疟疾课件_3

疟疾的实验室诊断,消除疟疾目标,国家消除疟疾行动计划中提出全国到2020年实现消除疟疾目标 浙江省消除疟疾实施方案，到2012年，全市以县（市、区）为单位均无本地感染疟疾病例，2016年所有县（市、区）通过消除疟疾考核评估,宁波市流行县分类,二类县（5个）：江东区、鄞州区、余姚 市、奉化市、象山县 三类县（6个）：海曙区、江北区、镇海区、北仑区、慈溪市、宁海县,“发热”病人血检,对临床诊断为疟疾、疑似疟疾及不明原因发热患者采血涂片检查疟原虫 二类县年血检率不少于总人口的1% 三类县年血检率不少于总人口的2,采血的时间,适当的取血时间，一般是在患者发作数小时至十余小时,具体要求,镜检阳性和快速诊断试条（RDT）检测阳性者，保留血片和血样（滤纸血膜和抗凝血） 镜检阴性保留血片 各县（市、区）统一编号，统一玻片，玻片盒 血检凳记表使用浙江省疟疾发热病人血检凳记表,实验室诊断分类,病原学诊断：厚薄血膜染色镜检 血清学诊断 疟原虫抗原检测（快速诊断试剂盒RDT） 疟疾抗体检测（间接荧光抗体实验IFAT),病原学诊断,镜检疟原虫是确诊疟疾的最可靠的惟一方法 病原学检查就是直接在显微镜下镜检到疟原虫（小滋养体、大滋养体、裂殖体、配子体） 以检查厚血膜为主，薄血膜主要用于虫种鉴别,病原学诊断步骤,主要包括两个步骤 血片的制作和染色 血片的镜检,厚薄血膜的位置形状和大小,将玻片划成三分，厚血膜应位于靠右侧处，薄血膜从中间起至左格中部止。右端空格供记录姓名、编号或贴标签,厚血膜,血量为5立方毫米左右（一小滴），自内向外回转扩大，涂成直径0.8-1.0厘米大小,厚薄均匀血膜,薄血膜,薄血膜血量只需0.5-1.0立方毫米左右(约半颗粒大小），涂成舌状，长约3厘米，宽约2厘米,吉氏染液常规染色方法,将吉氏染液配成3%的稀释液（PH 6.87.2水97 ml + 3 ml吉氏液） 先用甲醇固定薄血膜，待干后用2-5%吉氏染液（常用3%），染色30-60分钟，中性水洗待干镜检 注意：此染色法影响观察的重点是PH值，经过我们实验室长时间的测试，PH值在6.9时效果最好,注意事项,薄血膜要用甲醇固定； 冲洗的时候要控制水量,以防血膜脱落 厚血膜自然干燥后要用火焰固定，否则容易脱落,瑞氏染色,与吉氏染色法区别： 瑞氏染液因为含甲醇浓度大，对血膜有直接固定作用，故染色前只需对厚血膜作溶血处理,制法,用蜡笔在厚薄血膜之间划一道界限，在厚血膜上加清水2-3滴溶去血红蛋白 在薄血膜上直接加约1ml瑞氏染液染色2分钟 然后在薄血膜上再加与染液等量的水稀释，将染液引到厚血膜上，使厚、薄血膜同时染色5-6分钟，水洗凉干,吉氏、瑞氏染色法的主要区别点,小滋养体（环状体）,大滋养体,裂殖体,雌配子体,雄配子体,薄血膜疟原虫特征,疟原虫均在红细胞内 疟原虫均有玫红色的核和蓝色的胞质 原虫的胞质有棕褐色疟色素颗粒,厚血膜中疟原虫的形态,厚血膜的血量多，红细胞重叠且干燥较慢，致使疟原虫皱缩，空泡消失，虫体变形，虫种和虫体鉴别比薄血膜困难 厚血膜鉴别是否疟原虫的要素是疟色素。因为它可以区别其它生物和杂质,涂片保存,已染色的标本注意防霉，干燥密封保存，会褪色 没染色的标本，厚血膜过夜后加蒸馏水溶血，薄血膜晾干后用甲醇固定,血清学诊断,斑点免疫层吸实验是一种快速诊断方法（RDT） 。本实验室现用的是疟疾抗原检测试剂盒，可以一步法快速检测恶性疟原虫/间日疟原虫抗原。他的特异性可达90%，敏感性可达89%，但其结果仅供参考 IFAT主要用于流行病学调查,在疟疾基本消灭地区(宁波)用于监测工作,用于寻找可疑的暴发点、病灶点和追查传染源等,结果解释,阴性 四种 间日疟 恶性疟 三日疟 卵形疟 恶性疟或 恶性疟与间日疟,C,pf,p,C,p,pf,C,