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2019/4/26,1,医学微生物学,多媒体教学课件 本科课程 病原生物学教研室 管俊昌,Medical Microbiology,2019/4/26,2,细 菌 学 各 论,第9 章 球 菌 第10章 肠杆菌科 第11章 弧菌属 第13章 厌氧性细菌 第14章 分枝杆菌属 第17章 其它细菌-棒状杆菌属,2019/4/26,3,第十章 肠杆菌科,肠杆菌科的共同特征 第一节 埃希菌属 第二节 志贺菌属 第三节 沙门菌属 第四节 其它肠道杆菌(简述),2019/4/26,4,肠杆菌科概述,概念:生物学性状相近的革兰阴性杆菌 分布:肠道及其它 种类：繁多，有44个属、170多个种 致病性,致病菌 机会致病菌 正常菌群转为的致病菌,2019/4/26,5,肠杆菌科细菌的共同特征,大肠杆菌1000,G-中等大小杆菌 大多有菌毛 多有鞭毛(志贺菌属除外) 少数有荚膜 无芽胞,1. 形态与结构,2. 培养特性 营养要求不高 菌落特点相似，无鉴别意义,2019/4/26,6,鉴定中最重要的生化反应,乳糖发酵试验,肠道非致病菌（埃希菌属） 发酵乳糖产酸产气,肠道致病菌（志贺菌属、 沙门菌属等）不发酵乳糖,3. 生化反应 十分活泼 能分解多种糖类及蛋白质 鉴定肠道杆菌的重要依据,2019/4/26,7,4. 抗原构造复杂,2019/4/26,8,菌体抗原 O抗原 特异性多糖，具种特异性 细菌S-R变异，致病性明显降低,2019/4/26,9,H抗原鞭毛抗原 蛋白质, 失去鞭毛为H-O变异 包膜抗原-如K抗原、Vi抗原 O抗原外侧,可阻遏O抗原的凝集 菌毛抗原 可干扰 O 凝集，加热后即可破坏,2019/4/26,10,5.抵抗力 较弱 加热60 30分钟 化学消毒剂敏感 胆盐、煌绿等染料抑制非致病菌,6.变异性 易变异 可经基因转移和重组造成,2019/4/26,11,第一节 埃希菌属,埃希菌属 (Escherichia) 有6个种，众多型别 大肠埃希菌（ 大肠杆菌 E.coli ） 肠道内正常菌群（非致病性大肠杆菌） 少数血清型为致病菌 食品卫生检测指标,概 述,12,一、生物学性状,形态与染色,大肠埃希菌 1000,培养特性,抗原性 O抗原 170多种 H抗原 50种 K抗原 100种 鉴定后大肠杆菌血清型命名为： O：K：H 如 O157:K58:H7,2019/4/26,13,（一）致病物质,二、 致病性,1.黏附素（adhesin） CFA,AAF,Bfp,紧密粘附素,P菌毛 I型菌毛和侵袭质粒抗原蛋白等 2.外毒素 Stx-1,Stx-2, ST-a,ST-b,LT-,LT- 3.内毒素、荚膜、载铁蛋白 型分泌系统等,2019/4/26,14,(二)所致疾病,1.肠道外感染 （内源性感染） 正常菌群 条件致病 化脓性感染:腹膜炎,阑尾炎等 泌尿道感染(UPEC),2. 肠胃炎（外源性感染） 致病性大肠杆菌（某些血清型） ETEC EIEC EPEC EHEC EAEC,2019/4/26,15,致病物质 1、定植因子 CFA、 2、肠毒素,LT 6530分钟失活,ST 10020分钟不失活, 肠产毒性大肠杆菌 ETEC,临床表现- 旅游者腹泻、婴幼儿腹泻 从轻度至严重的霍乱样腹泻不等,致病性大肠杆菌的致腹泻机理,2019/4/26,16,LT化学结构与功能,腹泻,腺苷环化酶,H2O CI- Na+大量分泌,腹泻,与霍乱弧菌肠毒素有80%同源性,腹泻,2019/4/26,17,ST 组成及功能,毒性中心,鸟苷酸环化酶,cGMP,腹泻,腹泻,腹泻,水电解质平衡率乱,与霍乱弧菌肠毒素间无同源性,2019/4/26,18, 肠侵袭性大肠杆菌 EIEC 临床疾病-侵犯较大儿童与成人结肠粘膜 痢疾样腹泻，脓血便、里急后重 主要致病因素-内毒素 侵袭性质粒,本菌无动力，易与志贺菌混淆，应注意鉴别！,2019/4/26,19, 肠致病性大肠杆菌 EPEC 所致疾病- 婴幼儿腹泻（重者可致死） 致病因素 Bfp粘附小肠上皮细胞 型分泌系统介导作用 破坏刷状缘、微绒毛萎缩变平即A/E损伤 上皮细胞功能受损，导致严重腹泻,2019/4/26,20, 肠出血性大肠杆菌 EHEC 主要疾病 出血性结肠炎：剧烈腹痛血便可流行 溶血性尿毒综合征：死亡率较高 主要血清型-O157：H7，牛为宿主 致病因子 菌毛-粘附回肠未端、盲肠、结肠上皮细胞 内毒素、溶血素 志贺样毒素(SLT):SLT-或即Vero毒素,2019/4/26,21,60S,裂解,蛋白质合成,SLT化学结构与功能,2019/4/26,22, 肠集聚型大肠杆菌 EAEC 主要疾病-引起婴儿持续性腹泻 致病因子- AAF/,AAF/ Bfp 肠集聚耐热毒素（类似ST）,2019/4/26,23,第二节 志贺菌属 (Shigella),通称痢疾杆菌（dysentery bacteria) 引起疾病 细菌性痢疾,2019/4/26,24,一、 生物学性状,形态染色 - 无鞭毛 生化反应 - 葡萄糖 + 乳 糖 ,动力,动力+,2019/4/26,25,各群中又分为不同型、亚型,我国以福氏、宋内氏流行多见,抗原分类-O抗原 A群：痢疾志贺菌 B群：福氏志贺菌 C群：鲍氏志贺菌 D群：宋内志贺菌,2019/4/26,26,二、致病性,（一）致病物质 侵袭力、内毒素，少数菌株产生外毒素,菌毛,穿入回肠未端、 结肠粘膜上皮细胞,粘膜固有层上皮细胞内增殖、炎症,1、侵袭力,型分泌系统,M细胞,Ipa,粘附,2019/4/26,27,2、内毒素,内毒素,全身表现：内毒素血症、 发烧、神志障碍、 严重者中毒性休克,破坏局部粘膜,加重坏死及溃疡形成 刺激肠壁植物神经-功能紊乱,典型痢疾症状 脓血粘液便、腹痛、 里急后重等,内毒素是志贺菌致病的主要因素,仅肠道内增殖，不侵入血流 内毒素引起典型痢疾症状,2019/4/26,28,A群志贺菌及型菌株产生 志贺毒素 (Shiga toxin) 生物学活性 神经毒性-引起实验动物麻痹、死亡 细胞毒性对多种细胞有致病变作用 肠毒素样作用-类似EHEC的毒素引起腹泻,3、外毒素,2019/4/26,29,(二) 所致疾病,细菌性痢疾 -夏秋季节肠道传染病 传染病流行三环节 传染源- 病人、带菌者（尤为重要！） 传播途径-粪口途径 易感者- 人类普遍易感,且敏感性较高 少量菌体即可致病 潜伏期 1-3天,2019/4/26,30,病程表现： 急性菌痢 症状典型，预后较好 慢性菌痢 治疗不彻底者，症状不典型 慢性带菌者是重要传染源 中毒性菌痢 小儿多见，可无消化道症状 表现为中毒性休克，死亡率高,2019/4/26,31,第三节 沙门菌属,Salmonella 寄生于人、动物肠道中 种类繁多（抗原型别多样） 主要致病菌 伤寒杆菌、副甲、肖氏和希氏沙门菌 引起伤寒病和副伤寒病 其它沙门菌 对动物致病 人类食物中毒/败血症,2019/4/26,32,一、 生物学性状,(一) 形态与染色 同其它肠道杆菌 有鞭毛 动力+,沙门菌 1000,(二) 生化反应 不发酵乳糖 大部分菌株产生H2S 葡萄糖发酵情况可有差异,2019/4/26,33,主要沙门菌的生化特性, 菌 名 动力 葡萄糖 乳糖 H2S 伤寒沙门菌 + + -/+ 副伤寒甲 + + -/+ 肖氏沙门菌 + + + 希氏沙门菌 + + + ,2019/4/26,34,(三) 抗原结构（O抗原、H抗原、Vi抗原）,1、 “O”抗原- 耐热菌体抗原 阿拉伯数字表示（从167） 将有共同O抗原沙门菌归一群（组） 分40多组 引起人类疾病的沙门菌 大多属于AE组,2019/4/26,35,O抗原-抗原性,产生早、消退早-早期诊断,共同抗原刺激产生-无特异性,不易产生非特异性回忆反应,O抗原刺激机体产生抗体- IgM,2019/4/26,36,2、 “H”抗原- 鞭毛抗原 分2 相 第 1 相特异性高，以英文小写字母表示 第 2 相特异性低，以阿拉伯数字表示 各组沙门菌可依H抗原不同分种、型， H 抗原为特异性抗原 化学本质为蛋白质，不耐热,2019/4/26,37,出现较晚，维持时间较长,特 异 性 强,易受非特异性刺激产生回忆反应,H抗原刺激机体产生抗体-IgG,H抗原-抗原性,2019/4/26,38,3、表面抗原,Vi抗原-毒力 存在：少数沙门菌新分离标本 不稳定：60加热，或传代 阻断O抗原与其抗体的凝集 在细菌鉴定中应予注意,2019/4/26,39,二、致病性,Vi抗原微荚膜功能 沙门菌致病性岛（SPI） 沙门菌分泌侵袭蛋白质（Sips） 侵袭过程 粘附 M细胞 巨噬细胞 邻近淋巴组织扩散,致病物质,1、侵袭力,2019/4/26,40,2、内毒素 体温升高、白细胞数变化、中毒症状等 激活补体加重局部炎症反应,3、肠毒素 产生：鼠伤寒、猪霍乱及肠炎沙门菌 作用：类似LT，引起胃肠炎,2019/4/26,41,传染病传播三环节 传染源 病人、带菌者（尤为重要） 传播途径 经粪-口途径传播 易感者 人群普遍易感,所致疾病,1、肠热症-伤寒、副伤寒,伤寒沙门菌 甲型副伤寒、肖氏及希氏沙门菌 肠道传染病,2019/4/26,42,血流（菌血症、内毒素）,全身淋巴组织中大量增殖 （肝、脾、肠系膜）,伤寒、 副伤寒沙门菌,肠粘膜局部淋巴组织中增殖,局部炎症、症状,加重局部炎症 溃疡、穿孔,全身症状 发热、不适、全身疼痛,加重局部炎症 溃疡、穿孔,加重局部炎症 溃疡、穿孔,肠热症致病过程及临床表现,细胞免疫增强,逐步痊愈,2019/4/26,43,病后免疫 细胞免疫为主，较强持久可至终身 体液免疫为辅，但可辅助诊断 肥达氏反应,2019/4/26,44,其它沙门菌污染食物引起 潜伏期 6-12小时 表现 恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热,2、胃肠炎（食物中毒）,3、败血症,多见小儿及免疫功能低下者 其它沙门菌（猪霍乱、鼠伤寒等）引起 表现：全身至局部感染 局部胃肠炎少见,2019/4/26,45,变形杆菌属（简述）,变形杆菌属肠杆菌科 有周身鞭毛，运动活泼，培养基中迁徒生长 能分解尿素（重要特征） 主要引起各种创伤感染、尿路感染等,变形杆菌的迁徒生长现象,2019/4/26,46,变形杆菌某些菌株的菌体抗原，与部分立克次体间有共同抗原成分。因此可用变形杆菌作为抗原与立克次体感染者血清做交叉凝集反应，称外裴试验（Weil-Felix test) 辅助诊断斑疹伤寒等疾病,外裴试验,2019/4/26,47,三、微生物学检查,（一）细菌分离培养 据可疑病变选取不同的标本 接种至肠道鉴别选择培养基(SS、中国兰)中, 肠道杆菌分离鉴定步骤,2019/4/26,48,基础培养基 乳糖+指示剂 抑制剂,SS平板,中国兰平板,肠道鉴别选择培养基成分,2019/4/26,49,挑选可疑菌落进行下一步鉴定,SS培养基,中国兰培养基,发酵乳糖菌落,大肠杆菌,不发酵乳糖菌落,肠道致病菌,2019/4/26,50,（二） 生化反应,常用培养基-双糖铁试管,观察指标：葡萄糖、乳糖发酵、H2S、动力,固体斜面：乳糖+指示剂,半固体：葡萄糖+指示剂+FeSO4,2019/4/26,51,肠道杆菌在双糖铁培养基中表现,大肠 杆菌,痢疾 杆菌,动力为要点！,伤寒 杆菌,记录：大肠 痢疾 伤寒 葡萄糖 + + +/ + 乳糖 + 动力 + + H2S +/,2019/4/26,52,三、血清学鉴定 根据生化反应的初步鉴定结果，选用相应菌的血清作血清学鉴定,尚可选用免疫酶标或基因探针等方法进行鉴定,2019/4/26,53, 水、食品中大肠杆菌检查 意义- 饮用水、饮料、食品中是否有肠道致病菌污染的指标 指标- 大肠菌群数 大肠菌群:发酵乳糖产酸产气的肠杆菌 饮用水 3个/1000ml 瓶装汽水、果汁 5个/100ml,2019/4/26,54,用已知的伤寒杆菌“O” 、“H”抗原及副伤寒甲、乙的“H”抗原与不同稀释度的病人血清作试管凝集试验 根据血清中抗体效价及动态变化，可作为伤寒、副伤寒病人的辅助诊断试验,血清学试验 肥达反应（Widal test),概念,2019/4/26,55,四、防治原则, 预防接种：死菌苗、活菌苗, 彻底治疗病人及带菌者, 注意饮食卫生，防止病从口入,2019/4/26,56,Escherichia enterotoxigenic E.coli,ETEC enteroinvasive E.coli, EIEC en