watersHclassEmp简易操作手册.docx

Waters 常规反相UPLC-H Class简易操作步骤一. 准备1. 流动相准备: 有机试剂（HPLC级），水（新鲜超纯水，18.2m），盐流动相（需过滤）Seal wash：10% 甲醇(或异丙醇等有机相) Needle wash： 50%甲醇Purge: 10%甲醇2. 样品准备: 0.5-1.5mL，过滤后放入样品室3. 色谱柱准备: 按流速方向安装，接头注意防止死体积，连接所需使用的检测器二. 仪器开机:1. 开机: 电脑主机（待本地连接完成）仪器主机（FTN-QSM-PDA）Empower软件2. 启动系统: 开机/更换溶剂时执行，溶剂置换，气泡排除ACQUITY控制台中,左边树状栏选中“系统”控制“启动系统”检查如下设置启动，等待仪器自动完成系统启动工作QSM：选中需要使用到的ABCD/密封清洗溶剂，灌注3minFTN：清洗溶剂15秒，清除溶剂5个循环平衡到方法：流速0ml/mim3. 平衡: 控制台中QSM中设置流速缓冲盐体系：设置水90%：有机相10%，0.2mL/min运行35min后，才能运行缓冲盐非缓冲体系：根据实验条件设置流动相比例与流速，柱温 三. Empower登录初始用户名：system 密码：manager四. 配置系统1. 选择系统:根据需要选择所需使用的检测器Empower主页面配置系统左边树状目录选择“系统”右边选中不需使用的系统，右键离线选择需用的系统，右键在线2. 新建项目: 建立数据/方法等存放目录Empower主页面配置系统左边树状目录选择“项目”右键新建项目选择父项目，下一步表空间（建议200-500M）选择源项目，要复制的参数（建议Default）命名并确定3. 备份项目: 定期备份，防止系统，软件故障Empower主页面配置系统左边树状目录选择“项目”选中需备份的项目右键备份项目浏览选择存放路径下一步完成备份出来的文件夹可另用硬盘存放，以保证数据安全。4. 还原项目:Empower主页面配置系统左边树状目录选择“项目”右边空白处右键还原项目浏览选择存放路径下一步完成五. 运行样品：采集数据1. 进入运行样品页面：Empower主页面运行样品2. 编辑仪器方法页面下方“仪器方法”“编辑”QSM 流量：编辑流速，溶剂比例，梯度表；FTN 温度：编辑柱温PDA 编辑3D波长范围，2D波长选择编辑完成后文件另存为命名仪器方法保存文件另存为方法组使用与仪器方法相同的名称，保存方法组3. 平衡系统页面下方“仪器方法”选中需用的仪器方法平衡/监视器4. 编辑样品组方法页面中部“单一/样品/样品组/正在运行”选择“样品”方法1：文件加载样品组方法调用之前编辑好的模板，在模板基础上修改方法2：编辑样品板将1号及2号样品板均编辑为ANSI-2mL-48位格式。特别注意：样品板类型为ANSI-2ml-48位，不可选错！样品瓶（注意格式！） 进样体积（1-10uL） 进样数（1-99） 标签（不填写） 样品名称（命名） 级别（不填写） 功能（标样为“进标准样”，样品为“进样”）方法组（选择需用的方法组） 处理（正常） 运行时间（与梯度时间一致）编辑完成后文件“样品组方法另存为”使用日期命名法保存样品组若要调用已编辑好的样品组方法，可：文件加载选中样品组名称，即可在原基础上修改。5. 运行样品组页面上方绿色“运行”运行六. 数据处理：建立标准曲线1. 进入“浏览项目”页面：Empower主页面浏览项目选中目标项目确定2. 建立处理方法Empower主页面浏览项目在“样品组/进样/通道/结果”中，选中“通道”找到最低浓度的标样双击查看数据点击左上角处理参数向导新建处理方法使用处理参数向导编辑峰宽阈值开始结束时间选“否”修改名称 命名，完成，关闭3. 输入样品浓度Empower主页面浏览项目在“样品组/进样/通道/结果”中，选中“通道”选中全部标样右键“改变样品” 编辑含量编辑从处理方法复制组分选中处理方法确定依次输入浓度/单位确定保存关闭4. 处理Empower主页面浏览项目在“样品组/进样/通道/结果”中，选中“通道”选中全部标样右键处理使用指定的处理方法：选择目标处理方法勾选清除校正确定5. 查看结果在“样品组/进样/通道/结果”中，选中“结果”上方更新找到标样结果双击查看窗口校正曲线中，可查看曲线6. 查看曲线在“样品组/进样/通道/结果”中，选中“曲线”上方更新找到曲线即可查看R/R2/方程若R0.99,曲线正常，则可继续处理样品，否则需查找问题。七. 未知样品1. 处理Empower主页面浏览项目在“样品组/进样/通道/结果”中，选中“通道”选中需要处理的样品右键处理使用指定的处理方法：选择目标处理方法不要勾选清除校正确定2. 查看结果在“样品组/进样/通道/结果”中，选中“结果”上方更新找到样品结果双击查看可在页面下方“3D通道/