乙肝免疫学检测课件

乙肝免疫学检测,疾控中心检验科 2010年12月20日,HBV基本特征 乙肝表抗及乙肝五项检测 开展乙肝疫苗母婴阻断效果观察 表格,HBV基本特征,一、形态结构 在HBV感染者的血液中可见3种不同形态与大小的HBV颗粒。 1.小球形颗粒，由空心病毒包膜组成，成份是HBsAg，不含病毒核酸，无感染性。 2.管形颗粒，由小球形颗粒连接而成。小球形颗粒和管形颗粒的产生是由于病毒颗粒包膜产量过剩。具有与HBsAg相同的抗原性。 3.Dane颗粒，为完整的具有感染性的病毒颗粒，由包膜和核衣壳组成，HBsAg镶嵌在包膜脂质双分子层中。,HBV基本特征,二、基因组 HBV的基因组是已知DNA病毒中最小的，仅含3200bp，组成独特的带有部分单链区的双链DNA环状模式，长链为负链，短链为正链。 三、复制 HBV的感染周期大致可分为4个阶段： 1.感染性病毒感染肝细胞，将核衣壳释放进入细胞质。 2.病毒DNA基因组进入细胞核，并转变成共价闭合DNA，作为转录模板合成mRNA和前基因组RNA，mRNA出细胞核，被翻译成病毒蛋白。,HBV基本特征,3.前基因组RNA与2种基因产物相互作用，形成未成熟的含RNA的核衣壳，在衣壳内，以前基因组RNA为模板由P蛋白逆转录成全长的HBV DNA负链。 4.病毒以新合成的负链DNA为模板，自DR（核苷酸同向重复序列，在正负链的5，端）区开始复制互补的正链DNA，两者结合成双链不完全环状DNA包装于衣壳中，以有包膜的病毒颗粒出胞，没有核衣壳的表面蛋白的芽生形成小球形颗粒和管形颗粒。,HBV基本特征,四、敏感动物与细胞 1.敏感动物：HBV感染宿主具有明显的种属特异性，人HBV的易感宿主只局限于人及黑猩猩、恒河猴等高级灵长类动物。 2.敏感细胞：人原代肝细胞和肝癌细胞以及HBV转染的细胞系。 五、理化性及抵抗力 病毒在30-32可存活至少6个月，在-20可存活15年。病毒浓度较高时，60加热10h，或98加热1min，以及乙醚或PH2.4处理6h均不能有效灭活乙肝病毒。,乙肝表抗及乙肝五项检测,一、传染源 1.HBV携带者 2.乙型肝炎患者的血液、唾液、精液和阴道分泌物等 二、传播途径 1.血液和血制品传播 2.性传播 3.母婴传播,乙肝表抗及乙肝五项检测,一、标本采集 1.遵循无菌和安全采集的原则采集标本。 2.样本保存：如果在5d 内进行测定，应于24h内 分离血清或者血浆，将其存放在2-8；如果需 要5d后才能进行测定，必须将分离的血清或者血 浆冻存。 二、测定方法 1.酶法 （ELISA）：主要用于初检和复检。 2.试纸法（胶体金试纸条）：主要用于初筛。 3.乳胶板块法：用于乙肝两对半的快速检测。,乙肝表抗及乙肝五项检测,以全血标本检测HBsAg为例（杭州艾康）,乙肝表抗及乙肝五项检测,以血浆/血清标本检测乙肝五项为例（乳胶板块法）（杭州艾康）,乙肝表抗及乙肝五项检测,三、临床意义 1.HBsAg阴性，表示无HBV感染。 2. HBsAg阳性，表示有HBV感染，包括携带者和 乙肝患者。 3.乙肝五项检测的临床意义,乙肝表抗及乙肝五项检测,乙肝表抗及乙肝五项检测,四、个人防护 1.实验时必须穿戴好防护用品，以免被阳性样品污染而导致感染。 2.试验完毕后，脱下防护用品，用肥皂或者消毒液及流水洗手，最后对实验工作区域和工作台面进行消毒。 3.送标本时应防止对工作人员造成感染或对环境造成污染。护送样品的人应明确接收地点和接收人，实验室负责人或其指定的人员应及时确认样品已送达指定实验室，被转入安全位置并得到妥善处理。,乙肝表抗及乙肝五项检测,五、职业暴露后的预防 1.急救处理:如粘膜污染，用生理盐水或者流水冲洗；如针刺伤的要尽可能把血挤出来，然后用肥皂或者消毒液及流水洗手，最后涂上酒精，包扎伤口。 2.在暴露后24h内注射HBIG，以预防HBV感染。 六、试验废弃物的处置和消毒 1.废弃物的处置应符合实验室生物安全通用要求（GB19489-2004）和消毒技术规范（2002年版）要求。 2.能够灭活HBV的常用方法和条件包括：121高压蒸汽灭20min,160干烤1h，100煮沸2min, 0.5过氧乙酸，3漂白粉，5次氯酸钠和环氧乙烷。,开展乙肝疫苗母婴阻断效果观察,一、孕妇产前乙肝病毒标志物筛查 1.对2011年1月1日-6月30日所有住院分娩孕妇分娩前进行HBsAg筛查（填附表1），检测试剂和方法根据各医院的实际需要自由选择。 2.如果孕妇HBsAg筛查结果为阳性，则进一步检测HBeAg、抗-HBe和抗-HBc，检测试剂和方法根据各医院的实际需要自由选择。 3.采集HBeAg阳性的孕妇的静脉血3ml，将血清分离后冻存，统一送省CDC采用Abbott检测试剂进行乙肝五项血清学指标的实验室复核和PCR定量HBV DNV检测。,开展乙肝疫苗母婴阻断效果观察,二、HBsAg阳性母亲所生新生儿乙肝疫苗免疫策略 1.乙肝疫苗接种：HBsAg阳性母亲所生新生儿按照0，1，6m程序接种10ug重组酵母。 2.HBIG的使用：HBsAg阳性母亲所生新生儿出生后24h内尽早注射一针100IUHBIG。如果HBIG短缺，可优先接种HBsAg和HBeAg双阳性的母亲所生新生儿。 3.HBIG和首针乙肝疫苗接种时间越早越好，可同时在不同部位接种。,开展乙肝疫苗母婴阻断效果观察,三、HBsAg阳性的母亲所生新生儿母婴阻断效果观察 调查201 1年1月1日6月30日所有住院分娩 的HBsAg阳性孕妇及新生儿的信息，建立档案，定期随访。所有HBsAg阳性母亲所生婴儿在完成乙肝疫苗全程免疫后7-12月内采静脉血3ml，血清分离后，各分两管保存，一管在县CDC进行“乙肝五项”血清学指标检测，另一管统一冻存，送省CDC采用Abbott检测试剂进行实