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文档简介
实验一检测生物组织中的糖类(可溶性还原糖)、脂肪和蛋白质题目:实验一 检测生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质。(鉴定)课时:1课时。教学目的:1、初步掌握生物组织中可溶性还原糖(鉴定)的检测方法。2、初步掌握生物组织中脂肪(鉴定)的检测方法。3、初步掌握生物组织中蛋白质的(鉴定)的检测方法。教学重点:1、初步掌握生物组织中可溶性还原糖(鉴定)的检测方法。2、初步掌握生物组织中脂肪(鉴定)的检测方法。3、初步掌握生物组织中蛋白质的(鉴定)的检测方法。教学难点:1、初步掌握生物组织中可溶性还原糖鉴定的方法。2、初步掌握生物组织中脂肪、蛋白质的鉴定的方法。3、初步掌握生物组织中蛋白质的鉴定的方法。教学方法:1、实验法。2、综合法。3、探究法。实验教具:1、实验用具:略。后面有。2、材料用具:略。后面有。实验提纲:略。实验反馈:感觉较好。实验作业:后面。实验引进:略。教学进程:后面。实验一检测生物组织中的糖类(可溶性还原糖)、脂肪、蛋白质(鉴定)郑州市第七中学 冯新宽 实验一:生物组织中的糖类(可溶性还原糖)、淀粉、脂肪、蛋白质的鉴定。(P18)一、实验原理:1、某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 可溶性糖中的还原性糖(如葡萄糖、果糖)(蔗糖无还原性)(有半缩醛羟基)与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色沉淀。化学反应式2、脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色。苏丹溶液+脂肪橘黄色脂肪可以被苏丹染液染成红色。苏丹溶液+脂肪红色3、淀粉遇碘液变成兰色。4、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应注:蛋白质分子中含有与双缩脲结构(H2NOC-NH-CONH2双缩脲)相似的肽键(CONH)与Cu2+作用形成紫色或紫红色的络合物。蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应。 蛋白质+双缩脲试剂A(质量浓度为0.1g/mL NaOH)+双缩脲试剂B(3-4滴质量浓度为0.01 g/mL.CuSO4溶液)Cu2O(紫色)(紫色络合物)。4、因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,鉴定生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的存在。二、目的要求:1、尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。2、初步掌握检测(鉴定)生物组织中可溶性还原性糖的基本方法。3、初步掌握检测(鉴定)淀粉的基本方法。4、初步掌握检测(鉴定)生物组织中脂肪的基本方法。5、初步掌握检测(鉴定)生物组织中蛋白质的基本方法。三、材料用具:1、实验材料做可溶性还原糖的检测(鉴定)实验,应该选择含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织。以苹果或梨的匀浆。检测(鉴定)淀粉用马铃薯匀浆。(苹果汁:用榨汁机)(提前榨好)花生种子、花生种子匀浆:(做脂肪的检测(鉴定)实验,应该选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好。花生种子实验前需要浸泡3-4h)(小时)。豆浆:做蛋白质的检测(鉴定)实验。用豆浆。可用浸泡12d(天)的黄豆种子或黄豆浆。(买黄豆浆最好) 鲜肝提取液: 双面刀片 试管(最好用刻度试管) 试管架 试管夹 大烧杯 小烧杯 小量筒 滴管 酒精灯 三脚架 石棉网 火柴 载波片 盖玻片 毛笔 吸水纸 显微镜 3、实验试剂:斐林试剂:(1)甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液。 NaOH: 130g KOH: 80g 酒石酸: 105g 蒸馏水; 50 (2)乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液。 CuSO4: 40g 蒸馏水; 300g (3)注:加入酒石酸、 KOH的目的是较稳定,可用二天时间,否则只能用一天。用时A+B才能混合在一起。苏丹.染液:(1)配方: 苏丹: 0.1g 95%酒精:20ml苏丹.染液: 1)配方: 苏丹: 3g 95%酒精: 100ml双缩脲试剂:(1)A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液。 NaOH: 50g 蒸馏水: 500g(2)B液:质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液。 CuSO4: 5g 蒸馏水; 500g注:先用A液,后用B液。体积分数为50%的酒精溶液。碘液。蒸馏水。四、实验方法步骤(一)实验材料、仪器和试剂的选择:1、每小组从老师提供的中选择一两种,2、预测其中含有哪些有机化合物,3、再选择所需要的仪器和试剂。(二)设计表格,记录预测实验结果:1、然后按照实验步骤进行检测,2、用“+”或“”记录实验结果:待测样品试剂还原糖脂肪蛋白质淀粉1、斐林试剂砖红色2、苏丹橘黄色3、苏丹红色4、双缩尿试剂紫色5、碘液蓝色(三)检测的方法步骤:1、可溶性还原糖的检测和观察:取1支试管,向试管内注入2ml待测的苹果(或梨)组织样液。向试管内注入1ml刚配置的斐林试剂。(甲乙液等量混合均匀后再注入)。将这支试管放进盛有5065温水的大烧杯中,加热约2min分钟。随时仔细观察试管中溶液的颜色变化(由兰色变为(砖红色)。(证明苹果中含有可溶性糖)鉴定苹果汁中有可溶性还原糖的图示:(三)、脂肪的检测和观察:A、方法一: 向待测花生种子组织样液中滴加3滴苏丹染液,观察样液被染色的情况。(橘黄色)B、方法二:制作花生子叶临时切片,用显微镜观察花生子叶细胞的着色情况:(以花生为例)1、取材:取一粒浸泡34小时的花生种子,去掉种皮。2、切片:用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿中,待用。(左手捏住花生子叶两端,右手用刀片将子叶削去一层,形成平面。再用刀片将花生种子子叶削成极薄的一片。)3、制片:从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取这极薄的一片,放在载玻片中央,在花生子叶薄片上滴23滴苏丹染液,染色3min(如果用苏丹染液,染色1min);用吸水纸吸去染液,再滴加12滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色;用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。(制作花生种子子叶临时装片的方法一:(1)将花生子叶薄片放在载波片上。(2)用滴管在花生子叶薄片上滴23滴苏丹染液。染色23分钟。(如果用苏丹染液,需要1分钟。)(3)用吸水纸吸去花生子叶薄片,在薄片上滴12滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色。(4).用吸水 纸吸去花生子叶薄片周围的酒精。在薄片上滴12滴蒸馏水,盖上盖玻片。)4、观察:先在低倍显微镜观察,找到花生种子子叶的最薄处,移到视野中央,将物象调节清楚;换高倍显微镜观察,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见。(细胞中的圆形、透亮的脂肪小颗粒。)5、图:(三)蛋白质的检测和观察:1、制备黄豆组织样液:买些黄豆浆。取一支试管,向试管内注入2ml待测组织样液(黄豆浆)。2、向试管中注入双缩脲试剂A 液1ml(0.1gml)。摇匀(振荡)。(有无颜色变化?)(无)。3、再向试管中注入双缩脲试剂B 液4滴(0.01gml CuSO4),摇匀(振荡)。4、观察:试管中出现的颜色变化?(有。兰紫色。)(证明黄豆中含有蛋白质。)(四)淀粉的检测和观察:1、将少量马铃薯研磨液(有淀粉)加入烧杯的清水中,加热煮沸,冷却后,倒入小试管中。2、将少量碘液滴入试管中,3、观察颜色变化:蓝色出现。(淀粉遇碘变蓝。)5、鉴定黄豆浆中有蛋白质的图示:(五)、实验结果和分析:生物组织样液化学试剂特定颜色反应证明某种化合物存在苹 果斐林试剂砖红色还原糖,葡萄糖、果糖花生种子苏丹橘黄色脂肪苏丹红色黄 豆双缩脲试剂紫色蛋白质(六)、探索性研究:1、含有可溶性糖的材料还有? 梨葡萄 西瓜 甜瓜2、含有蛋白质较多的还有?鸡蛋清3、含有脂肪较多的还有?芝麻。(七)、讨论:1、你的预测与实验结果是否一致?答案:一致。2、小组间交流实验结果。你有什么发现?答案:基本一致。3、全班共检验了多少种生物材料:这些生物材料中有机化合物的种类、含量一样吗?这对我们选择食物有什么启发?答案1:4种:苹果、马铃薯、花生、大豆。答案2:机化合物的种类机化合物的种类、含量不一定相同。答案3:吃食物要多样化。才能获得多种有机化合物。(八)、实验作业:1、鉴定可溶性还原糖存在时,必须将斐林试剂 A 和 B 混合均匀后使用,切勿 分别 加入苹果组织样液中。(A B 分别)2、用苏丹染液鉴定脂肪存在时,脂肪被染成 红 色。(红色) 3、向试管内加入2ml黄豆浆,接着先向试管内加入2ml双缩脲试剂 A ,振荡后溶液的颜色为 无色 ,在向试管内加入34滴双缩脲试剂 B ,震荡均匀后,试管内溶液呈 紫色 。(A 无色 B 紫色)复习巩固:一、选择填空:1、生物组织中的还原糖、脂肪、蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是 ( A )(2005.广东)A.可溶性还原糖的鉴定,可以用酒精灯直接加热产生砖红色的沉淀。(不可以。应水浴加热。)B.只有脂肪的鉴定需要使用显微镜。(正确。)C.用双缩尿试剂检测蛋白质不需要加热。(正确。)D.使用斐林试剂和双缩尿试剂最好是现配现用。(正确。)2、在鉴定还原糖的实验中,加入斐林试剂时应 ( C )A.先加入斐林试剂甲液,后加入斐林试剂乙液。(错。)B.先加入斐林试剂乙液,后加入斐林试剂甲液。(错。)高中生物1(必修)第2章第1节实验一糖类、脂肪、蛋白质的检测教案共12页 第10页C.将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加。(对。才能生成Cu(OH)2蓝色沉淀)D.A、B、C三项操作方法都正确。(错。)3、用不同的化学试剂可以鉴定某种物质的存在。在植物和动物体内,存在着许多物质,用斐林试剂可以鉴定还原糖(葡萄糖、麦芽糖)的存在,用双缩尿试剂可以鉴定蛋白质的存在。医学上,可以用这种试剂检验尿液以进行疾病诊断。请分析这两种试剂能够诊断的疾病应该是 ( C )A.糖尿病、肠炎。 B.胃炎、肾炎。C.糖尿病、肾炎。 D.胃炎、肠炎。(糖尿病尿中有葡萄糖。肾炎尿中有大分子蛋白质。)4、检验苹果中是否有还原糖,可选用的试剂是 ( D )(2004.辽宁)A.碘液 B.苏丹染液C.双缩尿试剂 D.斐林试剂(有麦芽糖、葡萄糖、果糖)5、在过氧化氢酶溶液中加入双缩尿试剂,其结果应该是 ( C ) (2003.全国)(过氧化氢酶是蛋白质。)A.产生气泡 B.溶液呈蓝色C.溶液呈紫色 D.产生砖红色沉淀6、将面团包在纱布中放在清水中揉搓,请你选用试剂检测粘留在纱布上的粘稠物质和洗出的白浆物质,所用试剂分别是 ( B )A.碘液、苏丹染液 B.双缩尿试剂、碘液C.亚甲基蓝溶液、苏丹染液 D.碘液、斐林试剂(粘稠物质是蛋白质。洗出的白浆物质是淀粉。)高中生物第一册(必修)实验一糖、脂肪、蛋白质的鉴定教案共10页 第11页7、下列物质中,能被苏丹染液染成红色的是 ( B )A.马铃薯块茎(淀粉) B.浸软的蓖麻种子(含有较多的脂肪)C.蛋清夜 (蛋白质) D.苹果(还原糖)8、某学生在显微镜下观察落花生子叶的切片,当转动细准焦螺旋时,有一部分细胞看得清晰,另一部分较模糊,这是由于 ( B )A.反光镜未调节好 B.标本切得厚薄不均C.细准焦螺旋未调节好 D.显微镜物镜损坏9、在生物学实验中,关于引流法的叙述正确的是 ( B )A.在盖玻片一测滴加试剂,然后将装片倾斜。(不能倾斜。)B.引流目的是让试剂渗到盖玻片下。(对。)C.还原性糖鉴定实验中需要用引流法。(不需要。)D.引流法可以防止装片中产生气泡。(无关。)高中生物1(必修)第2章第1节实验一糖类、脂肪、蛋白质的检测教案共12页 第11页10、下列有关生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验的叙述不正确的是 ( B )A.双缩尿试剂A液是为反应提供碱性环境。(对。NaOH。)B.在花生子叶薄片上滴加50%酒精是为了溶解组织中的油脂。(不是。溶解多余的苏丹染液。洗去浮色。再用细水纸吸去。)C.所有的蛋白质均可以与双缩尿试剂发生颜色反应。(对。)D.所有的多肽均可以与双缩尿试剂发生颜色反应。(对。)11、对斐林试剂和双缩尿试剂的配方,叙述不正确的是 ( C )A.都含有NaOH溶液和CuSO4溶液。(对。)B.斐林试剂的配制是将45滴0.05g.mL-1的CuSO4溶液滴入2mL0.1g.mL-1的NaOH溶液中即成。(对。先混合。)C.双缩尿试剂是将34滴0.01g.mL-1的CuSO4溶液滴入2mL0.1g.mL-1的NaOH溶液中混合而成的。(不混合。先加入2mL0.1g.mL-1的NaOH溶液,再一滴一滴滴入0.01g.mL-1的CuSO4溶液)D.双缩尿试剂含有两种试剂,质量浓度为0.1g.mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.01g.mL-1的CuSO4溶液。(对。)12、鉴定苹果白色果肉中含有葡萄糖或果糖等可溶性糖中的还原糖,是将其与某一试剂作用,产生特定的颜色反应。能证明还原糖存在的情况是 ( A )A.与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。(对。)B.被苏丹染液染成橘红色。(脂肪。)C.与双缩尿试剂发生作用,可以产生紫色反应。(蛋白质。)D.被苏丹染液染成红色。(脂肪。)13、下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是
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