改性大孔树脂分离纯化甜菊糖甙的研究.docx

改性大孔树脂分离纯化甜菊糖甙的研究 摘要：本文对D-101型大孔树脂进行改性得到两种新型大孔树脂D-101-DCCD和D-101-CCD;并应用得到的改性大孔树脂对两种甜菊糖莱鲍迪甙A(RA)和斯替维甙(ST)进行了吸附/脱附实验，总结改性树脂对RA和ST的吸附分离规律：(1)D-101-DCCD对于RA具有特异性的吸附能力;(2)在对于RA和ST的脱附能力方面的显著差异，表明D-101-DCCD在RA的工业化纯化方面具有良好得应用前景。 关键词：改性大孔树脂 莱鲍迪甙A 斯替维甙 特异性吸附 甜菊糖甙是从甜菊叶中提取出来的一种甜味剂，其主要成分为斯替维甙(ST)、莱鲍迪甙A(RA)。RA在甜菊糖中甜度最高、口味纯正，大量药物实验证明，甜菊糖甙无毒副作用，经常食用可预防高血压、糖尿病、龋齿等，是一种可替代蔗糖的理想的甜味剂。 近年来，大孔树脂主要应用于食品和中药等方面。目前在甜菊糖分离纯化中也得到了广泛应用。为了提高分离效果，本文对D-101型树脂进行了改性。成功制备了D-101-DCCD与D-101-CDD。结果显示D-101-DCCD不仅对于RA具有特异性的吸附能力，而且在针对RA的脱附性能上又表现出不同于其他树脂的特性。 1 材料与仪器 1.1 仪器 SHZ-82B型水浴恒温振荡器;岛津高效液相色谱仪LC-20A，SPD-20A紫外检测器。 1.2 材料 D-101型树脂;四氯化钛(TiCl4，AR);3-氯-1，2-丙二醇缩丙酮(CDD)与1，2，2-二甲基-3-二�f烷-4-甲酰氯(DCCD);RA与ST标准品(ST：99.1%，RA：98.7%)(上海甄准)。 1.2.1 D-101-DCCD的制备 将3.5g D-101干燥后于CCl4中氮气保护下溶胀36h，将6mlTiCl4缓慢加入，于室温下滴加5mlDCCD，30搅拌反应24h。以NaOH溶液进行水解，过滤后的产物放入真空干燥箱，于120干燥至恒重，即得。 1.2.2 D-101-CCD的制备 将3.5g D-101于CCl4中氮气保护下溶胀36h，将6ml TiCl4缓慢加入，于室温下滴加4.5mlCDD，其他步骤同1.2.1。 2 方法与结果 2.1 分析方法 2.1.1 色谱条件 色谱柱为Thermo NH2柱(250 mm4.6mm，5μm);流动相为乙腈/水(V/V=80/20);流速为1.2ml/min;进样量20μl，柱温为30;紫外检测波长为210nm。 2.1.2 对照品溶液的配制 将ST和RA标准品置于105干燥箱中恒温2h，分别精确称取ST、RA适量，用流动相进行溶解。 2.1.3 标准曲线的绘制 分别精密吸取对照品溶液0.1、0.2、0.5、1.0、2.5ml，以流动相定容至10ml，以ST、RA质量浓度为横坐标(x)，峰面积为纵坐标(y)进行线性回归，方程为： y=1.391*104x+309.5，r=0.9997; (ST) y=1.210*104x-952.7，r=0.9995; (RA) 2.2 树脂的静态吸附量 吸附24h后测定上清液中各组分含量，分别计算静态吸附量。 Q0=(Co-Cx)* V0/Mx Q0：静态吸附量(mg/g); V0：溶液体积(ml); Co：初始浓度(mg/ml); Cx：吸附平衡后甜菊糖的浓度(mg/ml); Mx：吸附平衡时树脂的用量(g); 2.3 树脂的静态脱附量 测定洗脱10h后洗脱液中各组分的含量，计算树脂的静态脱附量。 Q1=(Co-Cx)* V0/Mx Cx：脱附平衡后甜菊糖的浓度(mg/ml); V1：静态脱附体积(ml); Q1：甜菊糖的静态脱附量(mg/g); Mx：吸附平衡时树脂的用量(g)。 2.4 树脂的静态脱附率 设定甜菊糖的吸附量与脱附量的比值为静态脱附率(U)。 Uy= Q1/Q0*100% Uy：静态脱附率(%); Q1：甜菊糖的静态脱附量(mg/g); Q0：甜菊糖的静态吸附量(mg/g); 3 结果与分析 3.1 三种树脂的静态吸附能力比较 D-101-DCCD对RA的吸附饱和速度最快、更具特异性;静态吸附量见表1。 从数据上看，两种改性树脂的吸附量均优于D-101树脂;D-101-DCCD对RA的静态吸附量达到了126.7mg/g，显示出良好的吸附能力。 3.2 三种树脂的静态脱附能力比较，数据如表2所示 如表2所示，D-101-DCCD对于RA和ST之间的脱附能力存在很大的差异。我们利用不同浓度的乙醇水溶液对RA进行脱附，结果发现，RA的静态脱附率随乙醇浓度增加而增加，100%时达到最大值，然而，从节约成本考虑，建议采用95%的乙醇作为脱附溶液。 4 结果与讨论 本文对D-101型树脂进行了改性。系统地比较了D-101、D-101-DCCD与D-101-CDD这三种大孔树脂对RA和ST的吸附/脱附能力，结果显示D-101-DCCD对于RA具有特异性的吸附和脱附能力。因此，D-101-DCCD在RA的分离纯化方面具有很高的应用前景。 参考文献 滕祥金，杨丹.2007J.中国糖科，(4)：24-26. 胡献丽，董文宾，郑丹.2005J.食品研究与开发，26(1