新鲜冰冻血浆制备与使用的注意事项.doc

浅谈新鲜冰冻血浆制备与使用的注意事项谭咏恩 吴岚 骆洁贞 张文芳 【摘要】 新鲜冰冻血浆是一种重要的成分血，随着对新鲜冰冻血浆研究的不断深入，其在临床上的使用也越来越广泛。笔者就近年来关于新鲜冰冻血浆制备与使用的研究作一综述，为血浆制备与临床输注提供参考。【关键词】新鲜冰冻血浆;血液制备;凝血因子Precautions of preparation and use of fresh frozen plasmaTan yong-en, Wu lan, Luo jie-zhen, Zhang wen-fang. Guangzhou Blood Center 510095, China.Abstract Fresh frozen plasma is an important blood component. With deepening of research, the clinical use of fresh frozen plasma has become increasingly widespread. For providing a reference of preparation and clinicalinfusionofplasma, we review the studies which are aboutthe preparation and the use offresh frozen plasma in recent years.Key words Fresh frozen plasma; Blood preparation; Coagulation factors 0.引言 新鲜冰冻血浆（fresh frozen plasma, FFP）为在全血采集后6h（全血保养液为ACD）或8h（全血保养液为CPD、CPDA1）内，在全封闭的条件下将血浆分离出并冻结制成的成分血，应用时将冰冻状态的FFP融化成液体血浆。FFP含有全部的凝血因子及血浆蛋白，其浓度与6-8小时采集的全血相似。根据中华人民共和国全血及成分血质量要求，新鲜冰冻血浆因子含量0.7IU/ml,血浆蛋白含量50g/l。临床上主要用于单一凝血因子缺乏的补充，出血性疾病、弥漫性血管内凝血（DIC）、血栓性血小板减少性紫癜（TTP）、血浆置换和烧伤患者的治疗。由于FFP中部分凝血因子活性极不稳定，制备过程与使用方法都容易影响凝血因子的活性，为保证临床输血效果，笔者浅谈新鲜冰冻血浆制备与使用的注意事项。1.新鲜冰冻血浆的凝血因子新鲜冰冻血浆含有全部的凝血因子，包括F、F、F、F、F、F、F、F、和纤维蛋白原（FIB）。除F、F外，其余各因子活性比较稳定。F在体外半衰期较短，多为8-12小时，而易使其活性丧失，加之其接触异物表面时不同程度被激活，凝血酶和Xa也继续在此裂解F，导致失活1。先天性单个凝血因子缺乏性疾病中，临床上以F缺乏（甲型血友病）最为常见，对这种患者而言，F的治疗作用无可替代。2.新鲜冰冻血浆的制备2.1不同制备时间对凝血因子含量的影响根据中国输血技术操作规程（血站部分），新鲜冰冻血浆必须在全血采集后6h（全血保养液为ACD）或8h（全血保养液为CPD、CPDA1）内，分离出并冻结制成。而在6h内，不同制备时间对凝血因子的含量也有较大影响。F在血液离体4h后6h内制成的FFP中含量虽然符合成分血质量要求，但比较在2h及2h-4h内制成的FFP中含量下降分别约15%和12%，差异具显著性，而F含量则无明显变化。2 F离体后对温度变化敏感，血液采集后未能及时放置4冰箱储存，流动车上冰箱储存量不足、性能不稳定，血液运输过程冷链箱应用不当等都对其含量影响很大。自我国无偿献血制度颁布实施以来，街头流动无偿献血车的采血量大幅增加，血站除对外采队增加人员配备、SOP规范化培训外，还应加强冷链设备投入，增加运输车接血次数，尽量缩短FFP制备时间，确保F的质量。2.2病毒灭活与白细胞过滤器对FFP质量的影响输注经病毒灭活与白细胞过滤后少白细胞的FFP对预防发热性非溶血性输血反应（NHFR）、输血后移植物抗宿主病（TA-GVHD）、HLA同种免疫反应和各种输血相关性病毒传染性疾病有重要作用。目前对血浆中的病原体灭活主要采用亚甲基蓝光化学法，据文献报道3，病毒灭活袋的过滤器滤除光敏剂亚甲基蓝和残留白细胞的同时，对凝血因子也有一定的吸附作用，PT（凝血酶原时间）、APTT（活化部分凝血活酶时间）、TT（凝血酶时间）明显延长，各种凝血因子与纤维蛋白原（FIB）的含量均降低，而总蛋白含量无明显差异，但均符合国家规定的标准。PT与APTT主要反映外源性及内源性凝血系统各凝血因子凝血状况。TT是反映体内的抗凝物质，可以定量监测功能性纤维蛋白原水平。几项指标的变化可以说明病毒灭活对血浆成分的活性损伤是存在的,但在可接受的范围内。白细胞过滤器对白细胞过滤的原理是：阻滞作用；表面张力；电荷密度。由于过滤器材是根据完整的白细胞设计的，其滤材孔径（2049 m）比凝血因子大得多，所以血液过滤过程中的阻滞作用可以不考虑，而滤材的表面张力和电荷密度在去除白细胞的同时，对凝血因子和蛋白在不同程度上可能产生一定的吸附作用4-5。较多实验表明5-6，APTT与PT过滤后延长，F、F、F在过滤后活性降低，差异具显著性。但各凝血因子的活性仍能保持在正常的参考范围内，能满足临床需求。病毒灭活与白细胞过滤器虽然对FFP中部分凝血因子活性有影响，但血浆质量仍然符合国家标准。鼓励新鲜冰冻血浆的病毒灭活与去白，在满足临床应用需求的同时也能有效地降低输血不良反应及病毒传染性疾病的发生，确保输血安全。3.新鲜冰冻血浆的使用3.1不同融解温度对FFP质量的影响多种设备均可将新鲜冰冻血浆融化，包括干烘箱、微波炉及水浴箱，而目前最常使用的是循环水浴箱。国外学者Isaacs等7比较研究了新鲜冰冻血浆在22、37、45和60融化后纤维蛋白原含量，发现其浓度在2245保持稳定，在60显著降低。Isaacs建议水浴融解温度控制在37。而刘川桥8等也做了相似的研究，结果显示，当FFP水浴融解温度为42时，F活性较37融解组下降，而当融解温度为45时，F活性明显下降，FIB、TP含量则无明显变化。37最接近人体的正常体温，虽然融解时间较长，但对于不稳定凝血因子及纤维蛋白原有较好的稳定作用，因此，水浴融解应严格控制在37。循环水浴箱应定期清洁，严格按照标准操作规程（SOP）使用，做好保养计划及保养记录，保证设备性能的稳定。3.2融解后不同保存时间对FFP质量的影响临床上使用FFP，应在融解后24h内输注，因故未能输注可以保存于4冰箱，不能再次冰冻。根据英国输血协会2002年的指南9，FFP需在融解后4h内输注，而美国血库协会允许延迟至24h。英国输血指南显示，在4保存24h后，FFP中因子活性下降28%，其他所有凝血因子仍保持稳定。我国文献10-11也有报道，24小时4保存的FFP中F衰减了约42%，F衰减了约36%。但美国匹兹堡大学输血研究所Mark Yazer等人2008年研究显示12，FP24（采血后24小时内速冻的新鲜冰冻血浆）37水浴融解后，置于16冰箱保存5天，F含量只下降了14%，均值为0.69 IU/ml，其它凝血因子均在规定范围内。Mark等分析，其实验结果与其它大部分研究结果的差异主要在于其新浆的制备时间均在采血后3.5小时内，F经过4短暂保存后速冻，加热融解时F的活性仍然是可逆的，只有保存时间较长，降解酶才会对其进行不可逆的降解。Mark等指出，保存了5天的融解新浆仍然具有较好的临床效果，当然，这对新浆的制备时间也有严格要求。虽然世界各地关于这项研究的结果不尽相同，但所有研究均表明，F在体外的半衰期较短，其降解是不可避免的，为保证临床输血效果，FFP融解后应立即输注。而对于其他凝血因子，英国指南表明FFP中F与F活性可以维持至融化后72小时。当不需要补充因子时，仍然可以使用融化后保存72小时的FFP，其纤维蛋白原含量也显著高于冷上清。4.小结对于FFP的制备，血浆质量受时间、温度、制备方法的影响。因此，应严格控制采血时间、运输温度，制备时需在适宜温度环境下尽量缩短制备时间，保持制备过程的及时性和冷链的完整性。而对于FFP的使用，应严格控制在37水浴融解，融解后立即输注，以确保FFP的临床疗效。FFP虽然在临床中应用广泛，但输血是一项具有潜在风险的治疗手段，如何在用血安全的前提下，科学合理的使用以达到其最大的临床效果，这需要血站、输血科及临床医生的共同努力。参考文献1何子毅,田兆嵩.冷沉淀的临床应用J.中国输血杂志,2008,12（21）：986-988.2兰竹.新鲜冰冻血浆的制备时间对凝血因子和的影响J.广东医学,2007,2:262-263.3葛健民,柏则蓉,梁启忠，等.亚甲基蓝光化学法病毒灭活前后血浆凝血因子等的质量分析J. 中国输血杂志,2012,25(8)：750-751.4王明山.滤除白细胞输血技术的应用进展J.国外医学输血及血液学分册,2003,26（1）:75-77.5李小平,冯永生,段景斌,等.白细胞过滤对血液凝血因子的影响意义J.中国输血杂志,2008,21（1）：35.6张昆梅,蓝松,欧海,等.白细胞过滤对血浆中凝血因子及蛋白的影响J.哈尔滨医药,2011，31（1）：157 Isaacs MS,Scheuermaier KD,Levy BL,et al. In vitro effects of thawing fresh-frozen plasma at various temperaturesJ. Clin Appl Thromb Hemost,2004,10(2):143-1488刘川桥,薛炼.新鲜冰冻血浆融解温度对凝血因子及蛋白影响的探讨.临床输血与检验J,2012,4（14）：172-1739 英国血液学标准委员会输血特别委员会.新鲜冰冻血浆、冷沉淀和冷上清使用指南.国外医学输血及血液学分册M,2004,27（5）：463-47010桂峰.浅谈新鲜冰冻血浆融化后不同放置时间的临床应用意义.中国现代药物应用J,2011,5（5）：25-2611陈活强,容伯芬,何玉怡,等.新鲜冰冻血浆融化后凝血因子的变化观察.当代医学,2010,16（4）：141-14212 Mark H.Yazer,Andrea Cor