葡萄糖酸钠分析方法.doc

文件编号：SOP.QAD2001葡萄糖酸钠的检测方法起 草： 日 期：审 核： 日 期：批 准： 日 期：发布日期： 实施日期：文件编号： SOP.QAD2001页数： 1/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：1.目的规范葡萄糖酸钠的检测操作，以达到准确的检测结果。2.适用范围适用于葡萄糖酸钠的性状、确认实验、含量、溶状、pH、硫酸盐、氯化物、重金属、铅、砷、还原糖、干燥减量、晶体色度（b）、过滤实验、异物检查、溶液色度（10%w/v）、粒度分布和色调共计18个检测项目。3.职责3.1分析人员在进行葡萄糖酸钠的相关检验时，应严格执行本规定。3.2葡萄糖酸钠的检测负责人负责本规程的实施，监督与修订。4.标准4.1性状：无色黄色晶体粉末或颗粒，稍有特殊气味。4.2确认实验：符合实验4.3含量：98.0-102.0%4.4溶状：无色，几乎澄清4.5 pH（1.0g/10ml）:6.2-7.84.6硫酸盐：0.24% 以下4.7氯化物：0.071% 以下4.8重金属（以Pb计）：10g/g以下4.9铅：2g/g以下4.10砷（以As2O3计）：2.0g/g以下4.11还原糖（以葡萄糖计）：0.50% 以下4.12干燥减量：0.30% 以下4.13晶体色度（b）：3.5以下4.14过滤实验：C-C以上4.15异物检查：C以上4.16溶液色度（10%w/v）：15以下4.17粒度分布：符合实验4.18色调（420nm）：0.02以下5.工作程序5.1性状称取10g样品，放在洁净的白纸上，目视观察同时用鼻子闻其气味，做出判断。5.2确认实验文件编号： .SOP.QAD2001页数： 2/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：5.2.1焰色反应呈现黄色5.2.2取被中和的葡萄糖酸钠溶液（120），加入焦锑酸钾试液，有白色结晶性沉淀生成（用玻璃棒磨擦试管内壁，加速沉淀形成）。5.2.3取5ml葡萄糖酸钠溶液（110），加入0.7ml冰醋酸和1ml新配制的苯肼，水浴加热30分钟。冷却后，用玻璃棒磨擦容器内壁，出现晶体，过滤收集晶体，溶于10ml沸水中，加少量活性炭脱色，过滤。冷却后，用玻璃棒磨擦容器内壁，出现晶体，过滤收集并干燥沉淀的晶体。此晶体的熔点为192-202（分解）。5.2.4纸层析色谱：试液的主要斑点与标准品一致。5.3含量5.3.1仪器5.3.1.1三角烧瓶：150ml5.3.1.2酸式滴定管：50ml，精度0.05ml5.3.2试剂和溶液5.3.2.1冰乙酸：分析纯。5.3.2.2结晶紫冰醋酸指示剂：取结晶紫50mg加入100ml冰醋酸中溶解。储于棕色瓶中备用。使用期限一年。5.3.2.3高氯酸标准溶液（0.1000mol/l）5.3.2.3.1溶液的配制量取8.5ml高氯酸，在搅拌下注入500ml冰乙酸中，混匀。在室温下滴加20ml醋酸酐，搅拌至溶液混匀，冷却后用醋酸稀释至1000ml，摇匀，静置一夜。5.3.2.3.2溶液的标定准确称取约0.6g于105110下烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾。置于干燥的锥形瓶中，加50ml醋酸，温热溶解，加2-3滴结晶紫醋酸指示剂，用配好的高氯酸溶液滴定至溶液由紫色变蓝色(微带紫色)。同时做空白实验。C（HClO4）=邻苯二甲酸氢钾的质量（g）邻苯二甲酸氢钾消耗高氯酸的体积（ml）-空白消耗高氯酸的体积（ml）0.20425.3.3实验步骤称取约0.4g（称准至0.0001g）样品于三角烧瓶中，加冰乙酸50ml溶解（可用电热板稍微加热）,加2-3滴结晶紫指示剂，用0.1mol/l的高氯酸标准溶液滴定至溶液由紫色经蓝色最后变为绿色。同时做空白试验。葡萄糖酸钠含量=V高氯酸（ml）-V空白（ml）0.2181C（HClO4） 100%葡萄糖酸钠的质量（g）文件编号： .SOP.QAD2001页数： 3/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：式中V高氯酸：样品消耗高氯酸的体积（ml）V空白：空白消耗高氯酸的体积（ml）5.4溶状取1.0g样品于50ml比色管中，加水10ml溶解，摇匀，目测检验。5.5 pH5.5.1仪器5.5.1.1烧杯：50ml5.5.1.2 pH计：HORIBA pH METER F-215.5.2实验步骤取4.0g样品于50ml小烧杯中，加水至40ml溶解，用已校准的pH计进行测定。5.6硫酸盐5.6.1试剂5.6.1.1盐酸(14)：取125ml盐酸于500ml的容量瓶中，加水定容摇匀后，装入试剂瓶中，备用，使用期限1年。5.6.1.2氯化钡溶液(325)：取60g氯化钡于250ml的烧杯中，加适量水溶解后，转移至500ml容量瓶中，定容摇匀后，装入试剂瓶中，备用,使用期限1年。5.6.1.3硫酸盐标准溶液（100g/ml）：准确取0.148g硫酸钠于110预先干燥2小时，溶于水，定容至1000ml，装入试剂瓶中，备用,使用期限2个月。5.6.2实验5.6.2.1检液：取0.09g样品于50ml比色管中，加水约20ml溶解。5.6.2.2标液：取2ml 100g/ml的硫酸盐标准溶液，加水约20ml。5.6.2.3操作：在检液和标液中各加入2ml盐酸(14)，然后加入2ml氯化钡溶液(325)，加水至25ml，摇匀，放置10分钟，在黑色背景下比色，检液的澄清度应不浊于标液的澄清度。5.7氯化物5.7.1试剂5.7.1.1稀硝酸(110)：取10ml的硝酸于100ml的容量瓶中，加水定容，摇匀，装入棕色试剂瓶中，备用，使用期限1年。5.7.1.2硝酸银溶液(150)：取1g硝酸银于50ml的烧杯中，加入小量水溶解，转移至50ml容量瓶中，加水定容，摇匀，装入棕色试剂瓶中，备用，使用期限1年。5.7.1.3氯化物标准储备溶液（100g/ml）：准确取0.165g氯化钠（基准试剂）于500-600预先干燥1小时，溶于水，定容至1000ml，装入试剂瓶中，备用，使用期限1年。5.7.1.4氯化物标准溶液（10g/ml）：准确移取25ml的氯化物标准储备溶液（100g/ml），定容至250ml，装入试剂瓶中，备用，使用期限2个月。5.7.2实验5.7.2.1检液：取0.08g样品于50ml比色管中，加水约20ml溶解。5.7.2.2标液：取5ml氯化物标准溶液（10g/ml），加水约20ml。文件编号： .SOP.QAD2001页数： 4/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：5.7.2.3操作：在检液和标液中各加入6ml稀硝酸（110），然后加入1ml硝酸银溶液（150），摇匀，于暗处放置5分钟，取出，在黑色背景下比色，检液的澄清度应不浊于标液的澄清度。5.8重金属5.8.1仪器5.8.1.1瓷坩埚：50ml5.8.1.2具塞比色管：50ml5.8.2试剂5.8.2.1硝酸：优级纯5.8.2.2盐酸：优级纯5.8.2.3硫酸：优级纯5.8.2.4冰醋酸：分析纯5.8.2.5氨水：分析纯5.8.2.6铅标准储备液（0.1mg/ml）：称取0.1599g硝酸铅，用10ml稀硝酸（110）溶解，移入1000ml容量瓶中，加水稀释至刻度，装入试剂瓶中，备用。5.8.2.7铅标准溶液（0.01mg/ml）：准确移取铅标准储备液10ml于100ml的容量瓶中，加水稀释至100ml，装入试剂瓶中，使用期限为2个月。5.8.2.8硫化钠溶液：称取5g硫化钠，加入水10ml和甘油30ml的混合液中，溶解，混匀，装入棕色试剂瓶中，塞紧瓶塞，使用期限为3个月。5.8.2.9酚酞指示液：取1g的酚酞于100ml的容量瓶中，加乙醇（95%）溶解，定容，摇匀，装入试剂瓶中，备用，使用期限1年。5.8.3实验步骤5.8.3.1检液的制备取2.0g样品于瓷坩埚中，放置电炉上炭化，冷却后，加硝酸2ml和硫酸5滴，继续炭化至无白烟，放于450550的马弗炉中灰化。冷却，加2ml盐酸，水浴蒸干，残留物加3滴盐酸和10ml沸水，加热2min，冷却，移至比色管，加1滴酚酞试液（10g/l），用氨水调至微红，加2ml稀醋酸（120），定容50ml。5.8.3.2标液的制备在另一个瓷坩埚中加入2ml硝酸，5滴硫酸和2ml盐酸，蒸干。残留物加3滴盐酸，和10ml沸水，加热2min，冷却，移至比色管，加1滴酚酞试液（10g/l），用氨水调至微红，加2ml铅标准溶液（0.01mg/ml），2ml稀醋酸（120），定容50ml。5.8.3.3操作在检液和标液中各加2滴硫化钠溶液，混匀。放置5min，以白色为背景，横向和纵向比色。检液的颜色应不深于标液的颜色。5.9铅5.9.1仪器5.9.1.1容量瓶：100ml5.9.1.2岛津AA-6800F/G原子吸收分光光度计5.9.1.3天平：可读性0.01g5.9.2试剂文件编号： SOP.QAD2001页数： 5/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：5.9.2.1原子吸收用铅标准储备液1000g/ml5.9.2.2乙炔气：纯度99.9%5.9.2.3氩气：纯度99.9%5.9.3实验步骤5.9.3.1检液的配制取10g样品，置于100ml的容量瓶中，加水溶解，定容至刻度。5.9.3.2标准溶液的配制准确移取1ml标准储备液于100ml容量瓶中，加水定容，得到标准溶液（10g/ml）。分别准确取相应体积的10g/ml标准溶液，进行再稀释或直接使用，使最终标准溶液的浓度如下：火焰法 0.5g/ml，1.0g/ml，2.0g/ml石墨炉法 5ng/ml，10ng/ml，20ng/ml5.9.3.3操作先使用火焰法检测，若测不出来或样品的吸光度值太低，改用石墨炉法。5.10砷5.10.1仪器5.10.1.1砷发生装置器砷发生装置图5.10.2试剂5.10.2.1碘化钾试液：称取16.5g碘化钾，溶于水，移入100ml容量瓶中，稀释至刻度。贮存于棕色瓶中，使用期限1年。文件编号：.SOP.QAD2001页数： 6/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：5.10.2.2酸性氯化亚锡试液：称取4g氯化亚锡（SnCl22H2O），置于干燥的烧杯中，溶于125ml无砷盐酸（稍微加热溶解）中，溶解后，加水稀释至250ml，贮存于带磨口塞的试剂瓶中，塞紧瓶塞。使用期限为1个月。5.10.2.3砷标准储备液（0.1mg/ml As2O3）：准确称取0.10g预先研磨成非常细的粉末，于105干燥4小时的三氧化二砷，溶于5ml氢氧化钠溶液（15）中，用稀硫酸（120）中和后，再加入10ml稀硫酸（120），用新制备的无二氧化碳水稀释至1000ml，摇匀，装入试剂瓶中，备用。5.10.2.4砷标准溶液（1g/ml As2O3）：准确移取砷标准储备液10ml于1000ml的容量瓶中，加入10ml稀硫酸（120），用新制备的无二氧化碳水稀释至1000ml，摇匀，装入带磨口塞的试剂瓶中，使用期限为2个月。5.10.2.5乙酸铅吸收棉：溶解50g乙酸铅三水合物于250ml水中。以此溶液浸透脱脂棉，沥去过量的溶液，在低于100的烘箱内烘干，贮于瓶中，备用。5.10.2.6吸收液二乙基二硫代氨基甲酸银（AgDDC）-三乙醇胺-三氯甲烷溶液：称取0.25g二乙基二硫代氨基甲酸银（C2H5）2NCS2Ag置于乳钵中，加少量三氯甲烷研磨，移入100ml量筒中，加入1.8ml三乙醇胺，再用三氯甲烷分次洗涤乳钵，洗液一并移入量筒中，再用三氯甲烷稀释至100ml，静置过夜，过滤，贮存于棕色瓶中。放在阴凉处，一周内有效。5.10.2.7盐酸：分析纯5.10.2.8无砷锌粒：分析纯5.10.3实验5.10.3.1检液的制备取0.50g样品于砷发生瓶中，加适量的水溶解，加盐酸（1+1）5ml和碘化钾试液5ml，2-3min后，加酸性氯化亚锡试液5ml，放置10min，加水至刻度。5.10.3.2标液的制备取2ml砷标准溶液于砷发生瓶中，适量的水，加盐酸（1+1）5ml和碘化钾试液5ml，2-3min后，加酸性氯化亚锡试液5ml，放置10min，加水至刻度。5.10.3.3操作在检液和标液中各加入2g无砷锌粒，马上把装置按上图连起来。F处放置乙酸铅吸收棉，C管的下端应伸到装有5ml吸收液的D管的底部，同时塞紧H和J处的橡皮塞。把发生瓶放于25水中，水面刚及发生瓶的肩部。放置1h后，取下吸收管必要时，用三氯甲烷将吸收液补充至5ml，混匀，观察吸收液的颜色。检液的吸收液颜色应不深于标液的吸收液颜色。5.11还原糖5.11.1仪器5.11.1.1锥形瓶：250ml5.11.1.2胖肚移液管：10ml5.11.1.3量筒：25ml5.11.2试剂5.11.2.1碱性柠檬酸铜试液：5.11.2.1.1取CuSO4晶体17.3g，加水溶解成300ml。5.11.2.1.2取柠檬酸钠173g和碳酸钠117g，加水600ml，加热溶解。5.11.2.1.3使用前，不断振摇下，将5.11.2.1.2缓慢加入5.11.2.1.1内。冷却后，稀释至1000ml。（应现配现用）文件编号： .SOP.QAD2001页数： 7/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：5.11.2.2淀粉试液（10g/l）取1.0g，加水5ml使成糊状，在搅拌下，将糊状物加入90ml沸腾的水中，煮沸1-2min，冷却，稀释至100ml。使用期限为2个周。5.11.2.3碘标准溶液（0.05mol/l）5.11.2.3.1标准溶液的配制称取13g碘和35g碘化钾，加水100ml溶解，稀释至1000ml，摇匀，保存于棕色具塞瓶中。使用期2个月。5.11.2.3.2标准溶液的标定准确称取0.15g预先在硫酸干燥器中干燥至恒重的基准三氧化二砷，置于碘量瓶中，加4ml氢氧化钠溶液c（NaOH）=1mol/l溶解，加50ml水，加2滴酚酞指示液（10g/l），用0.5mol/l的硫酸溶液滴定至无色，加3g碳酸氢钠及3ml淀粉指示液（5g/l），用配制好的碘溶液滴定至溶液呈浅蓝色。同时做空白试验。C（1/2 I2）=三氧化二砷的质量（g） 三氧化二砷消耗碘标液的体积（ml）-空白消耗碘标液的体积（ml）0.049465.11.2.4硫代硫酸钠标准溶液（0.1mol/l）5.11.2.4.1标准溶液的配制称取26g硫代硫酸钠（Na2S2O3.5H2O）（或16g无水硫代硫酸钠），溶于1000ml水中，缓缓煮沸10min，冷却，放置两周后过滤备用。5.11.2.4.2标准溶液的标定准确称取约0.15g于120 烘至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于25ml水，加2g碘化钾及20ml硫酸溶液（20%），摇匀，于暗处放置10min，加150ml水，用配制好的硫代硫酸钠标准溶液滴定，近终点时，加3ml淀粉指示液（5g/l），继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。同时做空白试验。C（Na2S2O3）=重铬酸钾的质量（g）重铬酸钾消耗Na2S2O3标液的体积（ml）-空白消耗Na2S2O3标液的体积（ml）0.049035.11.3实验步骤准确称取约1g样品，于250ml锥形瓶中，加10ml水溶解，加碱性柠檬酸铜试液25ml,在锥形瓶上盖上一个小烧杯，缓缓煮沸（溶液沸腾后，将加热温度调至120，保持微沸）恰好5min，快速冷却至室温，在溶液中加入25ml稀醋酸（110），再准确加入0.05mol/l的碘溶液10ml，加10ml盐酸（14）和3ml淀粉试液。过量的碘用0.1mol/l的硫代硫酸钠标准溶液滴定，溶液由黑色变为亮蓝色即为终点。硫代硫酸钠标准溶液消耗的体积应不小于8.15ml。亦可按照下式进行计算。还原糖%=空白消耗Na2S2O3的体积（ml）-样品消耗Na2S2O3的体积（ml）0.027C（Na2S2O3）100样品称样量（g）文件编号： SOP.QAD2001页数： 8/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：式中：0.027为1ml硫代硫酸钠标准溶液相当于0.027mg的葡萄糖5.12干燥减量5.12.1仪器5.12.1.1称量瓶：3060mm5.12.1.2烘箱：室温-3005.12.2实验步骤准确称取约4g样品于称量瓶中，在1051下干燥2小时，取出，放于干燥器中，冷却至室温，称量。同时，做空白实验。A=C+S-B100%A：干燥减量（%）B：干燥后质量（g）SC：干燥前称量瓶的质量（g）S：称样量（g）5.13晶体色度（b）5.13.1仪器5.13.1.1色差计MINOLTA CR-3005.13.1.2石英皿（带盖）5.13.2测定 葡萄糖酸钠 75001 A-A(生产厂家) 2005/03/272004/6/302004/06/012004/05/18/18在石英皿中装入试样，盖上盖子，用已校正好的色差计进行测定。5.14过滤实验5.14.1仪器滤膜5.14.1.1抽滤瓶：3000ml5.14.1.2真空泵：型号ASPIRATOR A-3S5.14.1.3过滤膜：0.8m，4.7cm5.14.1.4带把烧杯：1000ml5.14.1.5一次性培养皿：9cm5.14.1.6电子天平： 量程1000g，分度值0.1g5.14.2实验步骤5.14.2.1用0.8m的滤膜做过滤水。取200克样品，倒入用滤过水冲洗过的烧杯中，倒入约300ml的滤过水，盖上一张滤纸，防止灰尘落入，适当加热使样品完全溶解，将溶解后的试液通过0.8m的滤膜过滤，再用适量的滤过水冲洗烧杯，洗液也通过滤膜，最后用滤过水冲洗滤杯和滤膜，然后将滤膜取下，用一次性培养皿盖好，并在培养皿上加贴标签，待晾干后与标准膜比较。5.14.2.2 根据试样膜与标准膜比较的结果，填写过滤标签，如上图，封好滤膜，保存。5.15异物检查5.15.1仪器文件编号： .SOP.QAD2001页数： 9/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：5.15.1.1不锈钢制盘：L70cmW50cmH14cm5.15.1.2不锈钢制长柄勺：约21cm长5.15.1.3不锈钢制取样勺5.15.1.4刀子5.15.2实验步骤对于每一需检验的管理号的产品，从其中抽取一袋，拆线打开外袋封口，用刀子良好的切开内袋，用不锈钢取样勺取葡萄糖酸钠样品2.5kg，防于不锈钢盘中，用长柄勺逐层拨开抖散，从盘的一端开始检查，直至另一端结束，目视样品中是否有异物存在，若有异物，用勺取出，装入塑料袋中，并做记录。5.16溶液色度（10%w/v）5.16.1仪器5.16.1.1电磁搅拌器 型号：78HW-1型5.16.1.2烧杯250ml5.16.1.3比色管150ml5.16.1.4容量瓶1000ml5.16.2试剂5.16.2.1氯铂酸钾（优级纯）5.16.2.2氯化钴（优级纯）5.16.2.3盐酸（优级纯）5.16.3标准原色液的配制准确称取氯铂酸钾（K2PtCl6）1.245g和氯化钴（CoCl6H2O）1.000g于1000ml容量瓶中，加适量的水溶解，加入100ml盐酸，加水定容至1000ml，得到溶液的APHA为500黑曾。5.16.4 APHA标准色的配制分别取适量体积的500黑曾标准原色液，用水稀释，分别得到APHA为5，10，15，20，25的标准色阶。5.16.4试液的配制取20g试样于烧杯中，加水至200ml，在电磁搅拌器上搅动溶解。5.16.6操作在比色管中加入与标准色阶溶液相同高度的试液，进行比色，得到试液的色度。5.17粒度分布5.17.1仪器5.17.1.1不锈钢制试验用筛：（JIS标准）10目（1.700mm）、14目（1.180mm）、18.5目（0.850mm）28目（0.657mm）、30目（0.500mm）、42目（0.355mm）50目（0.300mm）、60目（0.250mm）、83目（0.180mm）100目（0.150mm）5.17.1.2筛机：MRK-RETSCH5.17.1.3电子天平：量程4200g，准确至0.01g5.17.2实验步骤将试验用筛装好，从上到下排列顺序为：10、14、18.5、28、30、42、50、60、83和100。称取约150g的葡萄糖酸钠于上层筛网中。将筛网置于筛机上，间歇振动10分钟。取下筛网，称取各筛网中葡萄文件编号： .SOP.QAD2001页数： 10/11版数 第 2 版标题 葡萄糖酸钠的检测方法主管部门：品质管理科分发部门：糖酸钠的质量。计算粒度分布情况，作出粒度分布图。5.18色调5.18.1仪器5.18.1.1紫外-可见分光光度计HITACHI U-20005.18.1.2烧杯250ml5.18.1.3