已阅读5页，还剩3页未读， 继续免费阅读
版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领
文档简介
2cDNA :-2; :-2TRP-2TRP-2.RNAcDNAPCRTRP-2pUC19GSTpGEX-4T-1IPTGTRP-2/GST.TRP-2cDNA;GSTpGEX-4T-1/TRP-2;TRP-2/GST.TRP-2GSTTRP-2/GST. Keywords:tyrosinaserelatedprotein-2;clone;fusionex-pression;vitiligo Abstract:AIMToclonethecDNAofhumantyrosinasere-latedprotein2TRP-2andexpressthecorrespondingprotein.METHODSTotalRNAwasisolatedfromculturedhu-manpigmentalcellsandmRNAwasreverslytranscribedintocDNA.ThenPCRwasusedtoamplifytheTRP-2codingre-gion.ThePCRproductwasclonedintopUC19plasmidandsequencedthensubclonedintovectorpGEX-4T-1.TheTRP-2proteinwasexpressedinE.coliofDH5asfusionproteinwithglutathioneS-transferaseGSTinducedbyIPTG.RESULTSTRP-2codingregionwasclonedintopUC19andthesequencewasconfirmed;FusionexpressingvectorofpGEX-4T-1/TRP-2wassuccessfullyconstructed;TRP-2/GSTfusionproteinwascorrectlyexpressed.CONCLUSIONHumanTRP-2geneissuccessfullyclonedandTRP-2/GSTfusionexpressingvectorisconstructed.TRP-2/GSTfusionproteiniscorrectlyexpressedinE.coli. 0 -2tyrosinaserelatedpro-tein-2TRP-2DHI-2.TRP-2TRP-2IgG.TRP-2TRP-2TRP-2.TRP-2cDNATRP-2. 1 1.1pUC19pGEX-4T-1DH5;RNA;BamHIEcoRIT4DNATaKaRa;TaqDNAPromega;GSTCloneTech. 1.2TRP-2.5BamHI3EcoRI.SBS:p15CG-GGATCC-ATGGGCTATAATTGTGGAGACTGCA3p25CG-GAATTC-GGCAAAGTTCCAGTAGGGCAAA3; RNAmRNAcDNA.PCR:952minTaqDNA1U9430s5530s7240s357210min.HPVTRP-1.PCR12g・L-1.BamHIEcoRIpUC19T4DNA.DH5BamHIEcoRI12g・L-1.:BamHIEcoRIpGEX4T-1DH5.TRP-2GST:0.4mmol・L-1IPTG37234hSDS-PAGE.1.:50LSDS-PAGE.ClotechGST. 2 2.1TRP212g・L-11457bpFig1.TRP-2pUC19BamHIEcoRI447bpFig2. 2.2TRP2/GSTGST2pUC19/TRP-2BamHIEcoRI447bpBamHIEcoRIpGEX-4T-1.DH5BamHIEcoRI447bpFig3GSTpGEX-4T-1/TRP-2. 14 pGEX-4T-1/TRP-2/DH537A6000.4234h.SDS-PAGEMr430002h4h.3100g・L-1SDS-PAGEFig5. 3 4.5.3-1TRP-16-2TRP-240%.TRP-2. TRP-2TRP-2TRP-2. 5 TRP-2438bp7211158bp-80%289294295300;146M r16990.RNART-PCRTRP-2GeneBankTRP-278.GSTpGEX-4T-1/TRP-2.IPTGlacTRP-2DH5TRP-2. : 1WuYMZhangJJJiZLLiuHPChenNCChenSM.CloningsequencingandexpressionofcDNAgeneofhumaneraJ.Di-siJunyiDaxueXuebaoJFourthMilMedUniv2000;215:646-648. 2ChengHLiuYFYuJYZhangSZZhangHZWangLG.Constructionandexpressionofanti-HCCimmunotoxinofsFv-TNF-andGFPfusionproteinsJ.Di-siJunyiDaxueXuebaoJFourthMilMedUniv2001;223:279-280. 3XiaoHSYangHJinWLHuangWJDuanXLChengBFJuG.Expressionandpurificationofrecombinanttenascin-RdomainsandtheirfunctionsJ.Di-siJunyiDaxueXuebaoJFourthMilMedUniv2000;2110:1182-1184. 4LiZQGaoTWZhaoXDChengJMLiuRQ.DetectionofautoantibodiestomelanocytesurfaceantigeninseraofpatientswithvitiligoJ.ZhonghuaPifukeZazhiChinJDermatol2001;344:268-270. 5LiZQGaoTWMaCLChengJMHuangHLiuRQ.De-tectionofautoantibodiestomelanocytesinvitiligopatientssseraandserainducedcytotoxicitymediatedbycomplementJ.LinchuangPifukeZazhiJClinDermatol2000;293:136-138. 6NishiokaEFunasakaYKondohHChakrabortyAKMishi-maYIchihashiM.ExpressionoftyrosinaseTRP-1andTRP-2inultraviolet-irradiatedhumanmelanomasandmelanocytes:TRP-2protectsmelanomacellsfromultravioletBinducedapoptosisJ.MelanomaRes1999;95:433-443. 7YanZWangJLHanWZhaoYTZhangYQSuCZ.CloningandexpressionofheatshockproteingeneofaHyper-thermophilicbacteriainE.coliJ.Di-siJunyiDaxueXuebaoJFourthMilMedUniv1999;207:587-588. 8WuGJHaoXKZhangYHBaiYJYaoLBJiSPLi
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 矿山恢复生态功能的技术措施
- 堤防施工技术工艺实施方案
- 2026年中国石棉批发行业市场规模及未来投资方向研究报告
- 人教版高中英语必修4教学设计范例
- 私募基金风险评估与管理报告
- 混凝土裂缝修补技术与施工要点
- 教师专业发展案例分享与总结
- 采购管理流程与制度
- 土地使用权合同范本与法律解析
- 泵站一体化提升工程施工方案细则
- 南网培训课件
- 五年级科学光学单元测试卷
- 学堂在线 实绳结技术 期末考试答案
- 中小学教师信息技术教学能力检测试题及答案
- 自然灾害后的心理调适指南
- 客源合作协议书范本
- 2021年新《经济法基础》-第10章-税收征收管理法律制度
- 眩晕综合征护理常规
- 质量管理体系文件培训
- 机械原理 课件 第4章 连杆机构及其设计
- 飞行体验游旅行合同
评论
0/150
提交评论