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不规则抗体筛检卡标准操作程序发布日期：2012-03-20 查看次数：742一、准备工作（一）微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（1825）平衡，再用专用离心机离心5分钟。（二）检测标本的准备：1红细胞悬液的制备：将筛检红细胞或谱细胞配成0.8%浓度的悬液。2血清标本的制备：采集被检对象静脉血，放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10分钟后离心，取上清；或者静脉血采入无抗凝剂试管中，4放置12小时，或37放置2小时后离心，2000r/min,10分钟，取上清（该上清不得有絮状物或沉淀）。二、操作步骤1.将准备好的不规则抗体筛检卡做好标记；2.将配好的筛检细胞或谱细胞悬液加入标好的微管中，各一滴（或50l）；3.分别立即加入被检者血清1滴（或50l）；4.加样后的试剂卡，置37孵育器中孵育15分钟；5.使用专用离心机离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟），取出肉眼观察结果。结果判定：根据所提供的筛检红细胞或谱细胞的反应格局来判定结果例：按(-)、(4+)、(-）的实验结果及提供如下的筛检红细胞反应格局来分析筛检细胞反应格局编号Rh-hrKiddMNSDuffyDiegoKellLewisPDCEceJkaJkbMNSsFyaFybDiaKkLeaLebp1I+-+-+-+-+II+-+-+-+-+-+-+III+-+-+-+-+-阴性结果用排除法,阳性结果用可能包含法。以前五种抗原为例：(-)：可排除D、C、e；(4+)：判断可能含有D、E、c；(-）：可排除D、C、c、e；综上，可认为：此样品血清中可能含有-E三、注意事项1应用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫试验检测病人红细胞时，一定要用适量EDTA的试管采血液标本，该标本不能放入4-10冰箱保存，以避免红细胞在病人体外致敏所致假阳性反应。2红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。3血清标本：血清标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉淀，呈假阳性反应。4如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。5每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。6试剂卡
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