糊精检验标准操作规程.docVIP

糊精检验标准操作规程起草人日期20 年 月 日审核人日期20 年 月 日批准人日期20 年 月 日生效日期20 年 月 日颁发部门质量部分发部门质量控制部1. 目的建立糊精检验标准操作规程，规范操作。2. 范围 适用于糊精的检验。3. 依据： 中国药典2010版二部。4. 职责4.1 起草 ：QC 审核：质量保证部负责人 批准人：质量管理负责人。 4.2 QC实施本规程。4.3 QA监督本规程的实施。5. 内容5.1性状本品为白色或类白色的无定形粉末；无臭，味微甜。本品在沸水中易溶，在乙醇或乙醚中不溶。5.2 鉴别5.2.1 试液及仪器一般实验仪器。碘试液：可取用碘滴定液（0.05mol/L）。取碘13.0g，加碘化钾36g与水50ml溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。5.2.2 分析步骤取本品10%的水溶液1ml，加碘试液1滴，观察应显红色。5.3 检查5.3.1 酸度5.3.1.1 试液及仪器一般实验仪器。酚酞指示液：取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）：取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀。5.3.1.2 分析步骤取本品5.0g，加水50ml，加热使溶解，放冷，加酚酞指示液2滴与氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）2.0ml，观察应显粉红色。5.3.2 还原糖5.3.2.1 试液及仪器一般实验仪器。碱性酒石酸铜试液：（1）取硫酸铜结晶6.93g，加水使溶解成100ml。（2）取酒石酸钾钠结晶34.6g与氢氧化钠10g，加水使溶解成100ml。用时将两液等量混合，即得。5.3.2.2 分析步骤取本品2.0g，加水100ml，振摇5分钟，静置，滤过；取滤液50ml，加碱性酒石酸铜试液50ml，煮沸3分钟，用105恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，滤渣先用水、再用乙醇、最后用乙醚分次洗涤，在105干燥2小时，精密称定，重量用M（g）表示，恒重的垂熔玻璃坩埚重量用M0（g）表示，照下式计算：遗留的氧化亚铜（g）= 公式遗留的氧化亚铜不得过0.20g。5.3.3 干燥失重5.3.3.1 试液及仪器一般实验仪器。5.3.3.2 分析步骤取本品约1g，置105干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，结果用W1（g）表示，在105干燥至恒重，精密称定，结果用W2（g）表示，扁形称量瓶的重量用W（g）表示，按照下式计算减失重量供试品减失重量（%）= 公式计算减失的重量不得过10.0%。5.3.4 炽灼残渣5.3.4.1 试液及仪器一般实验仪器。5.3.4.2 分析步骤取本品1.0g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，结果用W1（g）表示，缓缓炽灼至完全炭化，放冷；加硫酸0.51ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在500600炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷，精密称定后，再在500600炽灼至恒重，结果用W2（g）表示，坩埚重量用W（g）表示，按照下式计算遗留残渣：供试品遗留残渣（%）= 公式遗留残渣不得过0.5%。5.3.5 重金属5.3.5.1 试液及仪器一般实验仪器。氨试液：取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。酚酞指示液：取酚酞1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液5.7ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。醋酸盐缓冲液（pH3.5）：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100ml，即得。硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。混合液：由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml组成。标准铅溶液：称取硝酸铅0.1599g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10g的Pb）。本液仅供当日使用。5.3.5.2 分析步骤取炽灼残渣项下遗留的残渣，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显微粉红色，再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml，加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，置白纸上，自上向下透视，与铅标准溶液2.0mL同法制成的对照液比较，颜色不得更深（0.00002%）。5.3.6 铁盐5.3.6.1 试液及仪器一般实验仪器。稀盐酸：将浓HCl溶液沿玻璃棒缓缓导入含有水的烧杯中9.5%10.5%。30%硫氰酸铵溶液：取30g硫氰酸铵，加100ml水使溶解，摇匀，即得。标准铁溶液：称取硫酸铁铵FeNH4(SO4)212H2O0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10g的Fe）。5.3.6.2 分析步骤取本品2.0g，炽灼灰化后，残渣加盐酸1ml与硝酸3滴，置水浴上蒸发至近干，放冷，加盐酸1ml使溶解，用水移至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml置50ml纳氏比色管中，加水稀释至25ml，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35ml后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀，与标准铁溶液2.0ml同法制成的对照液比较，不得更深（0.005%）。5.3.7 微生物限度5.3.7.1 仪器及试液一般实验仪器和培养箱、净化工作台。无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4. 0g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，分装，灭菌。5.3.7.2 分析步骤微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。细菌及控制菌培养温度为3035；霉菌、酵母菌培养温度为2328。（1）细菌、霉菌及酵母菌计数A 供试品检查平皿法取供试品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，用匀浆仪或其他适宜的方法，混匀，作为1:10的供试液。取1:10的供试液1ml，加无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至10ml，作为1:100的供试液。取相应稀释级的供试液1ml，置直径90mm的无菌平皿中，注入1520ml温度不超过45的溶化的营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。每稀释级每种培养基至少制备2个平板。B 阴性对照试验取试验用的稀释液1ml，置无菌平皿中，注人培养基,凝固，倒置培养。每种计数用的培养基各制备2个平板，均不得有菌生长。C 培养和计数除另有规定外，细菌培养3天，霉菌、酵母菌培养5天，逐日观察菌落生长情况，点计菌落数，必要时，可适当延长培养时间至7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不小于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。一般营养琼脂培养基用于细菌计数；玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌及酵母菌计数；酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基用于酵母菌计数。在特殊情况下，若营养琼脂培养基上长有霉菌和酵母菌、玫瑰红钠琼脂培养基上长有细菌，则应分别点计霉菌和酵母菌、细菌菌落数。然后将营养琼脂培养基上的霉菌和酵母菌数或玫瑰红钠琼脂培养基上的细菌数，与玫瑰红钠琼脂培养基中的霉菌和酵母菌数或营养琼脂培养基中的细菌数进行比较，以菌落数高的培养基中的菌数为计数结果。每1g供试品中除细菌数不得过800个、霉菌及酵母菌数不得过80个。（2）控制菌检查A 供试品检查取细菌、霉菌及酵母菌计数的供试液10ml，直接或处理后接种至适量（不少于100ml)的胆盐乳糖培养基中，培养1824小时，必要时可延长至48小时。取上述培养物0.2ml，接种至含5mlMUG培养基的试管内，培养，于5h、24h在366nm紫外光下观察，同时用未接种的MUG 培养基作本底对照。若管内培养物呈现荧光，为MUG阳性；不呈现荧光，为MUG阴性。观察后，沿培养管的管壁加人数滴靛基质试液，液面呈玫瑰红色，为靛基质阳性；呈试剂本色，为靛基质阴性。本底对照应为MUG阴性和靛基质阴性。如MUG阳性、靛基质阳性，判供试品检出大肠埃希菌；如MUG阴性、靛基质阴性，判供试品未检出大肠埃希菌；如MUG阳性、靛基质阴性，或MUG阴性、錠基质阳性，则应取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上，培养1824小时。若平板上无菌落生长或生长的菌落与大肠埃希菌菌落形态特征不符，判供试品未检出大肠埃希菌。若平板上生长的菌落与大肠埃希菌菌落形态特征相符或疑似，应进行分离、纯化、染色镜检和适宜的鉴定试验，确认是否为大肠埃希菌