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文档简介

测吸光度，鉴定Isolating DNA/RNA/Protein from Animal Tissue分离程序在室温孵育度2分钟，13000 g离心1分钟，收集流出液每ml buffer GTC加入20ul 2-巯基乙醇（此混合物可在室温下保存1周）用50-100ul Elution Buffer洗脱DNA吸取700ul buffer GTC于玻璃匀浆器中加入30mg脑组织柱子转移到一个干净的1.5ml离心管在buffer GTC中破裂和充分匀浆组织（务必充分匀浆）用空收集管以13000 g离心2分钟以完全干燥离心柱匀浆液转入1.5ml离心管中弃去流出液，2毫升收集管可再使用室温下13000 g离心5分钟室温下13000 g离心5分钟加入700ul 已稀释的DNA Wash Buffer在一2 ml收集管内插入HiBind DNA柱弃去流出液，2毫升收集管可再使用小心地将澄清的上清液转移至HiBind DNA柱上（勿吸入沉淀或脂肪组织）室温下13000 g离心5分钟轻柔的盖上盖子， 13,000g离心1min（确保所有的细胞裂解液均已通过柱子，必要时可再离心）加入500ul Buffer HBHiBind DNA柱放入另一新的2 ml收集管，室温下保存流出的裂解液中加入350ul无水乙醇漩涡混匀15秒在一2 ml收集管内插入HiBind RNA离心柱将上述混合物转移到HiBind RNA离心柱上（分次装载）室温下13000 g离心1分钟吸取500ul RNA Wash Buffer I直接加入HiBind RNA离心柱上洗涤柱子流出液转移至一新的管子用于蛋白质提取 加入4倍体积冰冷的丙酮，漩涡充分混匀室温下13000 g离心1分钟在-20下孵育30分钟弃去流出液，2毫升收集管可再使用在最大速度4C离心10分钟 加入500ul 已经用无水乙醇稀释过的RNA Wash Buffer II至柱上用1ml冰冷的无水乙醇洗涤沉淀室温下13000 g离心1分钟在最大速度4C离心3分钟弃去流出液，2毫升收集管可再使用 重复上述操作一次弃去液体并风干用buffer溶解蛋白质用于下游分析用空收集管以13000 g离心2分钟以完全干燥HiBind 离心柱柱子转移到一个干净的1.5ml离心管加30-70ul预热
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