药敏试验标准clsi更新解读ppt课件

CLSI药敏试验标准更新解读,广西壮族自治区人民医院检验科,一、表格的格式已经修改,扩散法和MIC法表格在同一页面上 认真熟悉相关的格式和表格，改变的地方 以粗体字显示 关于根据一种一种抗生素的药物试验结果的基础上报告其同类抗生素敏感性的相关规则已经改变,二、报告不敏感类别,较新的抗生素（如达托霉素）因为目前耐药株少见所以还没有耐药折点。 要用另一种方法确认后才能做出“NS”（不敏感的评价,三、对青霉素敏感的葡萄球菌, 如果分离出的金葡菌对青霉素敏感，在琼脂平皿上用苯唑西林诱导后再用其他方法（Nitrocephin纸片法）进行确认,四、苯唑西林耐药葡萄球菌的检测,头孢西丁检测苯唑西林耐药葡萄球菌好于苯唑西林，因为头孢西丁能诱导出mecA基因表达。 金黄色葡萄球菌和S.lugdunensis对苯唑西林的药敏，继续应用抑菌圈直径折点判断，但凝固酶阴性葡萄球菌例外。,五、纸片扩散法检测万古霉素 中介的葡萄球菌（VISA）,不要使用纸片扩散法检测万古霉素中介的葡萄球菌，应该使用推荐的替代方法 关于万古霉素中介的葡萄球菌对万古霉素的异质性问题尚在讨论。,六、对莫匹罗星高水平耐药的 金葡菌,在鼻腔中难于清除的对莫匹罗星耐药的金葡菌的处理 筛选出有MRSA（甲氧西林耐药金葡菌）定植的患者很重要,七、关于肠杆菌科细菌的 碳青酶烯酶,肺炎克雷伯菌碳青酶烯酶（KPC） Klebsiella pneumoniae carabapenemases (KPC) 用当前的折点难于检测碳青酶烯酶。 分离株对厄他培南的MIC为2g/ml，或对美罗培南（或亚胺培南）MIC为2-4g/ml 改良的霍吉氏试验（Hodge Test）为确认试验，PCR是诊断的金标准。,七、关于肠杆菌科细菌的 碳青酶烯酶,记住其他已知的碳青霉烯酶耐药机制，比如质粒突变、ESBLs和Ampc产物 由于质粒的转移，KPC质粒介导的耐药菌株感染会使感染的控制变得更难 除水解碳青酶烯类抗生素外，KPC碳青酶烯酶还能水解超广谱头孢菌素,碳青酶烯酶耐药机制,碳青霉烯酶水解作用 细胞外膜通透性下降（“OprD”缺失） ESBL或Ampc酶+细胞外膜通透性下降（“OprD”缺失）,碳青酶烯酶耐药机制,属于内酰胺酶超家族 两大类碳青霉烯酶水解机制依赖其活化中心 根据丝氨酸活化中心分为：A和D类 依赖于锌活化中心：B类 所有碳青霉烯酶水解青霉素、广谱头孢菌素和碳青霉烯类抗生素,碳青霉烯酶分类,肺炎克雷伯菌药敏,氨苄西林 R 头孢曲松 R 哌拉西林 R 氨曲南 I 头孢噻吩 R 头孢吡肟 S 头孢西丁 S 哌拉西林/他唑巴坦 R 头孢噻肟 R 亚胺培南 I 头孢他啶 I 可能需要检测碳青霉烯酶,A类碳青霉烯酶, 1982年在英国首次发现 A类碳青霉烯酶有四大家族 染色体编码 粘质沙雷氏菌酶 （SME） 非碳青霉烯金属酶 （NMC） 水解亚胺培南的内酰胺酶 （IMI） 质粒编码 肺炎克雷伯氏菌碳青霉烯酶（KPC） 圭亚那超广谱（GES）,KPC,属于A类分子2f功能组 能被克拉维酸抑制，不能被乙二胺四乙酸（EDTA）抑制 对所有内酰胺酶抗生素耐药 质粒编码 与其他耐药基因相关联（氨基糖苷类，氟喹诺酮类） 能够转移,KPC流行病学,主要是肺炎克雷伯杆菌（KP） 在肠杆菌属、沙门菌属、大肠杆菌、铜绿假单胞菌属、柠檬酸菌属亦有报道 1996年，在北卡罗莱纳州被首次发现肺炎克雷伯菌临床分离株（KPC-1） 已经有KPC-2、KPC-3、和KPC-4型的相继报道 大多数类型发现于东海岸,KPC流行病学, KPC产酶株发现于下列国家 法国 巴西 哥伦比亚 中国 在美国内布拉斯加医学中心没有检测到KPC 在45株疑似ESBL菌株中（其中6株为高MICs碳青霉烯类）没有检测到KPC,KPC产酶株初步判定,属于肠杆菌科 对广谱头孢菌素耐药（头孢噻肟、头孢他啶和头孢三嗪） 对头霉素敏感度有易变性（头孢西丁和头孢替坦） 碳青霉烯类 MICs2g/ml,KPC产酶株检测,药敏试验(ASTs) MIC法 碳青霉烯类 MICs2g/ml 纸片扩散法 碳青霉烯类：“I”或“R” 在碳青霉烯类抗生素之中，厄它培南对KPC产酶株： 大多数敏感 缺乏特异性 商用检测系统 检测KPC产酶株的能力不稳定 药敏折点与CLSI的推荐方法的结果不符合,KPC产酶株的确认方法,改良霍吉氏试验 1，用ATCC 25922 E.Coli标准 株涂抹皿，在中心贴上亚胺 培南纸片 2，用待测菌株从平皿的边缘 到纸片之间划出条纹 3，孵化过夜 4 ，查看待测菌株周围的 E.Coli 生长情况，（ 如果 存在明显条纹）表明存在 碳青霉烯类水解酶 PCR 选择该方法用于确认KPC,采购质量控制标准菌株, ATCC BAA-1708金黄色葡萄球菌标准株 ATCC BAA-1705和ATCC BAA-1706用改良的霍吉氏试验检测分别为阳性和阴性 新的氨苄西林、哌拉西林和替卡西林的质量控制用ATCC35218大肠杆菌标准株来检测。,肠杆菌科-新的头霉菌素折点,明年，新的敏感性折点可能从M