宫颈癌中Survivin基因表达及临床意义.docVIP

宫颈癌中Survivin基因表达及临床意义 作者：杨凯，倪才方，谢其根，余进进，吕蓓，张震宇 【摘要】 应用免疫组织化学SP法检测Survivin蛋白在43例宫颈癌组织标本、20例宫颈原位癌、20例正常宫颈组织标本中的表达情况。结果Survivin蛋白阳性表达率宫颈癌组织显著高于正常宫颈组织(P<0.01)，高于宫颈原位癌组织(P<0.05)；有淋巴结转移者显著高于无淋巴转移者(P<0.05)；病理分期为期者显著低于期者(P<0.05)；随临床分期增加及淋巴结转移Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高。提示Survivin在宫颈癌中的高表达与淋巴结转移及临床病理分期密切相关；Survivin可能是影响宫颈癌预后的重要指标。 【关键词】 Survivin；宫颈肿瘤；宫颈癌宫颈癌发病率在女性恶性肿瘤中仅次于乳腺癌居第二位，该病发病的高峰年龄为35岁39岁和60岁64岁；全世界每年有50万新增宫颈癌病例，20万人死于宫颈癌，而发展中国家的发病率明显高于发达国家，我国每年有4万余妇女死于宫颈癌1。Survivin是凋亡抑制蛋白家族的一个新成员,是迄今发现最强的凋亡抑制因子2。近年研究表明，Survivin与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究旨在探讨宫颈癌组织中Survivin蛋白的表达及其临床意义。1 材料与方法1.1 材料 取我院病理科2006年1月至12月存档的43例手术切除宫颈鳞状细胞癌组织石蜡标本，术前均未接受放疗和化疗。患者年龄31岁79岁,平均年龄51岁。参照国际妇产科联盟(FIGO)1995年修订的临床分期标准:a期 7例，b期11例，a期11例，b期14例；有淋巴结转移者28例,无转移者15例，病理分化程度为高分化12例，中分化18例,低分化13例；另取20例正常宫颈组织及20例宫颈原位癌组织作对照。1.2 Survivin检测 采用免疫组织化学链酶抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)法染色，SP试剂盒产于福州迈新生物制品公司，用兔抗人survivin多克隆抗体(福州迈新生物制品公司)检测survivin的表达，严格按照说明书操作。已知阳性宫颈癌切片作为阳性对照，PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。以胞质中出现棕黄色颗粒为阳性细胞，400倍镜下计数500个细胞，10%为阳性，<10%为阴性。1.3 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件。计数资料比较采用2检验,相关性采用Spearman相关分析,检验水准P<0.05。2 结果正常宫颈组织中Survivin无表达，宫颈原位癌组织中Survivin蛋白阳性表达率为35.4%；肿瘤组织中Survivin蛋白阳性表达率为62.8%；其阳性染色颗粒主要定位于肿瘤细胞胞质内,细胞膜有少量着色,周围间质亦见少量阳性染色。Survivin蛋白阳性表达与宫颈癌临床病理特征的关系见表1。Survivin阳性表达率有淋巴结转移者为75.0%(21/28),无淋巴转移者为46.2%(6/15),P<0.05;病理分期期者为50.0%(9/18),期者为72.0%(18/25),P<0.05；随临床分期增加及淋巴结的转移,Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高,P<0.05，见表1。表1 Survivin蛋白阳性表达与宫颈癌病理特征的关系（略）3 讨论多细胞生物体细胞数量恒定取决于细胞增殖与凋亡间的动态平衡,平衡破坏可导致肿瘤的发生。在恶性肿瘤中细胞增殖与凋亡同时增加,但增殖速率明显大于凋亡速率。如抑制肿瘤细胞增殖和(或)促进肿瘤细胞凋亡,则会影响肿瘤的生长。Survivin基因是1997年Altieri等2发现的一个细胞凋亡抑制基因,具有强大的凋亡抑制功能,与人类多种肿瘤的发生发展及预后相关3。正常情况下Survivin只表达于胚胎和发育的胎儿组织,但研究发现,大多数肿瘤组织中均可检测到Survivin表达4，5。Survivin的主要生物学功能是抑制凋亡,是目前已知作用最强的凋亡抑制蛋白。细胞凋亡主要有两条途径:死亡受体途径和线粒体途径,均最终通过激活下游效应因子使细胞凋亡。Survivin可以直接黏附于活化的效应因子上,使其不能发挥作用,从而阻断细胞凋亡过程6。本研究显示，Survivin在正常宫颈组织中不表达，宫颈癌组织中Survivin高表达，并在正常宫颈组织、原位癌与浸润癌中差别有显著性意义。提示Survivin基因的表达发生在宫颈癌恶性转化的早期,Survivin基因在宫颈癌组织中的表达可能抑制了异常突变的细胞凋亡,扰乱了细胞生长和凋亡途径,促进细胞逃离生长监控,导致肿瘤的发生。Wang等6用免疫组化SP法对宫颈癌中Survivin进行检测发现，59例宫颈癌组织中41例有Survivin表达,而10例正常宫颈组织中未现Survivin表达，本文结果与其相似。Aziz等检测皮肤癌和癌前病变组织发现,皮肤癌组织中Survivin基因高表达(87%),皮肤癌前病变组织中Survivin基因部分表达,认为Survivin基因表达可能参与皮肤癌的发生、发展，是癌变早期事件。本研究证实,淋巴结转移者Survivin蛋白阳性表达率显著高于无淋巴转移者；临床病理分期期者Survivin蛋白阳性表达率显著低于期者；随临床分期增加,Survivin蛋白阳性表达率逐渐升高。提示Survivin基因不但参与原位肿瘤形成过程的调节,促进其发展,还可能参与癌细胞转移过程的调节,在转移过程中发挥作用。Sarele等7认为,在恶性肿瘤中,脱落的癌细胞因为Survivin对凋亡的抑制而受到保护,继续存活并分裂增殖,进而形成肿瘤邻近或远离部位的转移。综上所述,Survivin的异常表达与宫颈癌的发生、发展相关,可作为早期宫颈癌的辅助诊断指标;为临床判断宫颈癌转移及病理分期提供依据,其可能是影响宫颈癌预后的重要分子指标。【参考文献】 1 章文华，吴令英.关于子宫颈癌综合治疗的商榷J.中华肿瘤杂志，2003，25（2）：206.2 Ambrosini G, Adida DC, Altier DC. A novel antiapoptosis gene, survivin, expressde in cancer and lymphomaJ. Nat Med,1997,3(8):917921.3 Salz W, Eisenberg D, Plescia J, et al. A survivn gene sign aturepredict saggressive tumor behavioJ.Cancer Res,2005,65(9):35313534.4 Suga K, Yamamoto T, Yamada Y, et al. Correlation between transcriptional expression of survivn is of orms and clinic opatological findings in human colorectal carcinomasJ. Oncol Rep,2005,13(5):891897.5 Li JX, Zhou KY, Liang T, et al. Knockdown of survivin Expression by Small Interfering RNA Induces Apoptosisin Human Breast Carcinoma Cell Line MCF7J.Ai Zheng, 2005,24(3):268272.6 Tamm I, Macadam Y, Sausville E, et al. IAPfamily protein survivn inhibits caspaseactivity and apoptosis induced by Fas(CD95), Bax, caspases, and anticancer drugsJ.Cancer Res,1998,58(23):53155320.7 Wang M, Wang B, Wang X. A novel antiapoptosis gene, survivin, bcl2, p53 expression in cervical carcinomasJ.Zhong Ha Fu Chan Ke Za Zhi,