谷胱甘肽对山葵愈伤组织诱导效应的观察.ppt

谷胱甘肽对山葵愈伤组织诱导效应的观察,学院 成人教育与职业技术学院 专业 园林技术专业 学号 08456057 姓名 伊东晓 指导老师 胡孝义,汇报内容,1. 实验目的及意义 2.技术路线 3.实验材料与方法 4.实验结果及分析 5.小结与结论 6.研究展望,1.实验目的及意义,实验目的 研究在山葵组织培养中，谷胱甘肽对外植体的愈伤组织诱导、发育的影响。,实验的意义 谷胱甘肽对促进细胞分裂有很大作用，如果实验成功，则能培育出更为茁壮的外植体。,2.实验的技术路线,通过方案对比的方法，即基本培养基（J1）和在J1中分别加入硝酸银（AgNO3）、谷胱甘肽（GSH）、水解酪蛋白（CH）构成的优化方案（YH），即YH1 、YH2、YH3，通过对愈伤组织形态的观察，获得初步结论。,3.实验材料与方法,实验材料 实验中选择的外植体是山葵的叶片及叶柄。 外植体消毒 将外植体放在灭菌纯水中冲洗23次，用2.75%酒精浸泡30s，再用灭菌纯水冲洗34次，用0.1%升汞浸泡10min，最后再用灭菌纯水冲洗34次即可放在超级工作台上备用。 培养条件 培养温度为26摄氏度，暗光培养。,培养基配比 基本配方（J1）固体1/2MS+ 1.0mg/L 6-BA+ 0.2mg/L NAA+ 3%蔗糖+ 0.7%Agar 优化配方1（YH1）基本配方+ 3 mg/L AgNO3（硝酸银） 优化配方2（YH2）基本配方+0.1 mM GSH （谷胱甘肽） 优化配方3（YH3）基本配方+500 mg/L CH（水解酪蛋白）,4、结果与分析,实验结果 J1 外植体叶片及叶柄均长出了愈伤组织，但没有明显的粗大，生长的速度也一般，没有褐化现象的产生。 YH1 外植体叶片及叶柄长出愈伤组织的速度较快，并且比J1中的要大，基本无褐化现象。 YH2 外植体的叶柄由于谷胱甘肽的作用变得粗大，但是整体上愈伤组织不多且较小，长势也较慢，并且有褐化现象的产生。 YH3 外植体基本未长出愈伤组织，只是膨大，并且 褐化严重。,在图片中可以发现，叶柄由GSH作用变得粗大,但叶片长出愈伤很小，褐化很多，叶片膨大也不厉害。,基本培养基J1与加入GSH的优化培养基YH2相比，J1中叶柄长出的愈伤组织较多，但不及YH2中的外植体粗大；YH2中愈伤组织较少，但是叶柄因了GSH的作用很粗大，不过，有褐化现象出现。,优化方案1即YH1中愈伤组织长势良好，而且也无褐化现象的出现； 优化方案2即YH2中愈伤组织少而且生长缓慢，并且有褐化产生，不过叶则比较粗大。,优化方案2（YH2）有愈伤组织产生，叶柄粗大，但又少量褐化产生； 优化方案3（YH3）褐化严重，叶片、叶柄均只有膨大，基本未长出愈伤组织。,5、结论,（1）添加了AgNo3、GSH、CH的优化培养基从整体讲比基本培养基对愈伤组织的诱导、外植体的生长作用更明显。 （2）在三种优化方案中，YH1（加入AgNo3）所起到的效果是最好的，不仅能产生愈伤组织，而且也没有明显的褐化现象。 （3）YH3（加入CH）实验结果是最差的，外植体基本上未长出愈伤组织，并且褐化现象严重。 （4）YH2（加入GSH）实验结果差强人意，外植体能够长出愈伤组织，也较粗大，但是褐化现象也挺严重 。,讨论,谷胱甘肽在组织培养中对促进细胞分裂有明显的作用，但是，实验过程中却易造成污染，出现褐化现象。因此，如果能很好的解决好这一问题，将会节约很多时间，收到很好的效果，这是在以后的工作中需要探讨的并努力的。,6.研究展望,谷胱甘肽被誉为“抗氧化物之王”，具有抗氧化作用和整合解毒作用，对促进细胞分裂也有极重要的作用；山葵是一种高级辛香调味品，发展山葵产业具有很高的经济价值和社会价值。 运用组织培养技术大力发展山葵产业，是必由之路，亦是捷径。,致谢,首先，要感谢胡孝义老师，他在我们论文写作过程中给予了极大的帮助，指导，同时，也正因为有了老师的严格要求，在论文写作过程中我们也有许多深刻的记忆。 还有大杨店实验室里的许工程师，她也给予了我们许多帮助。 同时，也要谢谢各位给予过我帮助的同学们：邬萌萌师姐，小熊师姐，小郑师姐，崔珺同学，许红同学，叶洋国同学，葛德平同学，汪苗