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文档简介

小组成员:陈海霞 张雅妹 朱颖 祝路燕,化学发光免疫分析技术,一、基本原理,1.1 引言 1977年Halman将化学反应系统与免疫系统相结合创建了化学发光免疫分析方法(chemiluminescence immunoassay,CLIA),以检测抗原或抗体。 该方法既有免疫反应的特异性,又具有化学发光反应的高敏感性。以化学发光物质为示踪物,简便、快速、重复性好,无放射性污染,30年来得到广泛的应用。,化学发光免疫分析,化学发光分析系统:利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子, 利用发光信号测量仪器光量子产率。,免疫反应系统:将标记物质直接标记在抗原或抗体上, 经过特异性反应后,形成抗原- 抗体复合物,然后进行相应标记物的检测方法进行检测。,化学发光 ( Chemiluminescence, CL) 是化学物质在特定化学反应中产生的光辐射。通过高能中间体的分解在化学反应中激发单态分子形成, 分子被激发后是不稳定的, 它要释放出多余的能量而回到基态, 其中部分的能量以发光形式释放出来。 因此, 任何一个化学发光反应包括两个过程: 激发和发光过程。一些激发态分子能量也会通过系间串跃和系内串跃而消失, 如图 1 所示。,化学发光基本原理,图1:化学发光产生的光物理过程示意图,(其中,A、B分别代表反应物和生成物;B*是B的激发态。S0、S1分别是 电子的基态和激发单线态,T1、T2为单重及二重激发三线态。),化学发光之所以能够用于分析测定,是因为化学发光强度与化学发光速率相关联,因而一切影响反应速率的因素都可以作为建立测定方法的依据。即一个化学发光过程也包括了一个化学发光反应的过程。 所以化学发光强度(ICL)取决于化学反应的速率、激发态产物的效率和激发态物质的发光效率。 ICL=CLdc/dt=EXEMdc/dt 对于一定的化学发光反应,CL为一定值,但化学发光测定易受化学反应条件,如pH值、离子强度、溶液组成、温度等的影响,影响反应速率或任意一个量子效率的因素都会改变发光强度。 因此,在一定化学反应条件

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