳孔大小左眼右眼讨论题从实验结果中如何说明药物的协同作用和拮抗作用？实验2.3不同给药途径对药物作用的影响目的观察不同途径给药引起机体的不同反应材料小白鼠只注射器、小白鼠灌胃器、钟罩、电子秤、镊子、4%硫酸镁溶液、0.3%戊巴比妥钠方法、取体重相近的小白鼠只，称其体重，一只用4%硫酸镁溶液0.2ml/10g肌肉注射，另一只以相同剂量灌胃，观察两只鼠的反应有何不同。、取体重相近的小白鼠只，称其体重分别放入钟罩内，观察它们的正常活动及翻正反射情况，然后用0.3%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g的量以不同途径给药,甲鼠灌胃，乙鼠肌注，丙鼠腹腔注射。观察小白鼠用药后的反应及活动情况，以翻正反射消失时作为麻醉开始指标。记录麻醉开始时间（从给药至翻正反射消失的时间），麻醉维持时间（即从翻正反射消失至翻正反射恢复的时间），麻醉深度有何不同（用镊子夹其后肢看其反应）。记录、硫酸镁试验鼠号体重给药量给药途径反 应 表 现记录、戊巴比妥钠试验鼠号给药方法麻醉开始时间麻醉维持时间麻醉深度讨论题为什么会有这些不同的结果？实验2.5肝脏功能对药物作用的影响目的观察肝功能损害对药物作用的影响。材料小白鼠只注射器、钟罩、电子秤0.2%戊巴比妥钠溶液、20%四氯化碳泊剂方法取体重近似正常的小白鼠及损坏肝脏的小鼠（实验前小时皮下注射四氯化碳.1ml10g）各两只，分别由腹腔注射.2%戊巴比妥钠0.2ml10g，记录并比较两组小白鼠麻醉持续时间有何差别？记录组别鼠号体重（g）药量（ml）注射时间产生作用时间醒转时间持续时间正常 1 2损坏肝组 3 4讨论题为什么损坏肝组织的小白鼠在注射戊巴比妥钠后作用时间长？有何意义？实验2.6肾功能对药物作用的影响目的观察肾功能损害对药物作用的影响材料小白鼠只注射器、钟罩、电子秤0.1%氯化高汞、5%硫酸链霉素方法取正常小白鼠和肾功能已被破坏的小白鼠（实验前小时腹腔注射.1%氯化高汞0.07ml/10g）各只，称其体重，分别由腹腔注射硫酸链霉素0.15ml/10g(375mg/kg)，观察小白鼠的活动情况，比较两组小白鼠的变化有何差别？记录组别鼠号体重（g）药量（ml）注射时间产生作用时间表现备注正常 1 2损坏肾组 3 4讨论题为什么两组小白鼠的表现不同？有何意义？实验2.7药物的配伍禁忌目的了解两种或两种以上的药物配合在一起时，可能产生的配伍禁忌。材料小白鼠4只、试管架、试管、乳钵、注射器、电子秤、pH广泛试纸、蒸馏水、液体石蜡、水氯氯醛、樟脑、磺胺嘧啶钠、维生素注射液、.1%肾上腺素注射液、碳酸氢钠、.3%戊巴比妥钠、1%安钠咖、4%硫酸镁、1.25%盐酸四环素、5%氯化钙方法一、 物理性配伍禁忌1、樟脑醑1ml+水1ml混浊、析出樟脑2、液体石蜡3ml+水3ml分层3、水合氯醛2g+樟脑2g液化二、化学性配伍禁忌、磺胺嘧啶钠ml+维生素B1ml磺胺嘧啶（反应前后均用pH广泛试纸测定pH值）、万u青霉素钾溶液ml1.25盐酸四环素溶液ml3、盐酸肾上腺素ml碳酸氢钠ml三、药理性配伍禁忌1、取小白鼠2只称重，其中1只肌内注射安钠咖注射液ml/10g，待分钟后二鼠分别腹腔注射戊巴比妥钠液ml/g，观察二鼠反应有何不同？2、取小白鼠只，均肌内注射硫酸镁0.2ml/10g，待出现肌肉松驰现象后，一只立即腹腔注射氯化钙0.1ml/10g，观察二鼠反应有何不同？讨论题用以上实验结果说明药物配伍禁忌的临床实用意义。实验28药物急性LD的测定目的通过实验学习测定LD的方法、步骤和计算过程，了解急性毒性实验的常规方法。材料小鼠（体重g左右）测试药物、苦味酸、注射器、小鼠饲养笼方法（以敌百虫药物为例）、预备试验（探索剂量范围）取小鼠只，以只为一组分成组，选择组距较大的一系列剂量，分别按组腹腔注射敌百虫溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起和100的死亡率（至少应找出引起2080死亡率）剂量的所在范围（参考剂量：最小300mg/kg，最大1000mg/kg）。2、正式试验（）取小鼠只，用苦味酸进行编号，用区组随机法进行分组，分为组，每组只小鼠。（）在预试所获得的和100的致死量范围内，选用个剂量（一般用个剂量，按等比级数增减），尽可能使半数组的死亡率都在50以上，另半数组的死亡率都在50以下。（）完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药（最好先从中剂量组开始，以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整）。3、LD测定中应观察记录的项目（1）实验各要素：实验题目，实验日期，室温，检品的批号、规格、来源、理化性状、配制方法及所用浓度等；动物品系、来源、性别、体重、给药方式及剂量（药物的绝对量与溶液的容量）和给药时间等。（2）给药后各种反应：潜伏期（从给药开始出现毒性反应的时间）；中毒现象及出现的先后顺序、开始出现死亡的时间；死亡集中时间；末只死亡时间；死前现象等。逐日记录各组死亡只数。（3）尸解及病理切片：从给药时开始记时，凡两小时以后残废的动物，均及时尸解以观察内脏的病变，记录病变情况。若有肉眼可见变化时则需进行病理检查。整个实验一般要观察天，观察结束时，对全部存活动物称体重，尸解，同样观察内脏病变并与中毒死亡尸解情况相比较。当发现有病变时，也同样作病理检查，以比较中毒后病理改变及恢复情况。、结果记录和处理（）结果处理实验资料按下表列出：受试物剂量 对数剂量动物数死亡率概率单位LD50（mg/kg） (X) (只) (%) (Y) 及置信限(95%)（）结果计算按公式：LD50=log-1Xm-i(P0.5)计算，求。其中：m最大剂量对数值；动物死亡率（用小数表示）；P动物死亡率的总和；i相邻两组剂量比值的对数（高剂量作分子）。讨论题什么叫？测定的意义和根据是什么？3.2肾上腺素对普鲁卡因浸润麻醉作用的影响目的了解肾上腺素与普鲁卡因联合用药可延长局部麻醉作用的特点。材料兔子只0.2%普鲁卡因注射液、含有/10万0.2ml肾上腺素的普鲁卡因注射液注射器、毛剪、烧杯、酒精棉球方法、取家兔只，在脊背两侧各选择相互对称，直径cm左右的部位一块，将毛剪净装于盛水的烧杯里（以免兔毛飞扬），用酒精消毒后，用针头刺皮肤，试其痛觉反应，用手掌紧贴兔背部皮肤，感觉刺激部位肌肉抽缩为感痛指标。刺激方式按左、中、右、上、中、下的顺序进行。全部阳性反应记6/6，全部阴性反应记为0/6，其余类推。、于两背部分别用0.2%普鲁卡因注射液2ml和0.2%普鲁卡因肾上腺素注射液2ml作皮下注射。注射后于min、2min、5min分别刺激注射部位测其痛觉，然后每5min测试一次，并比较两种药液的麻醉作用、维持时间及注射部位皮肤颜色有何不同？记录药物用药前反应用药后反应5min10min15min20min25min25min30min普鲁卡因普鲁卡因d讨论题以实验结果说明普鲁卡因与肾上腺素使用的临床意义？3.3氯丙嗪镇静作用及其强化麻醉的观察目的观察氯丙嗪的镇静作用和强化麻醉作用。材料家兔只注射器、0.5%盐酸氯丙嗪、戊巴比妥钠溶液、酒精棉球。方法每组取家兔只，称其体重，根据下列规定药物、剂量、用法、并记录反应。记录兔号体重0.5%氯丙嗪注射液0.2%戊巴比妥钠液麻醉作用用药前用药后发生时间维持时间痛觉瞳孔大小眼睑反射角膜反射体温痛觉瞳孔大小眼睑反射角膜反射体温甲1ml/kgiv乙1ml/kgiv1ml/kgiv丙1ml/kgiv注：甲、乙兔各静注氯丙嗪分钟后，再给乙、丙兔分别注射戊嘏比妥钠。讨论题以上结果说明了什么问题？实验3.4 解热镇痛药对发热家兔体温的影响目的观察解热镇痛药的解热作用。材料兔只复方氨基比林溶液、10蛋白胨电子秤、体温表、注射器、方法取正常成年兔只，编号为甲、乙，分别检查并记录正常体温（兔体温在38.539.5者为合适）。于小时前给乙兔皮下注射10蛋白胨10mlkg，体温可比正常时升高以上，则进行试验，甲、乙两兔各腹腔注射复方氨基比林溶液mlkg，给药后分别于0.5小时、1小时、1.5小时测量体温，观察各兔体温的变化。记录兔号体重药物正常体温给药后体温0.5h1h1.5h甲乙讨论实验结果说明了什么问题？临床上应用解热镇痛药应注意些什么？实验3.21敌百虫的急性中毒与解救目的观察有机磷酸酯类中毒的主要症状，了解阿托品、碘磷定在有机磷中毒解救中的意义和解毒原理。材料兔只、敌百虫、0.5硫酸阿托品注射液、碘磷定注射液兔胃导管、注射器、烧杯、方法、取兔只，称其重，先观察正常兔的唾液分泌，瞳孔大小，全身活动、四肢肌肉及排粪情况。、给两只兔灌服敌百虫溶液每公斤ml，记