石斛组培瓶苗移栽技术.doc

石斛组培瓶苗移栽技术石斛组培瓶苗移栽技术是怎样的？石斛自然繁殖立极低,生长缓慢加上人为掠夺性采挖,野生资源已严重枯竭。为提高繁殖系数,减少资源消耗, 石斛组培瓶苗移栽技术技术,其中“炼苗”是石斛组培瓶苗全过程中的重要环节,把握不好会直接影响组培苗的成活率。铁皮石斛又称黑节草，属兰科石斛属，是一种珍贵的野生药用植物。其有效成分主要为石斛多糖、石斛碱、氨基酸等，其中石斛多糖含量高达21.7%，能显著提高机体免疫功能，具有养胃出津、补肾益力、滋阴清热、耐缺氧、抗疲劳、抗肿瘤等功效。现代药理学研究发现，石斛还具有抗衰老和扩张血管的作用。 铁皮石斛喜荫凉、湿润的环境，常附在高海拔悬崖峭壁或林内树干和岩石缝隙中。由于其药用价值高、生长条件特殊和分布受局限，且经长期人为采挖，野生资源濒临灭绝，因而国内市场供应紧缺，国际市场每公斤干品价已达1000美元以上。 铁皮石斛自然繁殖率极低，通过组织培养快速大量繁殖铁皮石斛组培苗成为解决种苗问题的有效途径。虽然铁皮石斛组培苗移栽方面的相关报告很多，笔者也才曾按照这些报告去操作，但移栽成活率最多只有60%，且操作麻烦，不能从根本上解决成活率低的问题。笔者认为主要原因是不易满足铁皮石斛组培苗生长环境的特殊要求，尤其是水分和透气两方面因素不易控制，稍一操作不当，就易死苗。笔者的研究表明，通过搭建高架种植畦来移栽铁皮石斛组培苗，非常简单地解决了以上难题。因在高架畦上种植铁皮石斛组培苗，可以随时喷雾浇水，随时排走多余水分，不会因为水分太多而造成烂根死苗，而且能保证根系通风透气，因而移栽成活率大大提高，能达到95%以上。这一技术为大面积人工栽培铁皮石斛提供了可靠的技术依据。 无菌播种及培养在无菌条件下,将蒴果从中间切成两段,然后用镊子夹住蒴果果皮将种子均匀撒播于萌芽培养基中进行培养。待长出具有23片真叶的无菌种子苗时,转接增殖培养基上进行培养,60 d后,每株小苗可形成37个侧芽。将增殖苗培养基中高约2 cm左右的正常小苗接种于成苗培养基上进行培养。60 d后小苗高约4 cm左右,叶展,浅绿色,茎增粗,根系发达。 把健壮成苗转接于壮苗培养基中进行培养至苗高38 cm,36片叶,叶的大小为(13)cm(0.31) cm,苗色为浅黄绿色,茎韧性增加,根系发达,长13 cm,为白色或浅绿色,并附有大量的白色根毛时可出瓶炼苗。炼苗 1. 选地选择四周开阔,通风透气性好,水源充裕,交通、电力设施方便的地方建立遮阴大棚。 炼苗大棚荫蔽度试管苗对荫蔽度要求较高,过强的光照会灼伤试管苗娇嫩的叶片,从而使小苗叶片枯萎,脱落,影响成活及生长。适宜荫蔽度为70%80%。2.苗床及炼苗基质苗床制作:苗床以离地面高80cm为宜。苗床宽120cm左右,长可根据苗圃地情况确定。苗床用筛网作基质的衬底。炼苗基质:基质应选透气、保湿性较好的材料,树皮+树皮屑或甘蔗渣+陶粒混合或刨花等。基质在使用前进行高温或药物消毒处理。基质pH值以呈微酸至中性为宜。3. 清洗先将培养容器置于自然条件下培养7 d左右,然后开盖,再放3 d左右,用镊子或筷子轻轻取出幼苗,用自来水将根系上的琼脂冲冼干净,用0.01%高锰酸钾或0.1%多菌灵等杀菌剂浸泡35 min,稍微晾干后栽入已准备好的基质中。 4. 温湿度温度对金钗石斛试管苗移栽成活率有一定影响,金钗石斛炼苗适宜温度为1430,当最低平均温度低于14时,试管苗的根恢复慢或不生长,当最高平均温度高于30时,组培苗生长受抑制。 5. 金钗石斛对水湿条件要求甚严。当空气湿度在65%70%时,要加强基质水分管理,浇水2次/d,保持基质含水量在40%60%为宜。当空气湿度在75%85%时,要严格控制基质水分,注意防雨,当空气湿度大于85%时,尽量减少炼苗或不炼苗。 6. 管理试管苗移栽10 d左右就会有新根长出,这时,移栽成活的试管苗可薄施复合肥,或施用1/2MS营养液进行根外追肥,促进小苗生长。待移栽46周后,可用0.1%的磷酸二氢钾和尿素混合溶液作根外追肥,一般每隔710 d喷施1次。病虫害以预防为主,每7 d进行1次苗外即苗床底部喷施杀虫剂,每15 d进行1次苗上喷施杀虫剂和杀菌剂混合液。3个月后,苗高约10 cm,茎的中上部开始变粗,出现小鼓状,新根已达到28 cm,此时则可出圃种植。炼苗6个月以上的试管苗,仿野生栽培成活率可达90%以上。利用生物技术进行金钗石斛的有性繁殖,虽然成本较高,但能在短时间内获得大量的种苗,是目前应用于集约化种苗生产的主要手段之一。石斛的栽培养护 石斛的栽培需用泥炭苔藓、蕨根、树皮块和木炭等轻型、排水好、透气的基质。同时,盆底多垫瓦片或碎砖屑,以利于根系发育。栽培场所必须光照充足,对石斛生长、开花更加有利。春、夏季生长期,应充分浇水,使假球茎生长加快。9月以后逐渐减少浇水,使假球茎逐趋成熟,能促进开花。生长期每旬施肥1次,秋季施肥减少,到假球茎成熟期和冬季休眠期,则完全停止施肥。栽培23年以上的石斛,植株拥挤,根系满盆,盆栽材料已腐烂,应及时更换。无论常绿类或是落叶类石斛,均在花后换盆。换盆时要少伤根部,否则遇低温叶片会黄化脱落。常用分株、扦插和组培繁殖。 分株繁殖 春季结合换盆进行。将生长密集的母株,从盆内托出,少伤根叶,把兰苗轻轻掰开,选用34株栽15厘米盆,有利于成型和开花。 扦插繁殖 选择未开花而生长充实的假鳞茎、从根际剪下,再切成每23节一段,直接插入泥炭苔藓中或用水苔包扎插条基部,保持湿润,室温在1822,插后3040天可生根。待根长35厘米盆栽。 组培繁殖 常以茎尖、叶尖为外植体,在附加2,4-D0.150.5毫克/升、6-苄氨基腺嘌呤0.5毫克/升的MS培养基上,其分化率可达1:10左右。分化的幼芽转至含有活性炭。椰乳的MS培养基中(附加2,4-D和6-苄氨基腺嘌呤各0.1毫克/升),即能正常生长,形成无根幼苗,将幼苗转入含有吲哚丁酸0.20 .4毫克/升的MS培养基中,能够诱导生根,形成具有根、茎、叶的完整小植株。 石斛为兰科石斛属多年生附生草木,主要分布在四川、贵州、云南、广东、广西、台湾等省(区)。其以茎入药,是传统名贵药用植物,具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、明目强身等功效。现代药理研究表面,石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、扩张血管及抗血小板凝集等作用。因此,石斛在临床