论文资料：中药雾化降低医院感染发生率及减少多重耐药菌发生的实验研究.docVIP

中药雾化降低医院感染发生率及减少多重耐药菌发生的实验研究一、立项的背景和意义（一）立项的背景近年来由于抗生素的大量及不合理使用，导致致病菌对各种抗生素的耐药性不断上升，以及多重耐药菌的出现，给人类的健康带来极大的危害。细菌耐药性问题已经成为全球关注的一个热点。在这种情况下，人们将注意力转向天然药物。国外研究表明，某些天然植物药物具有良好的抗菌活性，并且与合成抗菌药物联合应用时，可以增强抗菌药物的抗菌活性，还可以抑制或者消除细菌的耐药性。中草药是我国广大劳动人民治疗各种疾病的医药宝库，已经证实多种中草药及其成分有抑菌或抗菌作用，部分中草药通过提高机体的免疫机能、降低抗菌素的毒副作用、增强抗菌药物的作用。全球正在形成研究和使用中草药的热潮，国内主要进行的是中药消除细菌耐药质粒方面的研究。而国外目前进行的多为天然植物药物(或中草药)抑制细菌多药耐药性方面的研究。我院内科系统尤其是呼吸科收治的病人，具有高龄、长期卧床、抵抗力低、反复住院、住院时间长（少数达数年以上）等特点；还有一部分病人从周边综合性医院ICU转入，导致医院感染率高，多重耐药菌株多。为降低医院感染发生率及减少多重耐药菌株的发生，本次研究采用复方中药制剂，利用负离子增湿器喷雾，可以将具有抗菌作用的中药材的有效成分散布到空气中，直接用于杀灭环境中细菌或抑制其传播，从而达到降低医院感染发生率及减少多重耐药菌株发生的目的。由于这些中药本身对人体几乎没有毒副作用，在应用上不必转移病人，对器具、设备和环境也不会造成污染。因此，本研究成果一旦实现，在预防和控制医院感染及减少多重耐药菌株的发生上将具有相当大的实用性。（二）研究开发意义1. 郑小华等1对呼吸科病室空气的检测，结果表明污染的空气中存在“绿脓杆菌”、“表皮葡萄球菌”、“不动杆菌”、“腐生葡萄球菌”、“克雷伯氏菌”、“大肠杆菌”、“金黄色葡萄球菌”等。空气消毒是净化病室空气，控制和减少医院内感染的重要措施之一，特别是对呼吸科病室尤为重要。2明确板蓝根、金银花、黄芪、黄芩、虎杖、野菊花六种中药合剂的雾化液对细菌和病毒有抑制和杀灭作用，为将此六药作为降低医院感染发生率和减少多重耐药菌株的发生提供科学依据。3中药具有疗效好、价格低、取材易，研制用于预防和控制院内感染及减少多重耐药菌株的发生，不仅能产生巨大的社会效益，还有着巨大的经济效益。4利用负离子增湿器雾化进行空气消毒，使用有效，操作方便，具有相当大的实用性。我国是中药大国，近年来，国外对中医药的研究也越来越重视，本研究可以为开拓中医药的应用途径探索新的思路。二、国内外研究现状和发展趋势（一）国内外研究现状1、中药制剂用于空气消毒中药制剂具有抗菌、抑菌，又因具有污染少、低毒、刺激性小等特点，在空气消毒中已得到了较广泛的研究和运用。但大多使用熏蒸、燃烧等方法，存在一些缺点，如有烟灰飘浮，燃烧不彻底或燃烧可能会对有效成分造成破坏，同时对环境也有不良影响等。今后应加强中药制型的改革和使用方法的改进，发挥中药消毒法效果可靠、安全无菌、无色无烟的优势，必将产生良好的开发应用前景2。2、中药雾化吸入治疗呼吸道感染呼吸道感染是临床上多发常见病，也是老年和长期卧床患者最常见的并发症。雾化吸入具有镇咳、祛痰、解除支气管痉挛、改善通气功能的作用。黄芪补气升阳、固表止汗，用治脾、肺气虚；由这六味中药组成的方剂具有广谱抗菌、抗真菌、抗病毒及解热作用3。用其进行雾化吸入，可使药物雾化后直接吸人呼吸道，对控制呼吸道感染见效快、效果好。尤其针对住院时间长，对多种抗生素产生耐药的患者，效果尤为显著4 。3、中药消除细菌耐药性的研究进展细菌耐药性问题一直是全球关注的问题，从天然、毒副作用小的中草药中筛选耐药抑制剂是近几年来人们研究的热点问题。（1）对耐药菌具有消除作用5金银花、板蓝根、黄芩等清热解毒药是目前多用于消除耐药性中药。雷连成等试验结果表明：黄芪等对大肠杆菌对喹诺酮类、庆大霉素、强力霉素的耐药性有较好的抑制作用，抑制率达到90。（2）抑制一内酰胺酶的作用5一内酰胺酶是一种能将一内酰胺类抗生素分解成无抑菌活性产物的酶，从而使细菌产生耐药性。黄通旺等应用分光光度法测定了黄连等15种中草药的提取液对耐青霉素细菌所产生的一内酰胺酶的抑制作用。（3）中药抗菌增效剂5某些中药或中药复方对抗菌药物有不同程度的增效作用，可以提高细菌对抗菌药物的敏感性。作为增效剂应用于临床治疗的中药多数具有钙通道拮抗活性，将临床观察到的增效作用与其潜在的逆转多重耐药活性联系在一起，推测常用的增效方剂中可能存在多重耐药逆转剂。如金银花对耐青霉素的金葡球菌有增效作用，在低于抗菌浓度时还能增强白细胞的吞噬能力，对青霉素抗菌有增效作用。（4）对细菌耐药质粒的消除随着细菌耐药性形成机制研究的深入。独立于细菌染色体以外的遗传物质质粒所编码的耐药性越来越受到重视。要想获得消除质粒的菌株，需要使用合适的物理或化学方法干扰质粒复制、或降低质粒的稳定性，人为地提高质粒丢失的频率，使其重新恢复对药物的敏感性。中药具有天然、低毒甚至无毒的特点，人们希望从传统中药中选择出用于体内的R质粒消除剂，这对于控制细菌耐药性的传播与中药的开发利用都具有十分重要的意义6。中药单体黄芩苷对铜绿假单胞菌R质粒的体外消除试验结果表明，黄芩苷的消除率为51，明显高于空白对照组；体内R质粒消除率为120，明显高于对照组(刘克等，2003)。金银花对绿脓杆菌P29株R质粒的体内消除率为8。但中药消除大肠杆菌R质粒的研究还处于起步阶段，祖国医学的理论是单方可通过“君、臣、佐、使”互相配伍，可以取长补短，起到增加药效、减少毒副作用的效果。研究资料显示，消除效果差的单方通过配伍使用，组成复方，可大大提高了消除率7。所以用复方进行质粒消除，是今后研究中药对R质粒消除作用的一个方向。（5）中药复方制剂对常见革兰阴性杆菌耐药菌株体外抑菌的研究现状由王治伟等人研究，采用黄连、黄芪等中药配伍制得药液，从MIC实验结果可以看出，其药液原液对试验的几种多重耐药菌均有抑制作用8。 4. 负离子增湿器工作原理“云雾”牌增湿器(CRH一1型)是湖州市云雾电器设备有限公司生产的高效节能自控负离子增湿器，是根据“瀑布”原理，将水直接雾化后喷向空间，不仅能调节空气中的湿度，还能产生大量对人体有益的负离子，以净化空气。本型负离子增湿器雾化量5Lh，负离子密度225104个cm3，增湿面积500m3。通过临床试验，发现负离子增湿器还有协同消毒作用9。空气中的负离子在多方面发挥着作用，其可改善肺换气功能、调节造血系统的功能、促进机能的新陈代谢、加速机体的氧化还原过程、增强机体的免疫力。近年来，研究发现，工作环境中利用负离子发生器增加负离子浓度，不仅可以显著提高健康水平，而且能提高工作效率10。5空气消毒的现状目前使用的空气消毒法主要三种，分别为臭氧、紫外线和化学药剂，臭氧不能在有易燃易爆品场所使用，且易使橡胶类制品老化；紫外线杀菌有死角，且不能在有人的情况下使用；化学制品对人体和物品均有不良影响。这些在使用时一般要求人员撤离，一些化学制品在使用时还需要给操作人员作特殊防护，给使用带来不便。本研究利用超声波雾化利用中药萃取液作空气消毒剂，杀灭环境中的细菌和病毒，目前国内尚未见到研究报道。（二）发展趋势随着临床治疗手段快速发展，抗生素药物广泛及不合理的使用，带来的负面效应是医院感染率上升和耐药菌株的增加。院感的发生，不仅使病人的病情加重，而且延长住院日期，增加治疗费用，造成严重的浪费，甚至可引起残疾或死亡。多重耐药菌株的出现，导致临床治疗失败，感染复发，死亡率增高等。利用中草药抑菌或抗菌作用、提高机体的免疫机能，有望能降低医院感染发生率及减少耐药菌的发生，同时还可降低临床上抗生素的使用率，避免抗生素的滥用。其作为中西医结合的一种有效治疗手段，值得在临床推广应用。用复方中草药喷雾消毒空气，既具有净化空气（使尘埃沉降）又有消毒（药液的抗菌作用）作用，并且具有湿化空气、清香空气的多种效果，还具有刺激性小、毒性低、操作简单、价格低廉、取材方便的特点。该方法可适用于有人的场合，消毒过程中室内的人吸入复方中草药的蒸汽，有止咳、祛痰、平喘的作用，并可预防流行性感冒等呼吸道疾病。这种方法既适合于医院病室的空气消毒（含终末消毒及卧有病人病室的空气消毒），又适合于学校、幼儿园等公共场所以及家庭的室内空气消毒。本研究旨在将传统中医药与现代高科技结合，通过本研究一方面将能深化中医药预防疾病的理念，使中医药在预防医学领域充分地发挥起应有的作用；另一方面将尝试中医药的多学科结合，从而促进中医药的现代化发展。主要参考文献：1 郑小华呼吸科病房空气检测与对策中国现代医学杂志，1999，9（3）2 郭有能， 俞小萍， 赖小美中药空气消毒法的研究进展实用中西医结合临床，2003，3（2）3 郭国华实用袖珍中药辞典M湖南科学技术出版社，200237624 郑晓静，黄梅， 莫冰，等. 中药雾化吸入治疗呼吸道感染的观察与护理49例. 中国实用护理杂志，2003，19（16）5 刘立新， 刘芳萍， 李睿，等.中药消除细菌耐药性的研究进展.畜牧兽医科技信息，2008，(5)6 许虹，杜海燕，牛艺儒. 中药对细菌耐药质粒消除作用的研究概况与展望. 农业技术与装备，2009，(7)7 陈群，王胜春. 黄芩与止痢灵对大肠杆菌R质粒消除作用的研究J.中国微生态学杂志，1998，10（2）8 王治伟，庞雪云，冼中任等中药对常见革兰阴性杆菌耐药菌株体外抑菌试验观中国热带医学，2007，7（6）9 田秋姣负离子增湿器喷雾过氧乙酸的空气消毒效果的观察J护理学杂志2007，22（5）：11910 王清芳，田秋娇，张利红负离子增湿器喷雾过氧乙酸的空气消毒效果环境与健康杂志，2007，24（8）三、研究开发内容、项目实施方案和技术关键（一）研究内容：本研究选用板蓝根、金银花、黄芪、黄芩、虎杖、野菊花六味具有广谱抗菌、抗真菌、抗病毒及解热作用的中药组成方剂，利用负离子增湿器产生的雾气，利用中草药抑菌或抗菌作用、提高机体的免疫机能，对病房进行空气消毒，从而达到降低医院感染发生率及减少多重耐药菌株发生的目的。本实验试图将传统中医药与现代科技结合，探索中药在预防、控制医院感染领域的应用的可行性，为中医药的应用探索一条新的途径。（二）具体实施方案及技术关键1、中药制剂的制备（1）配方：板蓝根20g、金银花20g、黄芪30g、黄芩20g、虎仗30g、野菊花20g（从台州医药公司购得）（2）制备工艺称取上述药材打成粉末，加入纯化水1000ml，浸渍1h。先用蒸馏法提取挥发油，将残留液过滤后加入3倍无水乙醇。静置后过滤，再从滤液中回收乙醇浓缩。将残留液与挥发油混合，静置过滤，添加适量增效剂和适量乙醇。配成含10乙醇的中药消毒剂，分装于500ml玻瓶中，流通蒸汽灭菌即得。2、消毒方法按照实验设计要求，将制备好的中药液放入微波炉，中火加热3min，再倒于负离子增湿器容器内，接上电源即可进行喷雾，喷后密闭门窗1h。3、空气消毒效果评价（1）评价方法：根据卫生部医院消毒卫生标准（GB 15982-1995）要求，采用平板暴露法对中药喷雾后的病室采样。采样由专人负责，连续采样60天，每天一次，每次在同一高度同一位置布点，培养皿暴露空气中5 min后合上皿盖送检。采样后的培养皿置37孵箱中培养48h，按时观察记录培养结果。平板暴露法结果计算公式：细菌菌落数(cfucm2)= 平板上菌落数稀释倍数采样面积（cm2）（2）评价标准：根据卫生部医院消毒卫生标准（GB 15982-1995）中各类环境空气卫生标准拟定。I类环境：层流洁净手术室，空气细菌数10cfucm3；II类环境：普通手术室、供应室无菌区，空气细菌数200cfucm3；类环境：普通病房、治疗室、注射室，空气细菌数500cfucm3。4、医院感染病例的调查（1）诊断标准依据卫生部2001年颁发的医院感染诊断标准（试行）进行医院感染病例的诊断。（2）调查方法采用前瞻性的调查方法，对符合医院感染的病例，由主管医生填写“医院感染病例报告卡”上报到院感科，再由院感科专职人员复核后录入电脑。5、抗生素使用情况的调查调查研究阶段相关科室的抗生素使用情况，包括抗生素使用率、联合使用情况及合理性的分析等。6、统计方法：采用SPSS 11.0统计软件计量资料以均数标准差表示，多样本均数比较采用方差分析，两样本均数采用非参数检验，P0.05为差异显著。四、预期研究目标观测中药复方制剂喷雾消毒空气对患者医院感染控制的效果，降低医院感染发生率、减少多重耐药菌株的发生及降低抗生素的使用率。研究中药预防、控制医院感染及多重耐药菌株的新途径，推进中医药研究的现代化进程。五、技术路线与课题分解技术路线：选呼吸科、针灸科、消化内科有住院病人的病房用负离子增湿器对制备好的中药液进行喷雾，喷后密闭门窗1h空气采样送培养，判断消毒效果继续对相关科室空气喷雾消毒调查相关科室所有住院病人的医院感染病例数、细菌耐药状况及抗生素使用情况资料汇总，与试验前同期医院感染率、耐药菌耐药状况及抗生素使用率相比经过统计学处理，判断有无差异性。技术路线：选取相关科室有住院病人的病房调查相关科室所有住院病人的医院感染病例数、细菌耐药状况及抗生素使用情况用负离子增湿器对制备好的中药液进行喷雾，喷后密闭门窗1h空气采样送培养，判断消毒效果继续对相关科室病房空气喷雾消毒经过统计学处理判断两者有无差异性资料汇总，与试验前同期医院感染率、耐药菌耐药状况及抗生素使用率相比 六、计划进度安排1、2011年8月2011年9月，对我院相关科室有住院病人的病房进行喷雾消毒，每天消毒后进行空气采样送检，连续送检60天，证明该消毒方法对空气消毒有效，同时调查相关科室发生的院感病例、细菌耐药状况及抗生素的使用情况。