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文档简介
实验八 人类X染色质 和果蝇唾腺染色体观察,果蝇唾腺染色体观察,实验目的,学习分离果蝇三龄幼虫唾腺及压制唾腺染色体标本的方法 观察多线染色体的特征:a.巨大 b.体细胞同源染色体配对,染色体只有半数 c.各染色体异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心 d.横纹有深浅疏密的不同,各自对应排列,意味着基因的排列 根据唾腺染色体上带纹的形态和排列识别不同染色体,以研究和鉴别果蝇染色体结构的变异,实验原理,唾腺染色体处于永久性间期中的一种体细胞同源染色体配对状态,比普通染色体大得多, 称巨大染色体. 唾腺染色体经过多次复制并不分开,约有1000-4000根染色体丝的拷贝,因此又称为“多线染色体”.双翅目昆虫某些物种幼虫唾腺细胞内普遍存在,是研究唾腺染色体常用的材料 .,果蝇唾腺染色体特点: 巨大,是多线染色体; 正常:间期DNA复制 两条染色单体 着丝点裂开 子染色体 核分裂 胞质分裂 果蝇:有丝分裂停止在分裂间期,DNA不断自我复制,着丝点不裂开 同源染色体紧密配对:体细胞联会,所以染色体只呈现单倍数; 形成染色中心,从染色体中心处伸出5条长臂,1条短臂; 染色后,出现一系列宽窄不同、染色深浅不一的横纹; 蓬突,实验材料,普通果蝇野生型或任何突变型的三龄幼虫活体.选择行动迟缓,肥大,爬上管壁的三龄幼虫做标本最佳,实验器具和药品,实验器具:解剖镜,显微镜,解剖针,载玻 片,盖玻片,吸水纸 药 品:生理盐水(0.7%Nacl),1mol/L 盐酸、卡宝品红,实验步骤,幼虫的培养:较低温度下培养(16-18),每隔2天将羽化的新蝇倒出.取充分发育的三龄幼虫 唾腺分离:取三龄幼虫放在滴有一滴生理盐水的载玻片上,两手各持一支解剖针.一支针压在虫体前端1/3处,固定幼虫,另一针按在头部里突处(口器)稍后,轻缓前移将头部扯开,唾腺也随之扯开,可看到一对透明而微白的长形小囊即为唾腺。唾腺的侧面常带少量白色沫状脂肪体,用针剥离。,实验步骤,解离:用吸水纸小心吸去生理盐水,加1滴1N HCl,浸23分钟,使组织疏松,以便压片时细胞分散,染色体散开。 染色压片:将唾腺移到另一干净的预先滴有卡宝品红的载玻片上染色10min后,取盖玻片和双面刀片,双面刀片放于盖玻片和载玻片间,吸去多余染液,,实验步骤,盖上盖玻片,在盖片上覆一条吸水纸,用拇指适当用力压片。(注意:在拨取和染色过程中勿使腺体干燥) 观察:低倍镜观察选出典型细胞后用高倍镜观察,可以看到五条弯曲展开的染色体臂和一个点状的第6号染色体对,它们在着丝点构成染色中心并向外展开,自染色体的终端可分辨横向
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