级骨髓细胞学检查ppt课件

骨髓细胞学检验,珠江医院检验科 刘 鲲 医师 E-mail:,临床血液学检测,基本概念,骨髓检查内容及临床应用,细胞形态学,骨髓组织病理,细胞遗传学,细胞免疫标记,检查内容及方法,主要内容,2,细胞化学染色及临床意义,3,正常骨髓细胞学的形态和分类,临床血液病骨髓细胞学特点,Why to do,How to do,How to apply,骨髓细胞学检查步骤,骨髓穿刺术 bone marrow aspirate,部位：胸骨，髂后上棘, 髂前上棘,胸骨穿刺,髂后上棘穿刺,骨髓穿刺术,常规消毒，局部麻醉,骨髓穿刺术,局部麻醉,骨髓穿刺术,进骨髓穿刺针,骨髓穿刺术,抽吸骨髓液0.2ml以内，制备骨髓片,骨髓涂片制备情况,骨髓涂片染色,涂片染色：瑞特姬姆萨染色（Wright-Giemsa),偏酸,偏碱,骨髓细胞学诊断注意事项,必须结合结合病史：注意年龄、性别、症状、体征、治疗经过、用药史。 必须结合末梢血象：对骨髓中不易辨认的细胞做出较正确判断。 诊断意见： 肯定性诊断：白血病、巨幼细胞贫血、再生障碍贫血、骨髓转移癌、寄生虫 符合性诊断：骨髓形态学可以解释临床表现，增生性贫血、ITP，骨髓增值性疾病、粒细胞缺乏、MDS 排除性诊断：血小板减少症。判定是原发性血小板较少还是继发性。 描述性诊断：骨髓象有改变，但对临床提不出支持或肯定意见。应做进一步检查。,骨髓细胞学诊断注意事项,对某些局灶性病变可能需多次多部位穿刺如：恶组，再障、骨髓转移癌，骨髓瘤等 某些病须结合病理学检查如：骨髓纤维化，某些白血病，骨髓增生异常综合症，再生障碍性贫血 有凝血因子缺乏者应列为禁忌,骨髓涂片镜下观察,1. 涂片制作，染色，取材,2.判断骨髓增生 程度(有核细胞/红细胞)：分5级,3.计数并分类全片巨核细胞数量 正常成人在1.5cmcm,可见巨核细胞735个,4.观察体积较大或成堆分布的异常细胞,BACK,好的涂片红细胞分开排列 好的染色淋巴细胞分辨红紫色核和淡兰色浆 粒细胞能数清核分叶数,颗粒清晰,BACK,增生极度活跃,BACK,白血病,再生障碍性贫血,骨髓细胞增生程度五级分类,增生程度 成熟红细胞/有核细胞 意 义 增生极度活跃 1：1 白血病 、类白 增生明显活跃 10：1 白血病、增生性贫血 增生活跃 20：1 正常骨髓、多种血液病 增生减低 50：1 再生障障性贫血（非重型） 增生重度减低 200：1 再生障障性贫血（重型）,BACK,产板巨核细胞,为完全成熟的巨核细胞，直径40-100微米，细胞质周围局部或全部形成血小板，胞质边缘不整齐，可 有伪足状伸出。,back,巨核细胞增多伴成熟障碍：特发性血小板减少紫癜 巨核细胞减少：再生障碍性贫血,骨髓涂片镜下观察,1.有核细胞计数及分类（骨髓至少200个有核细胞，血片100个有核细胞） 2.观察各系统细胞的形态特点：成熟情况, 有无异常细胞 3.观察有无特殊细胞、异常细胞及寄生虫,各系细胞比例,粒系细胞：约占总有核细胞的40%60%，其中原粒2%,早幼粒5 %，中幼粒细胞和晚幼粒细胞各 15%，杆状核粒细胞百分率高于分叶核粒细胞，嗜酸粒细胞5 %，嗜碱粒细胞 1%。 红系，占20%，其中原红细胞 1%,早幼红细胞5%，中幼和晚幼红细胞各占10%。 淋巴细胞：约占20%，小儿可达40%。 单核细胞4% ，浆细胞2%。,结果计算,粒/红比值（M/E）正常人M/E 24：,粒、红比值正常 可见于正常骨髓象、原发性血小板减少性紫癜、粒系统和红细胞系统同时减少(如再生障碍性贫血)、多发性骨髓瘤,粒、红比值增高 见于幼稚红细胞减少(如单纯红细胞性再生障碍性贫血)、急性化脓性细菌感染引起的粒细胞增多、类白血病样反应、粒细胞系统白血病等。,粒、红比值降低或比例倒置 见于粒细胞减少(如粒细胞缺乏症)、各种增生性贫血(如缺铁性贫血、失血后贫血、溶血性贫血等)、巨幼红细胞性贫血(如恶性贫血、营养性巨细胞性贫血、胃切除后巨幼红细胞性贫血等)。,y,掌握,熟悉,了解,骨髓增生程度分级和意义 粒/红比值的概念,骨髓穿刺成功标志、 骨髓低倍镜下观察内容,骨髓细胞检查的适应症、 骨髓穿刺步骤和注意事项,骨髓细胞学检查,造血干细胞HSC,多能干细胞MPSC,粒系,红系,原巨核系,单核系,淋巴系,早幼粒,嗜酸,嗜碱,中幼粒,晚幼粒,中幼红,晚幼红,原红,早幼红,原单核,幼单核,血细胞发育形态演变规律,杆状,分叶,嗜酸粒,嗜碱粒,单核细胞,血小板,原淋,幼淋,原浆,幼浆,浆细胞,淋巴细胞,幼巨核,颗粒巨,产板巨,红细胞,裸核,诊断,主观性,客观性,组织化学染色及意义,组织化学染色意义,辅助判断急性白血病的细胞类型 辅助血液系统疾病的诊断和鉴别诊断,常见细胞化学染色,铁染色 过氧化物酶染色(POX) 过碘酸雪夫染色（PAS) 氯醋酸脂酶染色（NAS-DCE) 醋酸AS-D萘酚酯酶(NASDAE) 中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP),常用骨髓酶学染色（一）,细胞外铁 存在于骨髓小粒中 骨髓储存铁 细胞内铁 存在于中，晚幼红细胞及红 细胞中，为骨髓内可利用的铁,铁染色,细胞外铁染色,铁染色临床意义,诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的一项可靠和临床实用的检验。细胞外铁阴性，铁粒幼细胞百分率减低。经铁剂治疗，数天后铁小粒出现在幼红细胞中，但细胞外铁需待贫血絞正后一段时间出现。 细胞外铁增多：铁粒幼细胞贫血，溶血性贫血，巨幼细胞贫血，再生障碍性贫血。 骨髓增生异常综合征：伴环形铁粒幼细胞增多的难治性贫血,常用骨髓酶学染色（二),正常血细胞的染色反应：根据阳性颗粒有无及阳性程度分为 及 阳性结果为棕黑色,POX染色临床意义,急性粒细胞白血病强阳性反应,急性单核细胞白血病弱阳性或阴性,急性淋巴细胞阴性反应,鉴别急性粒细胞与急性淋巴细胞白血病,POX染色临床意义,POX染色时辅助判断急性白血病细胞类型的首选、最重要的细胞化学染色。 FAB分型规定急性淋巴细胞白血病POX的阳性率3%即为急性髓细胞白血病。,常用骨髓酶学染色（三）,胞质中出现红色者为阳性反应 可呈颗粒状、小块状或弥漫状,PAS染色临床意义,ALL呈阳性反应颗粒状,红白血病强阳性,急性单核细胞白血病,PAS反应对三种白血病类型的鉴别,粗颗粒或块状,细颗粒弥散状， 边缘粗颗粒,PAS染色的临床意义,急性淋巴细胞白血病、淋巴瘤细胞白血病：PAS反应呈强阳性，呈粗大颗粒状或大块状。 慢性淋巴细胞白血病PAS反应呈阳性，颗粒粗大 急性原粒细胞白血病为阴性，急性单核细胞白血病可呈弥漫性、细颗粒状PAS反应弱阳性。 幼红细胞增生性疾病： 急性红白血病PAS反应阳性反应物质为粗大颗粒状； MDS的幼红细胞PAS反应可呈阳性； 巨幼细胞性贫血、溶血性贫血幼红细胞的PAS反应为阴性,常用骨髓酶学染（四）,胞质中出现红色沉淀为阳性反应。仅见于粒细胞系统,NAS-DCE染色临床意义,常用骨髓酶学染色（五）,NAS-DAE染色：为非特异性酯酶，此酶主要存在于单核细胞中。,（）,（）,NAS-DAE临床意义,急性单核细胞白血病呈强阳性，可被NaF抑制,急性粒细胞白血病弱阳性，不被NaF抑制,鉴别急性单核细胞白血病与急性粒细胞白血病,常用骨髓酶学染色（六）,中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP),中性粒细胞碱性磷酸酶：存在成熟中性粒细胞（分叶和杆状），阳性为红色颗粒，反应强度分1+，2+，3+，4+，图为3+。,NAP阳性率：100个中性成熟粒细胞中阳性细胞总数 NAP积分： 100个细胞中阳性细胞的分数总和,NAP临床意义,NAP活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断 增加：细菌性感染（类白血病反应） 急性淋巴细胞白血病，慢性淋巴细胞白血病 再生障碍性贫血，骨髓增值性疾病，恶性淋巴瘤， 骨髓转移癌 下降：慢性粒细胞白血病慢性期，阵发性睡眠血红蛋白尿,组织化学染色鉴别,三种急性白血病细胞化学染色鉴别 急淋 急粒 急单 POX （） （+） （- +/-） PAS 粗颗粒 （）（） 小颗粒 NAS-DAE （） （/+）不被NaF抑制 （）被NaF抑制 AS-DCE （） （） （+/-） NAP 积分升高 积分减低,常见急性白血病的细胞化学染色结果,-+,a-NAS+DAE,-或+ 不抑制,-或+ 不抑制,+ + 不抑制,- + 部分抑制,+ + 抑制,病例分析,某男患，24岁，农民。 主 诉：面色苍白，心慌半个月，皮下出血10天。 现病史：半月前开始出现面色苍白、心慌、头晕，近10多天下肢出现出血点，偶有鼻血，低热。 即往史：健康 体格检查： T 37.5 0C；R、P、Bp正常。轻度贫血貌，皮肤及粘膜无黄染；左颈及右腹股沟淋巴结可触及，质中，无压痛；胸骨压痛阳性。心肺无异常；腹软，肝、脾肋下可触及。 思考题 1. 该患可能是哪方面的疾病？为什么？ 2. 应该做哪方面的哪些检查？ 3. 考虑为何种诊断？,病例分析 1. 该患应考虑为血液系统疾病 根据是： （1）临床病史、症状（面色苍白、心慌、头晕，下肢有出血点，偶有鼻血，低热） （2）体格检查（ T 37.5 0C，轻度贫血貌，胸骨压痛阳性） 2. 为了明确诊断，应做以下实验室检查： （1）血常规检查（RBC、 WBC、PLT) （2） 骨髓细胞学检查（骨髓穿刺