乙型肝炎病毒基因型和基因变异在乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎中的意义.doc

乙型肝炎病毒基因型和基因变异在乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎中的意义按摩与康复医学2011.2(中)chinesemanipulation&rehabilitationmedicine2011.no.4187乙型肝炎病毒基因型和基因变异在乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎中的意义田华生杨艳萍(湖北省应城市人民医院应城432400)摘要:目的:探讨hbv基因型及基因变异等病毒因素在hbvgn中的意义.方法:选择41例hbvgn患者,采用荧光pcr法检测hbvgn患者基因型,hbv多态性芯片检测基因变异,同时测定尿常规,肾功能和血压等临床资料.结果:41例hbvgn患者,b基因型14例,c型24例(86.8),b+c混合型3例.b型和c型患者间24小时尿蛋白有显着性统计学差异(p<0.o5),尿红细胞计数,血压,尿素氮和血清肌酐无显着性统计学差异(均p>0.05).12例为前c区1896位变异,1896位变异与未变异者问小便常规,血压和肾功能无显着性差异.结论:hbvgn患者hbv基因以b,c两型为主,c型为多.c型患肾脏损害可能更为严重.前c区1896位变异和ymdd变异对hbvgn患者小便常规,血压和肾功能无明显影响.关键词:肾功能乙型肝炎病毒基因型基因变异secondgradehepatitisvirusgenotypeandgenevariationinsecondgradehepatitisvirusrelevantrenalglomerulusnephritissignificancetianhuashengyangyanpingabstract:0bjective:discussesviralfactorsandsoonhbvgenotypeandgenevariationinthehbvgnsignificance.methods:chooses41examplehbvgnpatient,usesthefluorescencepcrlawtoexaminethehbvgnpatientgenotype,thehbvpoly-morphismchipexaminationgenevariation,simultaneouslydeterminestheroutineurinetest,thekidneyfunctionandthebloodpressureandsooiltheclinicalmateria1.results:41examplehbvgnpatient,bgenotype14examples,c24example(86.8),b+cmixedtype3examples.bandbetweenthecpatient24hoururineproteinshavethesignificancestatisticsdifference(p<o.05),urinatestheredeellcount.thebloodpressure,theureanitrogenandthebloodserummyobitterwinenonsignificancestatisticsdifference(p>o.05).12examplesforthefrontcarea1896variations,1896variationshavenoturinatedwiththevariationtheconvention,thebloodpressureandthekidneyfunctionnonsignificancedifference.conclusion:hbvgnthepatienthbvgenetakeb,ctwoprimarily,casmany.thectroublekidneyharmispossiblymoreserious.thefirstcarea1896variationsandtheymddvariationurinatetheconventiontothehbvgnpatient,thebloodpressureandthekidneyfunctionaffectnotobviously.keywords:kidneyfunctionsecondgradehepatitisvirusgenotypegenevariation【中图分类号jr4【文献标识码】a乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎(hbvgn)是由hbv介导的免疫损伤引起的肾小球疾病,起病缓慢,病程迁延,治疗效果欠佳.hbvgn可发生于任何年龄,以635岁的儿童和青壮年多见,儿童发病率明显高于成人】hbv可分为8个基因型(ah).hbv基因型可因地域和人种不同而有不同【文章编号110081879(2011)02003702的分布.hbv基因型和hbv基因变异与慢性乙型肝炎病情的发生发展,预后以及抗病毒疗效密切相关.乙型肝炎病毒(hbv)相关性肾小球hbvgn发病与病毒因素的关系研究甚少.本文检测本地区41例hbvgn患者hbv基因型和hbvdna前c区1896位变异和ymdd变异,探讨其在临床慢性疾病之一.据估计,中国糖尿病患者已达7000万,其中绝大多数都属于型糖尿病.由于患病初期症状不明显,往往不容易被发现而延误治疗.事实上,由于遗传背景不同,人群中存在对型糖尿病相对易感的人群,在同等条件下,他们更容易得型糖尿病.如果能够找到影响型糖尿病遗传易感性的基因,特别是中国人群的易感基因,对及早检出易感人群,推动型糖尿病的早期预防将有莫大的帮助.大量研究已显示,人体在高血糖和高游离脂肪酸的刺激下,自由基大量生成,进而启动氧化应激.氧化应激信号通路的激活会导致胰岛素抵抗,胰岛素分泌受损和糖尿病血管病变.由此可见,氧化应激不仅参与了型糖尿病的发病过程,也构成糖尿病晚期并发症的发病机制.氧化应激与糖尿病相互促进,形成一个难以打破的怪固.胰岛素抵抗可以先于糖尿病发生,在其作用下,疾病早期胰岛素代偿性分泌增加以保持正常糖耐量.当胰岛素抵抗增强,胰岛索代偿性分泌减少或二者共同出现时,疾病逐渐向糖耐量减退和糖尿病进展,血糖开始升高.高血糖和高ffa共同导致ros大量生成和氧化应激,也激活应激敏感信号途径,从而又加重胰岛素抵抗,临床上表现为糖尿病持续进展与恶化.体外研究显示,ros和氧化应激可引起多种丝氨酸激酶激活的级联反应.最近的抗氧化剂改善血糖控制试验也证实,ros和氧化应激会引起胰岛素抵抗.p细胞也是氧化应激的重要靶点b细胞内抗氧化酶水平较低,故对ros较为敏感ros可直接损伤胰岛b细胞,促进口细胞凋亡,还可通过影响胰岛素信号转导通路间接抑制p细胞功能.p细胞受损,胰岛素分泌水平降低,分泌高峰延迟,血糖波动加剧,因而难以控制餐后血糖的迅速上升,对细胞造成更为显着的损害.糖化血红蛋白作为反映两个月左右血糖控制水平的良好指标,为临床评定糖尿病病情及预后提供重要的诊断依据.当机体处于高糖环境,许多蛋白质由于机体的非酶糖基化反应速率加速,导致这些蛋白发生不可逆的糖化且功能异常,在糖尿病的器官损伤中起重要作用.肾病是糖尿病常见的并发症,其病理基础是糖尿病患者肾脏的微血管病变.糖化血红蛋白生成增加致氧合血红蛋白减少等,引起组织缺氧,损伤血管内皮细胞,血管通透性增强,同时糖化蛋白易通过肾小球滤膜,加剧了微血管的损伤,并且高糖环境下,基底膜胶原蛋白糖化,血压增高使肾小球滤过率增加等,共同促使了白蛋白尿的形成.从研究中可看到:malb的排泄量随着hbale的增高而增高,同时说明糖尿病肾病易发生于血糖水平未得到很好控制的糖尿病患者,hbalc水平与尿白蛋白增多所表现的糖尿病肾病的微血管病变密切相关,这与美国糖尿病控制和并发症调查结果相似.hscrp是炎症的敏感的指标.本研究显示,三组2型糖尿病患者血清hscrp水平与对照组比较明显升高,且hscrp水平随着尿微量自蛋白排泄量的增加而增加,说明糖尿病时,机体内有可能存在一定的炎症过程.炎症反应可引起机体的氧化应激,使低密度脂蛋白氧化为0xldl,后者可直接损伤肾小球内皮细胞,增强单核细胞对血管内皮的粘附及浸润,产生大量反应氧化中问产物,直接损伤血管壁,导致血管炎症,表现为微量白蛋白尿和血管病变之间慢性炎症起着潜在的媒介作用.参考文献口贝政平主编.3200个内科疾病诊断标准.北京:科学出版社,200496796838按摩与康复医学2011.2(中)chinesemanipulation&rehabilitationmedicine2011,no.41中的意义.1材料与方法1.1研究对象.2004年12月2010年2月本院收治的41例hbvgn患者,男性31例,女性1o例,年龄1262岁,平均年龄26岁,诊断均符合hbvgn诊断标准.其中,hbv携带状态l2例,慢性乙型肝炎15例,乙型肝炎肝硬化13例,慢性乙型重型肝炎1例.患者病程均超过半年,排除丙型肝炎病毒(hcv),丁型肝炎病毒(hdv)及人类免疫缺陷病毒(hiv)等病毒感染.排除合并酒精性肝病,血吸虫肝脏损害等肝脏病变.排除原发性高血压病,系统性红斑狼疮等所致的肾脏疾病.普管采血5ml,分离血清,一2o保存统一检测.1.2hbv基因型.采用限制性片段长度多态性(rflp)分析技术,用限制性内切酶avaii和dpn作用于hbvdna前s区扩增片段,测定hbv基因型.hbv基因型检测试剂盒购自杭州bioselex公司.l|3hbv基因变异.采用pcr限制性片段长度多态性分析方法测定hbvdna前c区1896位变异和ymdd变异.1.4临床资料.测定患者血压,肾功能(血清尿素氮和肌酐清除率),24h尿蛋白定量和小便常规.1.5统计学处理.数据以均数标准差(x士s)表示,采用spssl1.5统计软件进行团体t检验,p<0.05为差异有统计学意义.z结果2.1hbv基因型.41例hbvgn中,hbv基因型为b型14例(34.1),c型24例(58.5%),b+c混合型3例(7.4).未检出a,d,e,f型.2.2hbv1896位变异和ymdd变异.hbv基因型b型和c型均可检出前c区1896位,12例出现1896位变异(31.7).hbv基因型c型可检出ymdd变异.其中,lo例为ymdd变异(24.4).3例出现前c区1896位和ymdd同时变异(7.3%).2.3hbv基因型与血压,小便常规和肾功能之间的关系.hbv基因型与血压,小便常规和肾功能之间的关系见表1.hbv基因型b型和c型间血压,bun,肌酐清除率,尿蛋白和红细胞无统计学差异(均p>0.05);因例数少,b,c混合型未进行统计学处理.表1hbv基因型与血压,小便常规和肾功能注;p<0.05,b,c混合型未进行统计学处理.2.4hbv1896位变异和ymdd变异与血压,小便常规和肾功能之间的关系.hbvl896位变异和ymdd变异与血压,小便常规和肾功能之间的关系见表2.hbv1896位变异和hbv野生型间,ymdd变异和hbv野生型间血压,bun,肌酐清除率,尿蛋白和红细胞无统计学差异(均p>0.05).3例1896位和ymdd变异未进行统计学处理.表2hbv1896位变异与血压,小便常规和肾功能注:均p>o.05.3讨论hbvgn发生没有种族差异,特定人群发病率与乙型病毒性肝炎的发病率平行.在hbv携带者高流行区和高传播区,hbvgn的发病率男:女为4:1_】.已确定的8种hbv基因型呈全球性分布.a型可见于北欧和非洲南部,b型和c型主要流行于亚洲,大洋洲,d型分布于地中海和俄罗斯,e见于西非,f型可见于中美洲和南美洲,g型见于法国和美国,h型是最近发现的hbv型,与f型关系密切,见于中美洲和南美洲l6j.我国乙型肝炎患者的hbv基因型主要以b,c两型为主,以c型最多见,亦可见少量a,d及b+c混合型.我们这组湖北和广州地区的资料中,b型,c型和b+c混合型所占比例分别为34.1,58.5和7.4,与我国其他地区hbv基因型分布相似.我们的资料进一步表明,我国绝大部分地区以hbv基因型以b型和c型多见,其中,c型最常见.hbv基因型与肝脏病变程度有关,可影响抗病毒治疗的疗效,但hbv基因型与hbvgn的研究甚少.本研究发现,hbv基因型b型和c型hbivgn患者间尿蛋白有显着性统计学差异(p<0.05),而血压,尿素氮,肌酐清除率和尿红细胞计数等无显着性统计学差异(p>o.05),因而表明hbvc型hbvgn患者肾脏病变较b型患者重.因例数较少,hbv基因型b,c混合型未进行统计学分析.本研究与日本学者的研究结论并不一致,他们的研究表明,hbv基因型对hbvgn发病和病程无明显影响.另外,本研究资料中,仅有b型,c型和b,c混合型,未见其它基因型不同hbv基因型诱发病毒性肝炎的发病率明显不同.因此,有必要进一步探讨hbv基因型对hbvgn发病和病程的影响.前c区基因1896位在肝脏病变中的作用仍有不同的报道.有研究表明,前c区基因1896位与成肝炎慢性化和重症肝炎有关.ymdd变异病毒dna编码的dna聚合酶基因序列发生了变异,发生ymdd变异的病毒株对拉米夫定有耐药性,并非病情加重.本资料中,1896位变异,ymdd变异和前c区1896位和ymdd同时变异的比例为24.4,31.7和7.3.目前国内外尚未见前c区基因1896位和ymdd变异对hbvgn发病和病程影响的报道.我们的资料中,hbv1896位变异和hbv野生型间,ymdd变异和hbv野生型间血压,尿素氮,肌酐清除率和尿蛋白无统计学差异,因而表明,hbv1896位变异和ymdd变异对hbvgn发病和病程影响不大.3例1896位和ymdd同时变异例数少,未进行分析.病毒因素,包括基因型和基因变异,在hbvgn发病中的作用研究甚少.我们和初步研究表明,hbvgn患者hbv基因多为b,c型.其中,以c型为多.c型患者尿蛋白程度较b型患者重.前c区1896位变异和ymdd变异对hbvgn患者肾脏病变无明显影响.然而,我们的资料为小样本研究,我们认为,有必要进行深入研究,以明确病毒因素在hbvgn发病中的作用.参考文献13kimse.parkyh,chungwy.studyonhepatitisbviruspre-s/sgenemutationsofrenaltissuesinchildrenwithhepa