植物全氮磷钾的测定1.docVIP

植物氮、磷、钾全量分析植物中氮、磷、钾测定包括待测液制备和氮、磷、钾定量2大步骤。1植物全氮、磷、钾含量测定待测液制备（ H2SO4+H2O2消煮法）1.1适用范围： 本方法不包括硝态氮的植物全氮测定，适合于含硝态氮低的植物样品的测定。1.2方法提要植物中的氮、磷大多数以有机态存在，钾以离子态存在。样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮，有机物被氧化分解，有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐，钾也全部释出。消煮液经定容后，可用于氮、磷、钾等元素的定量。采用H2O2为加速消煮的氧化剂，不仅操作手续简单快速，对氮、磷、钾的定量没有于扰，而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度。但要注意遵照操作规程的要求操作，防止有机氮被氧化成N2气或氮的氧化物而损失。1.3试剂1.3.1硫酸(化学钝，比重1.84)； +1.3.2 30H2O2 (分析纯)。1.4主要仪器设备1.4.1消煮炉1.5 操作步骤称取植物样品(0.5mm)03 g 05g（称准至00002g）装入100mL开氏瓶或消煮管的底部，加浓H2SO4 5mL，摇匀，放置过夜。第二天在电炉或消煮炉上先小火加热，待H2SO4发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加10滴H2O2，再加热至微沸，消煮约710min，稍冷后重复加H2O2，再消煮。如此重复数次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热约10min，除去剩余的H2O2。取下冷却。用水将消煮液无损地转移入100mL容量瓶中，冷却至室温后定容(V1)。用无磷钾的干滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。每批消煮的同时，进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。1.注意事项1.6.1所用的H2O2应不含氮和磷。H2O2在保存中可能自动分解，加热和光照能促使其分解，故应保存于阴凉处。在H2O2中加入少量H2SO4酸化，可防止H2O2分解。1.6.2 称样量决定于NPK含量，健状茎叶称05g，种子03g，老熟茎叫可称1g，若新鲜茎叶样，可按干样的5倍称样。称样量大时，可适当增加浓H2SO4用量。1.6.3 加H2O2时应直接滴入瓶底液中，如滴在瓶颈内壁上，将不起氧化作用，若遗留下来还会影响磷的显色。2 植物全氮测定半微量蒸馏法2.1 适用范围：适合于各种植物样品消煮液中氮的定量。2.2 方法原理：植物样品经开氏消煮、定容后，吸取部分消煮液碱化，使铵盐转变成氨，经蒸馏，用H3BO3吸收，硼酸中吸收的氨可直接用标准酸滴定，以甲基红溴甲酚绿混合指示剂指示终点。2.3试剂2.3.1 NaOH溶液：400gL。2.3.2 H3BO3指示剂溶液：20g L。2.3.3酸标准溶液(c(HCI或12 H2SO4)：0.01molL。标定见HG/T 2843.2.4仪器设备2.4.1蒸馏装置或半自动蒸馏仪。2.5蒸馏: 检查蒸馏装置是否漏气和管道是否洁净后，打开蒸馏仪开关，空蒸30分钟。准确吸取定容后的消煮液5.0010.00mL(V2，含NH4-N约1mg)，注入半微量蒸馏器的消化管内。另取150mL三角瓶，内加5mL 2H3BO3，指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于H3BO3液面以上34cm处，然后向蒸馏器内慢慢加入约3mL 400gLNaOH溶液，通入蒸气蒸馏(注意开放冷凝水，勿使馏出液的温度超过40C)。待馏出液体积约达5060mL时，停止蒸馏，用少量已调节至P4.5的水冲洗冷凝管末端。用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色(终点的颜色应和空白测定的滴定终点相同)。与此同时进行空白测定的蒸馏、滴定，以校正试剂和滴定误差。2.6结果计算 全(N)，=c (HCl)X (VV0)X0.014XDXl00m； 式中：c (HCl)酸标准溶液的浓度，molL； V滴定试样所用的酸标准液体积，mL； V0滴定空白所用的酸标准液，mL： 0.014N的摩尔质量，kgmol； m称样量，g： D分取倍数(即消煮液定容体积V1吸取测定的体积V2)。3 植物全磷的测定（钒钼黄吸光光度法）3.1适用范围：适合于含磷量较高的植物样品的测定(如籽粒样品)。3.2方法原理： 植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸，其吸光度与磷浓度成正比，可在波长400490nm处用吸光光度法测定。磷浓度较高时选用较长的波长，较低时选用较短波长。 此法的优点是操作简便，可在室温下显色，黄色稳定。在HNO3、HCIO4，和H2SO4等介质中都适用，对酸度和显色剂浓度的要求也不十分严格，干扰物少。在可见光范围内灵敏度较低，适测范围广(约为120mgL P)，故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和 肥料样品中磷的测定。3.3试剂3.3.1钒钼酸铵溶液：25.0g钼酸铵(NH4)6Mo7O2.4H2O，分析纯)溶于400mL水中，必要时可适当加热，但温度不得超过60。另将1.25g偏钒酸铵(NH4VO3，分析纯)溶于300mL沸水中，冷却后加入250mL浓HNO3（分析纯）。将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵溶液中，不断搅匀，最后加水稀释至1L，贮于棕色瓶中。3.3.2 NaOH溶液(c=6 molL)：24g NaOH溶于水，稀释至100mL。3.3.3二硝基酚指示剂(p=2 g/L)：0.2 g 2,6-二硝基酚或2.4-二硝基酚溶于100 mL水中。3.3.4磷标准溶液(P=50mgL)：0.2195g (干燥的KH2PO4(分析纯)溶于水，加入5mL 浓HNO3，于1 L容量瓶中定容。3.4主要仪器设备3.4.1分光光度计。3.5分析步骤 准确吸取定容、过滤或澄清后的消煮液520mL(V2：，含P 0.050,75mg)放入50 mL容量瓶中，加2滴二硝基酚指示剂，滴加6molL NaOH中和至刚呈黄色，加入10.00 mL钒钼酸铵试剂，用水定容(V3)。15min后，用1cm光径的比色槽在波长440nm处进行测定，以空白溶液(空白试验消煮液按上述步骤显色)，调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程：准确吸取50mgLP标准液0，1，2.5，7.5，10，15mL分别放入50mL容量瓶中，按上述步骤显色，即得0，1.0，2.5，5.0，7.5，10，15mgL P的标准系列溶液，与待测液一起进行测定，读取吸光度。然后绘制校准曲线或求直线回归方程。.结果计算 全 ()，= P XV X （V3V2）)X10-4m； 式中： P从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度，mgL： V消煮液定容体积，mL； V2吸取测定的消煮液体积，mL； ， V3显色液体积，mL： m称样量，： 10-4将mgL浓度单位换算为百分含量的换算因数。3.7注意事项3.7.1显色液中P15mgL时，测定波长用420nm；520mgL，用490nm。待测液中Fe+浓度高应选用450nm，以清除Fe+干扰。校准曲线也应用同样波长测定绘制。3.7.2一般室温下，温度对显色影响不大，但室温太低(如15)时，需显色30min。稳定时间可达24 h。3.7.3如试液为HCI、HClO4介质，显色剂应用HCl配制；试液为H2SO4介质，显色剂也用H2SO4配制。显色液酸的适宜浓度范围为0.21.6molL，最好是0.51.0 molL。酸度高显色慢且不完全，甚至不显色：低于0.2moIL易产生沉淀物，干扰测定。钼酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为1.6X10-310-2molL，钒酸盐为8X10-5一2.2X10-3molL。3.7.4此法干扰离子少。主要干扰离子是铁，当显色液中Fe3+浓度超过0.1时，它的黄色有干扰，可用扣除空白消除。 植物全磷的测定（钼锑抗吸光光度法）4.1适用范围：适合于含磷量较低的植物样品的测定(如茎秆样品等)。4.2方法提要：植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下，待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸，后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络台物，可用吸光光度法测定。4.3试剂4.3.1 6 molL NaOH溶液4.3.2 0.2 二硝基酚指示剂4.3.3 2 molL (12 H2SO4)硫酸溶液：5.6mL浓H2SO4，加水至100mL。4.3.4 钼锑贮存液：浓H2SO4(分析纯)126mL缓慢地注入约400mL水中，搅拌，冷却。10.0g鉬酸铵(分析纯)溶解于约60的300mL水中，冷却。然后将H2SO4溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入100mL 0.5酒石酸锑钾（KSbOC4O612H2O,分析纯）溶液，最后用水稀释至1L，避光贮存。此贮存液含钼酸铵为l，酸浓度为c(12 H2SO4)=4.5molL。4.3.5钼锑抗显色剂：1.50g抗坏血酸(C6H8O6，左旋，旋光度+21一+22，分析纯)溶于100mL钼锑贮存液中。此液须随配随用，有效期一天，冰箱中存放，可用35天。4.3.6磷标准工作液(P)=5mgL：吸取100rngL P标准贮存液稀释20倍，即为5mgL P标准工作溶液，此溶液不宜久存。.主要仪器设备： 同上。.分析步骤 吸取定容过滤或澄清后的消煮液2.005.00mL(V2，含P 530ug)于50 mL容量瓶中，用水稀释至约30mL，加l-2滴二硝基酚指示剂，滴加6molL NaOH溶液中和至刚呈黄色，再加入1滴2molL(12 H2SO4)溶液，使溶液的黄色刚刚褪去，然后加入钼锑抗显色剂 5.00mL，摇匀，用水定容(V3)。在室温高于15的条件下放置30min后，用lcm光径比色槽在波长700nm处测定吸光度，以空白溶液为参比调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程：准确吸取 (P) =5 mg/L标准工作溶液0，1，2，4，6，8 mL，分别放入50 mL容量瓶中，加水至30 mL，同上步骤显色并定容，即得0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8mgL P标准系列溶液，与待测液同时测定，读取吸光度。然后绘制校准曲线或直线回归方程。.结果计算：同上。.注意事项：根据分光光度计性能，可选用650-890nm波长处测定，880890nm处灵敏度高。5 植物全钾的测定一火焰光度法5.1 适用范围：适合于植物样品消煮液中钾含量的测定。5.2 方法提要： 植物样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的K可用火焰光度法测定。5.3 试剂5.3.1 K标准溶液(K)=100mgL)：0.1907g KCI(分析纯，在105110C干燥2 h)溶于水，于1 L容量瓶中定容，存于塑料瓶中。 5.4主要仪器设备5.4.1火焰光度计。6 分析步骤：吸取定容后的消煮液5.0010.00mL(V2：)放入50mL容量瓶中，用水定容(V3)。直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。校准曲线或直线回归方程：准确吸取100mgL K标准溶液0，1，2.5，5，10，20mL，分别放入50mL容量瓶中，加入定容后的空白消煮液5或10mL(使标准溶液中的离子成分和待测液相近)，加水定容。即得0，2，5，10，20，40mg/L K的标准系列溶液。以浓度最高的标准溶液定火焰光度计检流计的满度(一般只定到90)，然后从稀到浓依