乙肝病毒前S1抗原检测与HBV-DNA相关性研究.doc

乙肝病毒前s1抗原检测与hbv-dna相关性研究?56?湖北中医药大学journalofhubeiuniversityofchinesemedicine2011年8月第13卷第4期august,2011,vo1.13,no.4【临证经纬】乙肝病毒前s1抗原检测与hbvdna相关性研究杨莉,许倩倩,姚群峰(1.武汉市汉阳区妇幼保健院,湖北武汉430050;2.湖北中医药大学检验学院,湖北武汉430065)关键词:乙型肝炎病毒;前sl抗原;hbvdna中图分类号:r512.6文献标识码:a文章编号:1008-987x(2011)04-0056-02乙型肝炎在全世界范围内广泛流行,我国是乙肝的高发区.乙型肝炎病毒(hbv)是乙肝的病原体,目前临床上常用乙肝血清标志物(hbvm)定性检测指导临床诊断和疗效观察.虽然hbvdna定量检测对于确诊hbv感染与治疗具有重要意义,但因其检测技术条件及成本较高,并未广泛应用.乙肝病毒hbv表面抗原(hbsag)基因组分别编码s,前s1,前s23种蛋白.前s1位于外膜蛋白的最前端,其n末端游离,c末端与前s2相连.前s1蛋白主要存在于血清中完整的hbv颗粒(dane颗粒)表面,具有较强的抗原性(preslag).研究显示,前s1蛋白能够反映乙肝病毒在体内复制感染的状况,可以作为hbv在体内复制的指标.笔者检测了218例乙肝患者pres1ag,hbv血清标志物以及hbvdna,同时探讨preslag检测与hbv血清标志物,hbvdna的临床意义.1材料与方法1.1标本来源218例乙肝患者血清来自2009年5月一2010年6月武汉市汉阳区妇幼保健院就诊患者,清晨抽取空腹静脉血收集血清,检测排除甲,丙,丁及戊等肝炎,其中男143例,女75例,年龄1568岁,平均38.4岁.85例对照血清来自健康体检者,hbv标志物均为阴性,a【.t<40u/l.1.2试剂与仪器hbv血清标志物检测试剂盒(购自上海实业科华生物试剂有限公司),pres1的检测试剂(购自中科院上海生化研究所).hbvdna试剂盒(购自深圳达安生物公司).rochelightcycler荧光定量pcr仪.1.3方法elisa法检测hbv血清标志物(hbvm),双抗夹心法检测preslag,方法严格按照其试剂盒使用说明书操作.荧光定量pcr法检测hbvdna,以hbvdna>5.0x10copy/ml为阳性.统计学方法采用配对计数资料检验.2结果与分析2.1218例乙肝患者血清标志物检测结果218例乙肝患者血清标志物检测结果呈现4种模式,其中大三阳106例,小三阳8l例.见表1.表1乙肝血清标志物检测结果2.2preslag和hbvdna的检测结果结果显示pres1检出率与hbvdna检出率有高度相关性.见表2.表2piesl和hbvdna的结果基金项目:湖北省教育厅优秀中青年科技创新团队项目(t200607);湖北省教育厅科研项目(q2oo516001).作者简介:杨莉(1968一),女,武汉市汉阳妇幼保健院主管检验技师,研究方向:医学检验.通讯作者:姚群峰(1967一),男,医学博士,湖北中医药大学检验学院教授.电子信箱:.2011年8月第13卷第4期august2011,vo1.13,no.4湖北中医药大学joumalofhubeiuniversitv0fchinesemedicine57?2.3血清preslag与hbeag的阳性率218例hbsag阳性乙肝患者中,preslag阳性率为74.3%(162/218),hbeag阳性率51.4%(112/218).preslag阳性检出率明显高于hbeag阳性检出率(p<0.o1).在112例hbeag阳性标本中检出pre一$1ag阳性96例,符合率为85.7%.见表3.表3pies1ag与hbeag的阳性率比较3讨论乙肝病毒外膜蛋白pres1在病毒感染,复制和刺激机体产生免疫反应等方面起着十分重要的作用.乙肝病毒附着于肝细胞膜上,重要的介导部位是前s1蛋白的氨基酸21片段一47片段,含有前s1蛋白主要存在于dane颗粒上,并且前s1蛋白只存在于完整的乙肝病毒颗粒上,具有高度免疫原性,与hbv病毒的复制密切相关.目前认为preslag在hbv复制和入侵肝细胞的机制中起重要作用,所以又被作为一个新的判断hbv复制和具有传染性的标志物,在临床上乙肝患者具有重要价值.笔者检测了218例乙肝患者pres1ag,hbv血清标志物以及hbvdna,血清标志物主要呈现4种模式.表2显示,106例模式i患者pres1蛋白与hbvdna阳性率分别为86.8%,87.7%,说明本组患者存在hbv病毒在体内复制活跃,具有较强传染性,与文献报道一致;81例模式患者pres1蛋白与hbvdna阳性率分别为64.2%,66.7%,25例模式患者pres1蛋白与hbvdna阳性率分别为56.o%,56.0%,表明虽然血清hbeag阴性或hbeag转为抗hbe阳性,但病毒并未停止复制,其可能原因是部分患者出现病毒前c区基因变异,也显示出pres1蛋白的敏感性高于hbeag.对照组85例标本中仍然存在pres1蛋白与hbvdna的阳性例数,这可能是乙肝病毒发生前c末端变异而逃避了乙肝病毒血清标志物方法的检测,使hbeag不能表达,但病毒本身仍存在复制能力,改变了过去认为凡hbeag转化为抗一hbe即预示hbv复制中止,病变缓解的传统观念.pres1ag不受hbeag变异的影响,能更真实地反映病毒的复制情况,因此pres1ag是评估hbv复制状态的一个重要指标,是对e系统检测的重要补充.从表2中还可以发现pres1ag的阳性例数与hbvdna的阳性例数高度正相关,但hbvdna检测作为评价hbv复制能力的金标准尚不能完全被pres1ag取代,还需要开展大样本量的进一步深入研究.表3显示,1l2例hbeag阳性患者中,96例患者preslag阳性,阳性率达85.7%,显示二者具有较好的一致性.此外,也有报道显示pres1ag还可以反映病毒的清除和转归,pres1与hbsag几乎同时出现,但在不同的随访时间其阴转率均高于hbsag,提示pres1在反映病毒清除,判断病情转归方面优于hbsag-sj.因此,临床检测preslag可以完善传统的乙肝病毒血清标志物检测体系,更为准确,敏感反映hbv在体内的复制状况及活跃程度,对于提高乙型肝炎的临床诊断水平以及疗效观察具有重要意义.参考文献:1徐蓓,姚光弼.血清乙型肝炎前sl抗原检测及其与病毒复制的关系j.中华实验与临床病毒学杂志,1997,11(2):117119.2闵福援,孙贵珍,王健,等.前sl蛋白在乙型肝炎诊断及判断预后中的重要作用j3.中华检验医学杂志,200,4,4(4):140142.3funkml,r0senbergdm,lokas.woadwideepidemiologyofhbeagnegativechronichepatitisbandassociatedprecoreandcorepromorvariantsj.jviralhepat,2002,9(1):5261.4闵福援,王健.前s1抗原在诊断乙肝病毒复制时的临床价值j.中华检验医学杂志,2005,28(6):584586.5李琴,孙桂珍,魏玉香,等.presi蛋白与乙肝病毒dna和e抗原在诊断乙肝病毒复制时的对比j.中华肝脏病杂志,2004,12(3):134136.6卜国平,开远胜.乙型肝炎病毒前s1抗原的实验室检测及其在临床上的应用j.实用肝脏病杂志,2007,10(4):250251.