课件：实验五小麦萌发前后淀粉酶活力的.ppt_第1页
课件：实验五小麦萌发前后淀粉酶活力的.ppt_第2页
课件：实验五小麦萌发前后淀粉酶活力的.ppt_第3页
课件：实验五小麦萌发前后淀粉酶活力的.ppt_第4页
课件：实验五小麦萌发前后淀粉酶活力的.ppt_第5页
已阅读5页，还剩10页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验五 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较,一、实验目的,1学习测定淀粉酶活力的方法。 2了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化。,二、实验原理,休眠种子中主要含有-淀粉酶，而-淀粉酶是在萌发过程中形成的。种子萌发时，淀粉酶活性随萌发时间迅速增加，将淀粉分解成小分子糖类，供幼苗生长。 -淀粉酶水解非还原端的第二个-1,4-糖苷键，水解产物为麦芽糖。,淀粉的水解产物麦芽糖有还原性能与3，5-二硝基水杨酸试剂反应，使其还原生成红色3-氨基-5-硝基水杨酸。 在一定范围内，其颜色深浅与淀粉酶水解产物的浓度成正比，可用麦芽糖（或葡萄糖）浓度表示，用比色法测定淀粉生成的还原糖的量，以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。,三、试剂,1. 0.1标准麦芽糖溶液 20毫升：精确称量100毫克麦芽糖，用少量水溶解后，移入100ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度。 2pH 6.9，0.02摩尔L磷酸缓冲液 100毫升 31淀粉溶液100毫升：1克可溶性淀粉溶于100毫升 0.02摩尔L磷酸缓冲液，其中含有 0.006摩尔L氯化钠。,413,5-二硝基水杨酸试剂: 1g 3,5-二硝基水杨酸溶于20毫升2摩尔L的氢氧化钠溶液和50毫升水中；再加人30克酒石酸钾钠，定容至100毫升。若溶液混浊，可过滤。 51氯化钠溶液300毫升 6海砂5克,四、操作步骤,1种子发芽： 小麦种子浸泡2.5 h后，放人25恒温箱内或在室温下发芽。,2 酶液提取： 取发芽第三天或第四天的幼苗15株，放人乳钵内，加适量石英砂，加 1氯化钠溶液10毫升，用力磨碎。在室温下放置 20分钟，搅拌几次。将提取液离心（1500转min）67分钟。将上清液倒人量筒，测定酶提取液的总体积。进行酶活力测定时，将酶提取液用Ph6.9的磷酸缓冲液稀释10倍。 取干燥种子15粒作为对照（提取步骤同上）。,3酶活力测定： （1）取25毫升刻度试管4支。编号。按下表要求加人各试剂（各试剂须25预热10分钟）。,将各管混匀，放在25，水浴中保温3分钟后，立即向各管中加人1 3，5-二硝基水杨酸溶液2毫升。（？） （2）取出各试管，放人沸水浴中加热5分钟。冷至室温，加水稀释至25毫升。将各管充分混匀。 （3）用空白管作对照；在500nm处测定各管的光吸收值，记录结果。,4计 算 本实验规定：25时3min内水解淀粉释放1mg麦芽糖所需的酶量为1个酶活力单位（U）。 根据溶液的浓度与光吸收值成正比的关系，即：A标准A未知C标准C未知 C（酶液管浓度）A酶C标准A标准 则15粒种子或幼苗的总活力单位= C酶N酶V酶 N为酶液的稀释倍数 V为提取酶液的总体积,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用,主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！,致力于数据
人人文库> 全部分类> 专业文献 > 医学资料

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论