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23色谱分离条件的选择,分高度（resolution） 一个混合物能否为色谱柱所分离，取决于固定相与混合物中各组分分子间的相互作用的大小是否有区别（对气一液色谱）。但在色谱分离过程中各种操作因素的选择是否合适，对于实现分离的可能性也有很大影响。因此在色谱分离过程中，不但要根据所分离的对象选择适当的固定相，使其中各组分有可能被分离，而且还要创造一定的条件，使这种可能性得以实现，并达到最佳的分离效果。,两个组分怎样才算达到完全分离？首先是两组分的色谱峰之间的距离必须相差足够大。若两峰间仅有一定距离，而每一个峰却很宽，致使彼次重叠，如图26（a）的情况，则两组分仍无法完全分离，所以第二是峰必须窄。只有同时满足这两个条件时，两组分才能完全分离如图26（b）所示。,为判断相邻两组分在色谱柱中的分离情况，可用分离度R作为色谱柱的分离效能指标。其定义为相邻两组分色谱峰保留值之差与两个组分色谱峰峰底宽度总和之半的比值： 式中tR（2）和tR（1）分别为两组分的保留时间（也可采用调整保留时间），Y1和Y2为相应组分的色谱峰的峰底宽度，与保留值单位相同。R值越大，就意味着相邻两组分分离得越好。两组分保留值的差别，主要决定于固定液的热力学性质；色谱峰的宽窄则反映了色谱过程的动力学因素，柱效能高低。因此，分离度是柱效能、选择性影响因素的总和，故可用其作为色谱柱的总分离效能指标（over-all resolution efficiency）,从理论上可以证明，若峰形对称且满足于正态分布，则当R=1时，分离程度可达 98；当 R=1.5时，分离程度可达 99.7。因而可用 R 1.5来作为相邻两峰已完全分开的标志。 当两组分的色谱峰分离较差，峰底宽度难于测量时，可用半峰宽代替峰底宽度，并用下式表示分离度 ： 与R的物理意义是一致的，但数值不同， R 0.59R，应用时要注意所采用分离度的计算方法。,色谱分离基本方程式,色谱分析中，对于多组分混合物的分离分析，在选择合适的固定相及实验条件时，主要针对其中难分离物质对来进行，这就是说要抓主要矛盾。对于难分离物质对，由于它们的保留值差别小，可合理地认为 Y1=Y2=Y，k1k2=k。由下式得： 可推出,由上边公式及 tR = tM(1+k) 整理后得到： 上式称色谱分离基本方程式，它表明R随体系的热力学性质（a和k）的改变而变化，也与色谱柱条件(n改变）有关。,tR = tM(1+k) 若将上式并将式整理可得n与n有效（有效理论塔板数）的关系式及用有效理论塔板数表示的色谱分离基本方程式,1分离度与柱效的关系（往效因子） 分离度与n的平方根成正比。当固定相确定，亦即被分离物质对的确定后，欲使达到一定的分离度，将取决于n。增加征长可改进分离度，但增加柱长使各组分的保留时间增长，延长了分析时间并使峰产生扩展，因此在达到一定的分离度条件下应使用短一些的色谱枉。除增加枉长外，增加n值的另一办法是减小柱的H值，这意味着应制备一根性能优良的柱子，并在最优化条件下进行操作,2分离度与容量比的关系（容量因子） k值大一些对分离有利，但并非越大越有利。观察表22数据，可见是k10时，k（k十 1）的改变不大，对 R的改进不明显，反而使分析时间大为延长。因此是值的最佳范围是1k 10，在此范围内，既可得到大的 R值，亦可使分析时间不至过长。使峰的扩展不会太严重而对检测发生影响。,使k改变的方法有：改变柱温和改变相比。前者会影响分配系数而使k改变；改变相比包括改变固定相量VS及柱的死体积VM。其中VM影响k（1十k），当组分的保留值较大而 VM又相当小时，k（1十k）随 VM增加而急剧下降，导致达到相同的分离度所需n值大为增加。由此可见，使用死体积大的柱子，分离度要受到大的损失。采用细颗粒固定相，填充得紧密而均匀，可使柱死体积降低。,3分离度与往选择性的关系（选择因子） 是柱选择性的量废，越大，柱选择性越好，分离效果越好。在实际工作中，可由一定的值和所要求的分离度，用式 计算柱子所需的有效理论塔板数。表23列出了根据式计算得到的一些结果。这些结果表明，分离度从1.0增加至1.5，对应于各值所需的有效理论塔板数大致增加一倍。从表23还可看出，在一定的分离度下，大的值可在有效理论塔板数小的色谱柱上实现分离。例如，当a值为1.25时，获得分离度为1的色谱柱的有效理论塔板数为400，只要把值增至150，在此柱上的分离度就可增大到1.50以上。因此，增大a值是提高分离度的有效办法。,当值为1时，分离所需的有效理论塔板数为无穷大，故分离不能实现。在值相当小的情况下，特别是11时，实现分离所需的有效理论塔板数很大，此时首要的任务应当是增大当值.如果两相邻峰的值已足够大，即使色谱柱的理论塔板数较小，分离亦可顺利地实现。 增加简便而有效的方法是通过改变固定相，使各组分的分配系数有较大 差别。,分离操作条件的选择,1载气及其流速的选择 对一定的色谱柱和试样，有一个最佳的载气流速，此时柱效最高，根据式 H = A十(B/u)十Cu (2-22) 用在不同流速下测得的塔板高度H对流速U作图，得HU曲线图（图27）。在曲线的最低点，塔板高度H最小（H最小）。此时柱效最高。该点所对应的流速即为最佳流速u最佳，U最佳及H最小可由式（222）微分求得：,得出 ： u最佳 =（B/C）1/2,图27塔板高度与载气线速的关系,在实际工作中，为了缩短分析时间，往往使流速稍高于最佳流速。从式（222）及图27可见，当流速较小时，分子扩散项（B项）就成为色谱峰扩张的主要因素，此时应采用相对分子质量较大的载气（N2，Ar），使组分在载气中有较小的扩散系数。而当流速较大时，传质项（C项）为控制因素，宜采用相对分子质量较小的载气（H2，He），此时组分在载气中有较大的扩散系数，可减小气相传质阻力，提高柱效。选择载气时还应考虑对不同检测器的适应性。 对于填充柱， N2的最佳实用线速为 1012 cms-1； H2为 15 20 cms-1 。通常载气的流速习惯上用柱前的体积流速（mLmin-1）来表示，也可通过皂膜流量计在往后进行测定。若色谱柱内径为3mm，N2的流速一般为4060 mLmin-1，H2的流速为 6090 mLmin-1。,2住温的选择 柱温是一个重要的操作变数，直接影响分离效能和分析速度。首先要考虑到每种固定液都有一定的使用温度。往温不能高于固定液的最高使用温度，否则固定液挥发流失。 柱温对组分分离的影响较大，提高拄温使各组分的挥发靠拢，不利于分离，所以，从分离的角度考虑，宜采用较低的柱温。但柱温太低，被测组分在两相中的扩散速率大为减小，分配不能迅速达到平衡，峰形变宽，柱效下降，并延长了分折时间。选择的原则是：在使最难分离的组分能尽可能好的分离的前提下，尽可能采取较低的柱温，但以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。具体操作条件的选择应根据不同的实际情况而定。,对于高沸点混合物（300一400），希望在较低的柱温下（低于其沸占100200）分析。为了改善液相传质速率，可用低固定液含量（质量分数 1 3）的色谱柱，使液膜薄一些，但允许最大进样量减小，因此应采用高灵敏度检测器。对于沸点不太高的混合物（200300），可在中等柱温下操作，固定液质量分数510，柱温比其平均沸点低100。 对于沸点在100200的混合物，柱温可选在其平均沸点23左右，固定液质量分数 10 15。 对于气体、气态烃等低沸点混合物，柱温选在其沸点或沸点以上，以便能在室温或 50以下分析。固定液质量分数一般在 1525。,对于沸点范围较宽的试样，宜采用程序升温（programmed temperature），即柱温按预定的加热速度，随时间作线性或非线性的增加。升温的速度一般常是呈线性的，即单位时间内温度上升的速度是恒定的，例如每分钟2，4， 6，等等。在较低的初始温度，沸点较低的组分，即最早流出的峰可以得到良好的分离。随柱温增加，较高沸点的组分也能较快地流出，并和低沸点组分一样也能得到分离良好的尖峰。图28为宽沸程试样在恒定柱温及程序升温时的分离结果比较。图（a）为柱温（tc）恒定于45时的分离结果，此时只有五个组分流出色谱柱，但低沸点组分分离良好；图（b）为柱温恒定于120时的分离情况，因柱温升高，保留时间缩短，低沸点组分峰密集，分离不好；图（C）为程序升温时的分离情况，从对起始，升温速度为5min-1，低沸点及高沸点组分都能在各自适宜的温度下得到良好的分离。,3固定法的性质和用量 固定液的性质对分离是起决定作用的。在这里讨论一下固定液的用量问题。一般来说，担体的表面积越大，固定液用量可以越高，允许的进样量也就越多。但从式（225）可见， 为了改善液相传质，应使液膜薄一些。目前填充色谱柱中盛行低固定波含量的色谱柱。固定液液膜薄，柱效能提高，并可缩短分析时间。但固定液用量太低，液膜超薄，允许的进样量也就越少。因此固定液的用量要根据具体情况决定。 固定液的配比（指固定液与担体的质量比）一般用5:100到25:10O，也有低于5:100的。不同的担体为要达到较高的柱效能，其固定液的配比往往是不同的。一般来说，担体的表面积越大，固定液的含量可以越高。,4担作的性质和粒度 担体的表面结构和孔径分布决定了固定液在担体上的分布以及液相传质和纵向扩散的情况。要求担体表面积大，表面和孔径分布均匀。这样，固定液涂在担体表面上成为均匀的薄膜，液相传质就快，就可提高柱效。对担体粒度要求均匀、细小，这样有利于提高柱效。但粒度过细，阻力过大，使柱压降增大，对操作不利。对36 mm内径的色谱柱，使用 6080目的担体较为合适。,5进样时间和进样量 进样速度必须很快，一般用注射器或进样阀进样时，进样时间都在一秒钟以内。若进样时间过长，试样原始宽度变大，半峰宽必将变宽，甚至使峰变形。 进样量一般是比较少的。液体试样一般进样0.15 L。气体试样0.110 mL。进样量太多，会使几个峰叠在一起，分离不好。但进样量太少，又会使含量少的组分因检测器灵敏度不够而不出峰。最大允许的进样量，应控制在峰面积或峰高与进样量呈线性关系的范围内。,6气化温度 进样后要有足够的气化温度，使液体试样迅速气化后被载气带人柱中。在保证试样不分解的情况下，适当提高气化温度对分离及定量有利，尤其当进样量大时更是如此。一般选择气化温度比往温高3070。,24固定相及其选择,在气相色谱分析中，某一多组分混合物中各组分能否完全分离开，主要取决于色谱柱的效能和选择性，后者在很大程度上取决于固定相选择得是否适当，因此选择适当的固定相就成为色谱分析中的关键问题。,气一固色谱固定相 在气相色谱分析中，气液色谱法的应用范围广，选择性好；但在分离常温下的气体及气态烃类时，因为气体在一般固定液中溶解度甚小，所以分离效果并不好。若采用吸附剂作固定相，由于其对气体的吸附性能常有差别，因此往往可取得满意的分离效果。 在气一固色谱法中作为固定相的吸附剂，常用的有非极性的活性炭，弱极性的氧化铝，强极性的硅胶等。它们对各种气体吸附能力的强弱不同，因而可根据分析对象选用。一些常用的吸附剂及其一般用途列于表24中。由于吸附剂种类不多，不是同批制备的吸附剂的性能往往又不易重复，且进样量稍多时色谱峰就不对称，有拖尾现象等等。近年来，通过对吸附剂表面进行物理化学改性，研制出表面结构均匀的吸附剂（例如石墨化碳黑、碳分子筛等），不但使极性化合物的色谱峰不致拖尾，而且可以成功地分离一些顺、反式空间异构体。,高分子多孔微球（国产商品牌号为GDX）是以二乙烯基苯作为单体，经是浮共聚所得的交联多孔聚合物，是一种应用日益广泛的气固色谱固定相。例如有机物或气体中水的含量测定，若应用气液色谱柱，由于组分中含水会给固定液。担体的选择带来麻烦与限制；若采用气固色谱柱，由于水的吸附系数很大，以致于实际上无法进行分析；而采用高分子多孔微球固定相，由于多孔聚合物和羟基化合物的亲和力极小，且基本按分子质量顺序分离，故相对分子质量较小的水分子可在一般有机物之前出峰，峰形对称，特别适于分析试样中的痕量水含量，也可用于多元醇、脂肪酸、暗类等强极性物质的测定。由于这类多孔微球具有耐腐蚀和耐辐射性能，可用以分析如HCI、NH3、Cl2、SO2等。高分子多孔微球随共聚体的化学组成和共聚后的物理性质不同，不同商品牌号具有不同的极性及应用范围（表25）。该固定相除应用于气固色谱外，又可作为担体涂上固定液后使用。,气一液色谱固定相,担作 担体（载体）应是一种化学情性、多孔性的固体颗粒，它的作用是提供一个大的惰性表面，用以承担固定液，使固定液以薄膜状态分布在其表面上。对担体有以下几点要求。 （1）表面应是化学情性的，即表面没有吸附性或吸附性很弱，更不能与被测物质起化学反应。 （2）多孔性，即表面积较大，使固定液与试样的接触面较大。 （3）热稳定性好，有一定的机械强度，不易破碎。 （4）对担体粒度的要求，一般希望均匀、细小，这样有利于提高柱效。但颗粒过细，使柱压降增大，对操作不利。一般选用脚60目，6080目或80100目等。,气一液色谱中所用担体可分为硅藻土型和非硅藻土型两类。常用的是硅藻土型担体，它又可分为红色担体和白色担体两种。它们都是天然硅藻土经锻烧而成，所不同的是白色担体在锻烧前于硅藻土原料中加人少量助熔剂，如碳酸钠。这两种硅藻土担体的化学组成和内部结构基本相似，但它们的表面结构却不相同。 红色担体（如 6201红色担体、201红色担体，C22保温砖等）表面孔穴密集，孔径较小，表面积大（比表面积为 4.0 m2g-1），平均孔径为 1m。由于表面积大，涂固定液量多，在同样大小柱中分离效率就比较高。此外，由于结构紧密，因而机械强度较好。缺点是表面有吸附活性中心。如与非极性固定液配合使用，影响不大，分析非极性试样时也比较满意；然而与极性固定液配合使用时，可能会造成固定液分布不均匀，从而影响柱效，故一般适用于分析非极性或弱极性物质。,白色担体（如 101白色担体等）则与之相反，由于在锻烧时加入了助熔剂（碳酸钠），成为较大的疏松颗粒，其机械强度不如红色担体。表面孔径较大，约89m ，表面积较小，比表面积只有1.0 m2g-1。但表面极性中心显著减少，吸附性小，故一般用于分析极性物质。,硅藻土型担体表面含有相当数量的硅酸基团 等基团，具有细孔结构，并呈现不同的 pH，故担体表面既有吸附活性，又有催化活性。如涂上极性固定液，会造成固定液分布不均匀。分析极性试样时，由于与活性中心的相互作用，会造成色谱峰的拖尾。而在分析据烯、二烯。含氮杂环化物、氨基酸衍生物等化学活泼的试样时，都有可能发生化学变化和不可逆吸附。因此在分析这些试样时，担体需加以钝化处理，以改进担体孔隙结构，屏蔽活性中心，提高柱效率。处理方法可用酸洗、碱洗、硅烷化（silanization）等。,（1）酸洗、碱洗即用浓盐酸、氢氧化钾甲醇溶液分别浸泡，以除去铁等金属氧化物杂质及表面的氧化铝等酸性作用点。 （2）硅烷化用硅烷化试剂和担体表面的硅醇、硅醚基团起反应，以消除担体表面的氢键结合能力，从而改进担体的性能。常用的硅烷化试剂有二甲基二氯硅烷和六甲基二硅烷胶，其反应为：,担体的选择往往对色谱分离很有影响。例如分析试样中含有 109 gL-1的4个有机磷农药，若用未处理的担体，徐3 OV1固定液则不出峰；用白色硅烷化相体，出三个峰，柱效很低；用酸洗DMCS硅烷化（二甲基二氯硅烷硅烷化）的担体，出四个峰，且往效很高。但若固定液质量分数在 10左右，进行常量分析，则未处理的白色担体效果也很好。选择担体的大致原则为： （1）当固定液质量分数大于5时，可选用硅藻土型（白色或红色）担体。 （2）当固定液质量分数小于5时，应选用处理过的担体。 （3）对于高沸点组分，可选用玻璃微球担体。 （4）对于强腐蚀性组分，可选用氟担体。,固定液 A对固定液的要求。 （1）挥发性小，在操作温度下有较低蒸气压，以免流失。 （2）热稳定性好，在操作温度下不发生分解。在操作温度下呈液体状态。 （3）对试样各组分有适当的溶解能力，否则易被载气带走而起不到分配作用。 （4）具有高的选择性，即对沸点相同或相近的不同物质有尽可能高的分离能力。 （5）化学稳定性好，不与被测物质起化学反应。,为了满足第一、二个要求，固定液一般都是高沸点的有机化合物，而且各有其特定的使用温度范围，特别是最高使用温度极限。可用作固定液的高沸点有机物很多，现在已有上千种固定液，而且数量还在增加。表25列出了部分较常用的固定液，它们的性质，最高使用温度和主要用途。 为了满足第35个要求，就必须针对被测物质的性质选择合适的固定液。,B固定液的分离特征。 固定液的分离特征是选择固定液的基础。固定液的选择，一般根据“相似相溶”原理进行，即固定液的性质和被测组分有谋些相似性时，其溶解度就大。在气相色谱中常用“极性”来说明固定液和被测组分的性质。由电负性不同的原子所构成的分子，它的正电中心和负电中心不重合时，就形成具有正负极的极性分子。如果组分与固定液分子性质（极性）相似，固定液和被测组分两种分子间的作用力就强，被测组分在固定液中的溶解度就大，分配系数就大，也就是说，被测组分在固定液中溶解度或分配系数的大小与被测组分和固定液两种分子之间相互作用力的大小有关。,分子间的相互作用力包括静电力、诱导力、色散力和氢键力等。 （l）静电力（定向力）这种力是由于极性分子的永久偶极间存在静电作用而引起的。在极性固定液柱上分离极性试样时，分子间的作用力主要就是静电力。被分离组分的极性越大，与固定液间的相互作用力就越强，因而该组分在往内滞留的时间就越长。因为静电力的大小与绝对温度成反比，所以在较低柱温下依靠静电力有良好选择性的固定液，在高温时选择性就变差，亦即升高柱温对分离不利。 （2）诱导力极性分子和非极性分子共存时，由于在极性分子永久偶极的电场作用下，非极性分子极化而产生诱导仍极，此时两分子相互吸引而产生诱导力。这个作用力一般是很小的。在分离非极性分子和可极化分子的混合物时，可以利用极性固定液的诱导效应未分离这些混合物。,例如羊和环己烷的沸点很相近（8010和8081）。若用非极性固定液（例如液体石蜡）是很难将它们分离的。但苯比环己烷容易极化，所以用一个中等极性的邻苯二甲酸二辛酯固定液，使本产生诱导偶极，苯的保留时间是环己烷的15倍；若选用强极性的,一氧二丙睛固定液，则苯的保留时间是环己烷的63倍，这样就很易分离了。 （3）色散力非极性分子间虽没有静电力和诱导力相互作用，但其分子却具有瞬间的周期变化的偶极矩（由于电子运动、原子核在零点间的振动而形成的），只是这种瞬间偶极矩的平均值等于零，在宏观上显示不出偶极矩而已。这种瞬间偶极矩带有一个同步电场，能使周围的分子极化，被极化的分子又反过来加剧瞬间偶极矩变化的幅度，产生所谓色散力。,对于非极性和弱极性分子而言，分子间作用力主要是色散力。例如用非极性的角鲨烷固定液分离qq烃类时，它的色谱流出次序与色激力大小有关。由于色散力与沸点成正比，所以组分基本按沸点顺序分离。 （4）氢键力也是一种定向力，当分子中一个H原子和一个电负性（原子的电负性是原子吸引电子的能力，电负性愈大，吸引电子的能力愈强广良大的原子以X表示，如F,O，N等）构成共价键时，它又能和另一个电负性很大的原子以Y表示）形成一种强有力的有方向性的静电吸引力，这种能力就叫氢键作用力。这种相互作用关系表示为“XHY，X，H之间的实线表示共价键，H，Y之间的点线表示氢键。X，Y的电负性愈大，也即吸引电子的能力愈强，氢键作用力就愈强。同时，氢键的强弱还与Y的半径有关，半径愈小，愈易靠近X-H，因而氢键愈强。氢键的类型和强弱次序为：,由上述可见，分子间的相互作用力是与分子的极性有关的。固定液的极性可以采用相对极性（reLative polarity）P来表示。这种表示方法规定强极性的固定液,一氧二丙睛的相对极性P=100，非极性的固定液角鲨烷的相对极性P=100，然后用一对物质正丁烷一丁二烯或环己烷一苯进行试验，分别测定这一对试验物质在,一氧二丙睛，角鲨烷及欲测极性固定液的色谱柱上的调整保留值，然后按下列两式计算欲测固定液的相对极性Px：,式中下标1、2和x分别表示,一氧二丙睛、角鲨烷及欲测固定液。这样测得的各种固定液的相对极性均在0100之间，为了便于在选择固定液时参考，又将其分为五级，每 20为一级，P在 0+1间的为非极性固定液，+l+2为弱极性固定液，3为中等极性固定液，45为强极性固定液，非极性亦可用 “-”表示。 应用相对极性Px表征固定液性质，显然并未能全面反映被测组分和固定液分子间的全部作用力，为能更好地表征固定液的分离特性，罗骨耐特（Rohrschneider L，罗氏）及麦克雷诺（McReynolds W O，麦氏）在上述相对极性概念的基础上提出了改进的固定液特征常数。,罗胥耐特选用了5种代表不同作用力的化合物作为探测物（probe），即苯（电子给予体）、乙醇（质子给予体）、甲乙酮（偶极定向力）、硝基甲烷（电子接受体）和毗陡（质子接受体），以非极性固定液角鲨烷为基准来表征不同固定液的分离性质罗氏常数。麦氏在罗氏工作的基础上，选用10种物质来表征固定液的分离特性。实际上通常采用麦氏的前5种探测物，即苯、丁醇、2一戊酮、硝基丙烷和吡啶测得的特征常数（麦氏常数）已能表征固定液的相对极性。麦氏常数也以角鲨烷固定液为基准，其计算方法为,式中采用重现性好的保留指数I来代替调整保留值，下标p为待测固定液，S为角鲨烷固定液，I苯P为以苯作为探测物时在待测固定液上的保留指数，I苯S为以苯作探测物时在角鲨烷固定液上的保留指数，其余类同。显而易见，两者的差值可表征以标准非极性固定液角鲨烷为基准时欲测固定液的相对极性麦氏常数，以X，Y，Z，U，S符号表示各相应作用力的麦氏常数。将这5种探测物I值之和 称为总极性，其平均值称为平均极性。固定液的总极性越大，则极性越强；不同固定液的麦氏常数相近，表明它们的极性基本相同；麦氏常数值越小，则固定液的极性越接近于非极性固定液的极性；麦氏常数中某特定值如 X或Y值越大，则表明该固定液对相应的探测物（作用力）所表征的性质越强。因而利用麦氏常数将有助于固定液的评价、分类和选择。,表26列出一些常用固定液的麦氏常数。较详细的麦氏常数表可从气相色谱手册查找。表26中固定液的极性随序号增大而增加。其中标有序号的 12种是李拉（LearyJ J）用其近邻技术（nearest neighbor technique）从品种繁多的固定液中选出分离效果好、热稳定性好、使用温度范围宽，有一定极性间距的典型固定液，它对固定选择是有用的依据。,C固定液的选择 在固定液选择中“相似相溶”原理是具有一定实际意义并能给予初学者一个简单清晰的思考途径。应用此原理的色谱流出规律为： （l）分离非极性物质，一般选用非极性固定液，这时试样中各组分按沸点次序先后流出色谱柱，沸点低的先出峰，沸点高的后出峰。 （2）分离极性物质，选用极性固定液，这时试样中各组分主要按极性顺序分离，极性小的先流出色谱柱，极性大的后流出色谱柱。 （3）分离非极性和极性混合物时，般选用极性固定液，这时非极性组分先出峰，极性组分（或易被极化的组分）后出峰。 （4）对于能形成氢键的试样，如醇、酚、胶和水等的分离。一般选择极性的或是氢键型的固定液，这时试样中各组分按与固定液分子间形成氢键的能力大小先后流出，不易形成氨键的先流出，最易形成氨键的最后流出。,然而，相似相溶原理是一个原则性提法，应用时有一定局限性。例如，欲分离组分为乙醇（沸点78）和乙酸乙酯（沸点77）的混合物，根据相似相溶原理，则固定液应为醇类或酯类，比较聚乙二醇十八醚、苯二甲酸二癸酯和聚乙二醇一20 000的麦氏常数（列于表 26），若将乙醇比拟为丁醇探测物、乙酸乙酯比拟为2一戊酮探测物，它们相应在醚类固定液上Y与Z比值为1.6，在酯类固定液上为1.2，在醇类固定液上为1.5，其结果反而是醚类固定液分离效果好。从这一简例中可显示麦氏常数在固定液选择上的作用。 对于试样性质不够了解的情况，一种较简便且实用的方法是由前述李拉提出的12种固定液（表26）中选出，一般选用4种固定液（SE30，DC710， PEG20M，DEGS），以适当的操作条件进行色谱初步分离，观察本知样分离情况，然后进一步按12种固定液的极性程序作适当调整或更换，以选择较适宜的一种固定液。,值得注意的是毛细管往气相色谱现在已得到广泛应用。由于毛细管柱的柱效很高，如以每米 3 000理论塔板数计，50 m的毛细管柱具有 15万块理论塔板，那么 a 1.015的难分离物质对已可得到分离，所以有人主张大部分分析任务可用三根毛细管柱完成：甲基硅橡胶柱（非极性，I一217）、三氟丙基甲基聚硅氧烷柱（中等极性，I1500）、聚乙二醇一20M柱（中强极性，I2 308）。因而固定液选择就变得容易得多。但还有少数分析问题，如高沸点多组分试样、沸点结构极相近的对映异构体等还需选用特殊的。耐高温、高选择性固定液。鉴于分子的手性是生命现象的基础，各种类型手性固定相的研制已引起广泛关注并取得了成果，使气相色谱在生命物质的分离、分析中起重要作用。,25气相色谱检测器,检测器的作用是将经色谱柱分离后的各组分按其特性及含量转换为相应的电讯号。因此检测器是检知和测定试样的组成及各组分含量的部件，是气相色谱仪中的主要组成部分。 根据检测原理的不同，可将检测器分为浓度型检测器（concentration sensitive detector）和质量型检测器（mass flow rate sensitive detector）两种,浓度型检测器： 测量的是载气中某组分浓度瞬间的变化，即检测器的响应值和组分的浓度成正比。如热导地检测器和电子捕获检测器等。 质量型检测器： 测量的是截气中某组分进入检测器的速度变化，即检测器的 响应值和单位时间内进入检测器某组分的质量成正比。如氢火焰离子化检测器和火焰光度检测器等。,热导地检测器 热导地检测器（thermal conductivity detector），常用TCD表示。由于结构简单，灵敏度适宜，稳定性较好，而且对所有物质都有响应，因此是应用最广、最成熟的一种检测器。 1热导池的结构 热导地由油体和热敏元件构成，又可分双臂热导地和四臂热导地两种，参阅图29（a）和（b）。,热导地体用不锈钢块制成，有两个大小相同、形状完全对称的孔道，每个孔里固定一根金属丝（如钨丝，铂丝），两根金属丝长短、粗细、电阻值都一样，此金属丝称为热敏元件。为了提高检测器的灵敏度，一般选用电阻率高，电阻温度系数（即温度每变化l，导体电阻的变化值）大的金属丝或半导体热敏电阻作热导他的热敏元件。,钨丝具有较高的电阻温度系数（6.5 X 10-3 cm-1-1）和电阻率（5.5 X10-6cm），而且价廉，容易加工，因此是目前最广泛使用的热敏元件。钨丝的主要缺点是高温时容易氧化。为克服钨丝的氧化问题，可采用铼钨合金制成的热丝，铼钨丝抗氧化性好，机械强度、化学稳定性及灵敏度都比钨丝高。 热导池有两根钨丝（采用 220V，40W白炽灯钨丝）的是双臂热导地，其中一臂是参比池，一臂是测量池；有四根钨丝（采用220V，50W白炽灯钨丝）的是四臂热导池；其中两臂是参比池，两臂是测量池。 热导池体两端有气体进口和出口，参比池仅通过载气气流，从色谱柱出来的组分由载气携带进入测量地。,2热导地检测器的基本原理,热导地作为检测器，是基于不同的物质具有不同的热导系数。一些物质的热导系数见表27。当电流通过钨丝时，钨丝被加热到一定温度，钨丝的电阻值也就增加到一定值（一股金属丝的电阻值随温度升高而增加）。在末进试样时，通过热导地两个池孔（参比他和测量池）的都是载气。由于载气的热传导作用，使钨丝的温度下降，电阻减小，此时热导池的两个地孔中钨丝温度下降和电阻减小的数值是相同的。在试样组分进入以后，载气流经参比地，而载气带着试样组分流经测量地， 由于被测组分与载气组成的混合气体的热导系数和载气的热导系数不同，因而测量池中钨丝的散热情况就发生变化，使两个池孔中的两根钨丝的电阻值之间有了差异。此差异可以利用电桥测量出来。,气相色谱仪中的桥路，如图210所示。,图210中，R1和R2分别为参比池和测量池的钨丝的电阻，分别连于电桥中作为两臂。在安装仪器时，挑选配对的钨丝，使R1=R2 从物理学中知道，电桥平衡时， R1R4=R2R3。 当电流通过热导地中两臂的钨丝时，钨丝加热到一定温度，钨丝的电阻值也增加到一定值，两个池中电阻增加的程度相同。如果用氢气作载气，当载气经过参比他和测量油时，由于氢气的热导系数较大，被氢气传走的热量也较多，钨丝温度就迅速下降，电阻减小。在载气流速恒定时，在两只池中的钨丝温度下降和电阻值的减小程度是相同的，亦即 R1 =R2 ，,因此当两个池都通过载气时，电桥处于平衡状态，能满足（R1十RI）R4=（R2 R2）R3。此时 C，D两端的电位相等，E=0，就没有信号输出，电位差计记录的是一条零位直线，称为基线。如果从进样器注入试样，经色谱柱分离后，由载气先后带人测量地。此时由于被测组分与载气组成的二元导热系数与纯载气不同，使测量地中钨丝散热情况发生变化，导致测量地中钨丝温度和电阻值的改变，而与只通过纯载气的参比池内的钨丝的电阻值之间有了差异，这样电桥就不平衡，即 R1 R2 （R1十RI）R4 （R2 R2）R3,这时电桥C，D之间产生不平衡电位差，就有信号输出。载气中被测组分的浓度愈大，测量地钨丝的电阻值改变亦愈显著，因此检测器所产后的响应信号，在一定条件下与载气中组分的浓度存在定量关系。电桥上C，D间不平衡电位差用一自动平衡电位差计记录其响应电位，在记录纸上即可记录出各组分的色谱峰。 W1，W2，W3为三个电位器。当调节W1或W2时，都要影响电桥一臂的电位值，也就是影响电桥输出信号，因此W1，W2都可用来调节桥路平衡，其中W1为零点调节粗调，W2为零点调节细调。在进样前，先调节W1，W2，使记录器基线处在一定位置。W3用来调节桥路工作电流的大小。C，D之间的一串电阻是衰减电阻，用以调节输入记录器电位信号的大小，使得到大小合适的色谱峰。,3影响热导地检测器灵敏度的因素 （1）桥路工作电流的影响电流