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文档简介

专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指通过 ，对生物的基因进行 ，然后导入 ，并使 在受体细胞中 ，产生人类所需的基因产物的技术。基因工程又被称为 。（一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀” （1）来源：主要是从 中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种 的核苷酸序列，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 。2.“分子缝合针” (1)两种DNA连接酶（EcoliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：相同点：都缝 键。区别：EcoliDNA连接酶来源于 ，只能将双链DNA片段互补的 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合 ，但连接平末端的之间的效率 。(2)与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车” （1）载体具备的条件： （2）最常用的载体是 ，它是一种 （3）其它载体： (二)基因工程的基本操作程序第一步： 1.目的基因是指： 。2方法1 ；2 ；3 .原核基因最好采取 获得，真核基因最好利用 。3.PCR技术扩增目的基因（1）原理： （2）过程：第一步：加热至9095 第二步：冷却到5560， 第三步：加热至7075， 第二步： 1.目的：使目的基因在受体细胞中 。2.组成： （1）启动子：是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，是 识别和结合的部位，能启动基因 ，最终获得所需的 。（2）终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的 。使 终止。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中 ，从而将 筛选出来。常用的标记基因是 。第三步： 转化的概念： 2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 ，其次还有 等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 ，最常用的原核细胞是 ，其转化方法是：先用 处理细胞，使其成为 ，再将 溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是 。第四步： 1.首先要检测 ，方法是采用 。2.其次还要检测 ，方法是采用 。3.最后检测 ，方法是从转基因生物中提取 ，用相应的 进行 。4.有时还需进行 的鉴定。如 。（三）基因工程的应用1.植物基因工程： 2.动物基因工程： 3.基因治疗： （四）蛋白质工程的概念1.概念蛋白质工程是指以 作为基础，通过 ，对现有蛋白
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