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文档简介
香菇多糖的复合酶法 提取,香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质。,香菇多糖的作用: 香菇多糖具有抗病毒、抗肿瘤,调节免疫力、降血糖、抗氧化等功能。有关香菇多糖的研究,特别是结构方面的研究已引起国内外学者的高度关注,并有望成为多糖领域的研究热点。,与其他抗肿瘤药物相比,香菇多糖几乎无任何副作用,对胃癌、鼻咽癌、直肠癌、乳腺癌和慢性粒细胞白血病等有抑制和防止术后微转移的作用,是目前已知最强的免疫增强剂之一。,香菇多糖的提取方法:,热水浸提法,超声波提取法,稀酸(碱)浸提法,微波法提取香菇多糖,深层发酵培养提取法,酶解法,酶解法: 酶解法就是指在浸提的过程中加入相应的酶来水解纤维素、果胶、蛋白质分子等,以使多糖从细胞中分离出来。,酶法提取较其他方法的优点,1.其作用条件温和。 2.通过酶法破壁去除杂质可以明显提高 提取率,缩短提取时间。 3.可减少能源消耗。 4.有效的保存多糖的生物活性。,复合酶提取香菇多糖:,香菇多糖的制备工艺,一.原料准备 二.提取 三.分离纯化,香菇的复合酶法提取,原料的准备和处理 香菇烘干( 50) 粉碎过筛多糖提取原材料。,香菇的复合酶法提取,主要实验试剂及仪器 真空干燥箱,离心机,恒温振荡器,紫外可见分光光度计,傅里叶变换红外光谱仪,纤维素酶,木瓜蛋白酶,实验方法与步骤,反应结束,将三角瓶放到沸水锅中,10min沸水浴灭酶。,称取木瓜蛋白酶和纤维素酶按一定比例混合,加入5mL蒸馏水溶解。,香菇溶液放在水浴中预热至酶解温度,将酶液加入到香菇溶液中,在恒温振荡器上提取。,称取80目的香菇粉2g,放入到250mL的三角瓶中,加蒸馏水35mL混合均匀后置于40水浴锅中,水浴30min,调节pH值。,灭酶结束,冷却至室温,将酶提取液放入到离心管中,调至4000 r/min离心,取上清液,即得到酶提取多糖清液。,香菇的复合酶法提取,香菇的复合酶法提取,分离纯化 1.分离提取 用0.5%NaOH初步提取,之后取清液,用透析袋透去除杂离子,透析后去除杂蛋白,用活性炭脱色1 h,加入95%乙醇,使溶液中乙醇的浓度达到75%进行醇沉醇沉过程中要将其保存在4冰箱中,保持24 h,离心15 min,取沉淀,置于真空干燥箱中干燥,即可得到香菇粗多糖。,2.纯化 将香菇粗多糖水溶解后用色谱仪分离, 干燥获得纯香菇多糖。,影响香菇多糖得率的因素:,随着复合酶浓度的增加,多糖提取率也逐渐增加,酶浓度大于0.4%后提取增加率趋于平缓,因此,最佳复合酶的浓度为0.4%。,1.复合酶的浓度对多糖得率的影响,2.料液比对多糖得率的影响,当料液比在115l25之间多糖提取率增长较快,继续提高料液比多糖提取率仍有升高,但提高速率减小因此最佳料液比为120,3.酶解时间对多糖得率的影响,由图可知,香菇多糖的提取率随酶促反应时间的延长增加。,酶法提取的应用前景:,酶法提取由于反应特异性强、条件温和易获得、提取时间短、提取率高、绿色节能等已引起广泛的关注,具有较大的应用潜力,且随着对酶法技术的不断研究,酶法与其他技术如超声波、超高压、微波等技术的联用也将成为另一个热点研究方向。,Thanks,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考,实际情况实际分析,主要经营:课件设计,文档制作,网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 秉着以优质的服务对待每一位客户,做到让客户满意! 致力于数据挖掘,合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网一站式需求,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or compute
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