自身抗体特点与临.ppt

自身免疫性疾病的简单印象,自身免疫性疾病（Autoimmune disease,AID) 是一组异质性、以机体免疫系统攻击自身的一种或多种成分，导致器官和组织损伤为特征的疾病 遗传因素是AID的发病基础，如HLA-B27与强直性脊柱炎 环境因素是诱因 吸烟与PBC、RA、SLE的显著相关性 指甲油中芳香酯类与PBC发病密切相关 饮食碘摄入与甲低 其它的如紫外线、致病微生物等 存在自身抗体是特征，但是一种疾病可有多种自身抗体、敏感性特异性低下、种类繁多是AID的普遍表现,自身免疫疾病的特征,可测得高效价自身抗体或自身应答性T淋巴细胞，还有高水平r球蛋白 病损部位有变性的免疫球蛋白沉积 可复制出相似的动物模型 病程发作与缓解交替出现，仅少数为自限 有遗传倾向 女性多于男性，老年多于青少年 应用免疫抑制药物有效,自身免疫疾病的发现,主要的自身免疫疾病,自身免疫疾病的两大类,(一）器官特异性AID： I型DM 甲亢、甲低 阿迪森氏病（肾上腺机能低下） 原发性胆汁性肝硬化、自身免疫性肝炎 自身免疫性肾小球肾炎 神经系统的多发性硬化 眼科的黄斑病、肺部的色素沉积症等,（二）多系统表现的AID 多器官有炎症表现 临床表现和病程多变，症状集中于血液学、关节、皮肤、肾脏等 存在多种自身抗体，其或是致病因子 临床诊断是症状与实验室检查的结合 ANA的检出率可能是最高的,自身免疫疾病的两大类,自身抗体的生物异质性 自身抗体的亲和力、抗原决定族识别、AAB类型，造成实验室间、方法学间、疾病不同进程间不一致 不同人种出现频率、临床表现关联度、抗原表位识别有较大差异 敏感性与特异性难以俱佳，定量测定可以方便解释 正确解释结果，考虑反应强度、就诊者心情,自身抗体检测常用的方法,间接免疫荧光法（IIF/IFA) 初筛、主观、经验要求高，完整细胞制片、抗原谱广 免疫斑点、免疫印迹法 ELISA:依赖抗原纯度 ELISpot：主要测定细胞免疫 流式细胞术： 液相芯片：基于流式细胞的鞘流技术、微珠的制备技艺与抗原抗体反应的高度特异性 抗体微阵（抗体芯片）：早先的肿瘤标志物抗体芯片，技术上仍有待突破,与ELISA相似的灵敏度、变异度，定量性能有待提高,2009年我国102家医院自身抗体室间质量评价分析 李丽君等，中华医学检验杂志，2012,35:265-270（协和医院风湿免疫科）,日本MBL公司的质控品，以其结果为参考 ENA和CCP的定性结果很好（ELISA或DB法） ANA（80.8%） ds-DNA（81.2%） AMA（86.3%） ENA（95.9%） CCP（93.1%） 间接免疫荧光法中，ANA滴度测定正确率低，901和902样本仅为12.7%和7.6% 间接免疫荧光法中，CCP波动范围大，921（10-419U/ml），923号样本（15.3-418.5U/ml),2006-2011年中国实验室自身抗体室间质控评价 张瑞等，中华医学检验杂志，2012,35:271-276（卫生部临检中心）,ANA：采用IIF法占82%，正确率96%， 采用ELISA法占16%，正确率90% ANA滴度报告不甚理想 ENA和ds-DNA报告正确率均大于90%,2012年美国CAP报告,ENA抗体谱 ELISA法：46.3%， 液相芯片：40.5%， ID: 6.3% 免疫印迹：2.1% 其 它： 4.7%,关于间接免疫荧光法与免疫印迹法的比较 协和医院 李永哲,2026份样本，分为AID组、疑是AID组、非AID组 IIF与免疫印迹总体符合率68.56% 结论：单独免疫印迹法和IIF筛查ANA均容易导致大量漏检 二者不能相互代替 对于排除AID的患者，应该同时进行两种方法检测,自身抗体对临床的帮助,1、对于疾病的早期诊断、发病阻滞 症状前几年就出现、利于观察、防止诱发 如：TG-Ab对甲低的预示、ICA对I型DM的预示等 2、诊断与鉴别诊断 早诊早治预后好、迟治误诊代价高 如：RA的早期治疗很重要； 3、疾病进展的预示与监测,自身抗体在临床应用时的困惑,1、方法学太敏感、临界值设置过低 根据自身免疫性疾病多指标+、敏感性低特点解释 根据定量或阳性程度来解释,2、非特异性吸附 稀释较大比例，常见的1:100稀释 3、了解正常、孕妇、感染时出现的阳性率 间隔一定时间段再测 是否记得磷脂综合症的诊断标准？（12周相隔） 4、临床发病前期 DM自身抗体：3-7年出现 TG-Ab：2-10年发现 5、不同的方法学、不同的抗体类型（IgA/G/M),自身抗体在临床应用时的困惑,自身抗体在临床应用时的困惑,注意性别、年龄因素（梅毒、HIV） 药物史 是否感染 优质的试剂盒要求优质的包被抗原 抗CCP抗体在丙肝中8.5%的阳性率 临床症状出现之前的早期预警 IgA、 IgG、IgM型别的检测能力、混合包被？ 临床的复杂性 严格标准化操作是减低低级操作误差的根本措施（不容小觑）,以SLE为例、加深理解,典型的多种自身抗体并存的病症 ds-DNA、ANA、sm、RNP、SSA、SSB、ACA等 ANA在SLE阳性率达95%左右 Ds-DNA和sm是特异性抗体 在肾小球基底膜发现自身抗体的沉积 ds-DNA、sm、RNP、SSA、补体C1q等 并没有发现抗肾小球基底膜抗体（GBM）和EBV抗体,常见SLE临床症状 疲惫 头疼或其它不确定疼痛 低热 精神不振、抑郁 记忆力减退 胸痛 非特异性红斑 有没有想过测定自身免疫性抗体？,以SLE为例、加深理解,ANA检测应该成为常规,关于ANA,ANA滴度或ELISA浓度与疾病严重程度或治疗应答之间的关系尚不明确 IFA采用细胞作为抗原，包含150多种抗原，常作为筛查，缺陷是所用抗体类型是IgG ELISA法测定ANA与试剂厂商品牌关系大 ELISA法测定ANA的包被抗原不能覆盖所有靶抗原 IFCC报道：在自身免疫性疾病中的总体阳性率最高（70%）,自身抗体阳性，神马意思？,88%的SLE在确诊几年前就出现相关抗体阳性 ANA和抗R