大豆多肽生理活性研究进展.pdf

第 2 3卷第 6期 2 0 0 7年 1 1 月 。0 0 D & M A C H I N E R Y 0一 一 0 _ Vo 1 23 No 6 NO V2 0 0 7 大豆 多肽 生理活性研 究进展 T h e la t e s t a d v a n c e s i n r e s e a r c h o f p h y s io lo g ic a l a c t iv it i e s o f s o y p e p t id e s 陶红丽 朱志伟 江津津 T A O H 0 n g l i Z HU Z h i w e i J I A N G J i n -j i n ( 华南理工大学轻工与食品学院， 广东 广州5 1 0 6 4 0 ) ( C o l l e g e o fL i g h t I n d u s t r y a n d F o o d S c i e n c e ，S o u t h C h i n a U n i v e r s i t y of T e c h n o l o g y ，G u a n g z h o u ， G u a n g d o n g 5 1 0 6 4 0 ，C h i n a ) 摘要： 总结近 2年来国内外关于大豆多肽具有降血压、 降胆 固醇、 抗肥胖、 抗氧化和免疫调节等生理活性的研究进展。 关键词 ： 大豆蛋 白； 大豆 多肽 ； 生理 活性 Ab s t r a c t ： S o y p e p t i d e s s h o w d i v e r s e b i o l o g ic a l f u n c t i o n s s u c h a s a n t i h y - p e r te n s i o n， h y p o c h o l e s t e r o l e mi c ， a n t i o b e s i t y， a nt i o x i d a n t a n d i mmu n o mo d - u l a t o r y T h i s a r t i c l e r e v i e ws t h e c u r r e n t d e v e lo p me n t o f p h y s i o l o g i c a l a c t i v i t i e s o f s o y b i o a c t i v e p e p t i d e s i n r e s e n t t w o y e a rs Ke y wo r d s： S o y p r o t e i n； S o y p e p t i d e s ； P h y s i o l o g i c a l a c t i v i t i e s 大豆多肽是指大豆蛋白经过水解、 分离、 精制等过程而 获得的低肽混合物， 通常由3 6个氨基酸组成， 相对分子量 低于 1 0 0 0 ， 主要分布在 3 0 07 0 0范围内， 其中还含有少量 的游离氨基酸、 糖类、 无机盐等成分。目前的研究表明： 大 豆多肽具有降血压、 降胆固醇 、 抗肥胖、 抗氧化和调节免疫等 生理活性。 以大豆多肽为原料的功能食品在国外不断被开发出来。 我 国市场上也有不少大豆多肽功能产品 ， 取得 了一 定的研究 成果和经济效益。但仍属于初级开发阶段 ， 许多关键的问题 仍需要解决， 特别是对大豆多肽的分子结构与生理功能之间 的关系研究得不够深入， 作用机制还不是很清楚。本文针对 近 2 年来 国内外 大豆多肽 生理活性 方 面的研究 进展进 行 阐 述， 如降血压、 降胆固醇、 抗肥胖、 抗氧化和调节免疫等。 1 降血压 降血压肽是研究最多的一种生物活性肽， 它可以抑制 A C E ( 血管紧张素转换酶) 的活性 ， 从而达到降血压的目的。 A C E是一种非特定二肽酰羧肽酶， 通过凝乳酶一血管收缩素 系统， 可以把十肽血管紧张素 I 转化为八肽血管紧张素 ， 基金项目： 广东省海洋渔业局科技专项资助( 项 目 编号： B 2 0 6 1 8 5 0 ) 作者简 介： 陶红丽( 1 9 8 2一) ， 女 ， 华南理工 大学轻工 与食品学 院在 读 研究生。E - m a i l ： c t p h l s o h u c o n 收稿 日期 ： 2 0 0 7 0 9一I 1 而血管紧张素 可以使血管收缩 ， 血压升高， 引起高血压。 C h e n J R等 把大豆蛋白的消化产物经过多次色谱分 离， 鉴定出4 种生物活性肽， 其氨基酸序列由 E d m a n 程序检 测如下： I l e - A l a( I C 5 0=1 5 0 m M) ； T y r L e u - A l a G l y A s n G l n ( I C 5 0 =1 4 mM) ； P h e P h e L e u ( I C 5 0=3 7 mM) 和 I l e T y r L e u L e u ( I C m= 4 2 mM) 。 用这些多肽以2 0 k g B W的剂量去喂养 S HR大鼠( 自 发性高血压大鼠) ， 能显著降低 S H R大鼠的血压， 但是， 这些 肽对血压正常的大鼠没有降压作用。 We n d y 等 研究了 S P I ( 大豆分离蛋白) 在体外 胃蛋白 酶 一胰酶连续消化试验来确定 A C E抑制活性。试验表明： S P I 在 肖 化 3 h以后， 其 I c 5 0 值为( 0 2 80 0 4 ) m g mL ， 但未 消化的 S P I 在 0 7 3 m g m L ， 没有 A C E抑制活性。采用色谱 对 S P I 消化产物分离， 其具有 A C E抑制活性组分的 I c 。 范围 为( 0 1 3 0 0 3 0 9 30 0 8 ) m g m L 。尽管许多组分都具 有 A C E抑制活性， 但活性最强的是小分子和高疏水性的肽。 作者研究推测， S P I 在人体生理肠胃中可能会产生 A C E抑制 活性肽。C h e u n g 等 曾报道， c末端氨基酸的疏水性是影响 A C E抑制活性的最重要因素。Me i s e n 认为 这种 C末端为 疏水性氨基酸， 由于其高的疏水性和脯氨酸残基的存在而不 被分解 。 钟芳等 采用大孔吸附树脂、 凝胶过滤色谱从 S P I ( 大 豆分离蛋白) 中分离得到 1 1种具有 A C E抑制活性大豆肽组 分， 其中峰9的 A C E抑制活性最高， 在 0 2 m g m L的浓度 下， 其 A C E抑制率达到9 6 9 2 。然后通过分析型 R P - H P L C 对其 9组分进一步纯化， 其中组分 9 一 I具有最高的 A C E抑 制活性， 为9 8 4 6 ， 其含量约占组分9的5 0 以上。再对9 一 I 进行 L C M S序列分析， 得到其分子质量为7 7 2 4 ， 有 3种 可能 的结构 ： V I S T G A E P 、 V L S T G A E P和 A N S A G T V G P 。3种可 能的序列中前 2种是2个八肽的序列 ， 其 C末端都为 P r o ， N 】 3 3 维普资讯 专论与综述 2 0 0 7年第 6期 末端为 V a l ， 与 C h e u n g和 Me i s e n等人的结论一致， 是具有高 活性 的 A C E抑制肽 ； 第 3种是 一个 九肽 ， 其 C末端 也是 P r o ， 但 N末端为 A l a ， 因为丙氨酸属于脂肪族， 也是一种疏水性的 氨基酸， 所以推测也应具有较高的 A C E抑制活性。 2 降胆固醇活性 大豆蛋白具有显著的降血清胆固醇的效果， 已经得到较 多官方组织 ( 包括 美 国 F D A， 日本 厚生 省 ) 的认 可 。在 大多 数动物试验和临床试验中， 大豆多肽不仅可以降低胆固醇水 平 ， 而且 比大豆蛋 白效 果更强 。 P a k等 采用 H P L C( 高效液相 色谱) 对 1 1 S - g l o b u l i n ( 1 1 S - 大豆球蛋白) 的胃蛋白酶水解产物进行分离， 得到一种 有降胆固醇活性的肽， 其分子量为7 5 5 2 k D a ， 氨基酸序列为 I l e A l a V a 1 一 P r o G l y G l u V a l A l a 。其降胆固醇效果 由胆汁酸 结合率和 B 一 羟甲基戊二酰辅酶 A还原酶的抑制率来确定， 表明胆汁酸和水解多肽相结合， 会抑制胆固醇的再吸收， 刺 激血浆胆固醇的转化， 使胆固醇含量降低。 D u r a n t i 等 研究了人体肝癌细胞中的 3 - C o n g l y c i n i n ( B 一 伴大豆球蛋白) 和 g l o b u l i n ( 大豆球蛋白) 的 L D L ( 低密度脂蛋 白) 受体的 E调作用。结果表明： 13 - C o n g l y c i n i n的 仅亚基具 有最强的L D L 受体上调活性 ， 加速 L D L 在体内的分解代谢 ， 使血浆 L D L浓度 进一 步下 降， 促进 胆 固醇 的清除。用 3 - C o n g l y c i n i n 的仅亚基的水解产物以2 0 m g k g B W 的剂量连 续灌喂大鼠2 8 d ， 其体内的血浆胆固醇下降了 3 6 ， 比起以 1 0 0 m g k g B W 的剂量全部灌喂 13 - C o n g l y c i n i n具有更好的效 果 。 刘健敏等 用体外模拟试验和动物试验评价了大豆蛋 白酶解产物的降胆固醇活性。结果表明： 用 A l c a l a s e 酶水解 大豆蛋白， 其水解度为 1 8 的产物降胆固醇活性最高。动物 试验也表明： 该产物在灌喂剂量大于 1 g k g d时， 对喂饲高 脂饲料小鼠的血清总胆固醇降低作用比较显著( P 0 0 2 5 ) ， 3 0 d后降低幅度可达3 0 以上。试验结果证实大豆多肽能 抑制膳食中胆固醇的吸收， 降低血清胆固醇浓度， 并且这种 效果是长期的， 所以它可以作为一种预防和治疗高胆固醇血 症的保健食品， 具有十分广阔的开发前景。 K w o n等 从大豆球蛋白中分离得到一种四肽， 其氨基 酸序列为 L P Y P ， 并且比较了 L P Y P ， L P Y P P ， S P Y P P 3种肽的 降胆固醇效果。结果发现 ： 当 L P Y P的 N端疏水 性 L e u残基 被极性色氨酸取代时 ， 其降胆固醇活性会消失 ， C端精氨酸 残基在降低胆固醇活性方面不起决定作用。Z h o n g等 “大 孑 L 吸附树脂、 凝胶过滤色谱、 分析型 R P H P L C从大豆蛋白的 A l c a l a s e酶解产物中分离得到一种新型的降胆固醇肽， 其胆 固醇胶 束 溶 解 抑 制 率 可 达 到 9 4 3 ， 氨基 酸 序 列 为 WG A P S L ， 这种肽的平均疏水值为7 8 4 ， 和 N a g a o k a等入 从牛奶蛋白中分离得到的降胆固醇活性肽 I I A E K( 7 4 2 ) 的 疏水值很相近， 降胆固醇活性可能和疏水性 一疏水性平衡的 1 3 4 肽有关， 但是 L P Y P的疏水性非常高， 达到 1 1 0 5 。目前， 需 要分离鉴定更多的降胆固醇活性肽， 弄清楚肽的结构是如何 影响降胆固醇效果。 3 抗肥胖 近年来， 大豆多肽的抗肥胖效果越来越引起人们的广泛 关注 ， 人们普遍认为食用大豆多肽可以减少饥饿感， 增加代 谢率， 从而减轻体重， 并且在减肥过程中保持了氮的平衡 ， 保 证减肥者的体质。 基于大豆多肽 的减肥活性 ， 国内外许 多减肥食物和饮料 被开发出来。例如 ， 大豆蛋白奶的替代配方( S c a n D i e t ) 对肥 胖者体重的减轻和脂肪的减少具有一定的效果 。另外， 含有大豆蛋白酶水解产物的不含糖的咖啡， 这种饮料含有低 聚糖， 有 3 6个氨基酸残基， 和基准值相 比， 这种不含糖的 咖啡经志愿者服用 8周， 他们的体重会下降4 7 l l 。 大豆多肽也可以用在食品中作降体脂剂， 研究发现： 它会降 低人体内体脂肪， 血清甘油酯和胆 固醇 ， 但不会降低体蛋 ，r i 自 。 人们把大豆蛋白所引起的饱腹感和大鼠中的阿片类和 c c K A ( 缩胆囊素) 受体之间的不依赖作用联系起来， 研究 发现蛋白质分解为多肽时会刺激饱腹感“ 。B C o n g l y c i n i n 的胃蛋白酶水解产物通过直接作用于大鼠的肠黏膜细胞来 抑制食物摄取和胃排空， 蛋白质分解产生的多肽将从肠发出 几种饱腹感信号 ， 这些信号可能依赖于饮食蛋白质资源。 13 - C o n g l y c i n i n在下十二指肠 的水解产物会以一种剂量 依赖的方式来抑制大鼠的食物摄取 ， 这种抑制作用会在静脉 注射缩胆囊拮抗剂后消失， 缩胆囊拈抗剂是一种选择性的外 周 C C K受体拮抗剂【 t T 。 蛋白质结构 中的 A r g 残基通过直接作用 于肠 内壁细胞 ， 对 C C K的释放具有一定的作用 。考虑到A r g 和刷状缘膜 的结合力之问的关系， 含有一个 A r g的合成模型肽 ( G G G R - G G G和G G G G G G R) 没有活性； 含有 2个 A r g的合成肽， 其结 合力 取 决 于 A r g残 基 的位 置， G G R G R G G、 G R G G R G G 和 G R G G G R G能够与刷状缘膜结合， 但 G G G R R G G不能与刷状 缘膜结合。含有 3个 A r g 残基的合成肽 G R G R G R G， 具有较 强的结合力。比较 3 - C o n g l y c i n i n中几种 A r g 一 浓缩组分 ， 关于 它们结合肠内壁细胞组分的能力， p亚基上 5 1 到 6 3氨基酸 片断具有最强的结合 亲和度 ， 它会影响大 鼠对食物的摄取 。 4 抗氧化 几种氨基 酸， 如 T y r 、 Me t 、H i s、 L y s和 ， 被普遍认 为 是抗氧化剂。S a i t o 等 建立了一系列三肽结构库( 三肽文 库或结构库是指含三个氨基酸的肽) ， 用来探究多肽的抗氧 化特性， 其中一组由 1 0 8种多肽组成， 含有2个 H i s 或 rr v r 残 基， 另外一组由 1 1 4种多肽组成， 结构上与 P r o H i s H i s 相关。 三肽文库的抗氧化活性可以用几种方法观察到， 包括亚油酸 过氧化 中的抗氧化 活性 、 还原性 、 自由基清 除能力和过 氧及 维普资讯 第 2 3卷第 6期 陶红丽等： 大豆多肽生理活性研究进展 阴离子清除能力， C端含有 T r p或 T y r 的三肽具有强烈的自 由基清除能力， 但是过氧及阴离子清除能力较弱， 这解释了 为什么蛋白质分解会有种种抗氧化活性。S a i t o认为， 含有 Hi s 的多肽可以作为金属离子螯合剂， 活性氧淬灭剂和氢 自 由基清除剂， 且可以增强多肽的抗氧化活性。 在水解的过程 中， 大豆蛋 白质结构将会发生改变， 更多 氨基酸的基团会暴露出来 ， 因此， 大豆多肽比原蛋白有更强 的抗氧化活性。3 - C o n g l y c i n i n和 G l y c i n c i n酶解后， 自由基清 除能力将提高35倍。A n d r e s等 应用超滤技术回收大 豆加工厂废液中的可溶性蛋白， 然后采用商业蛋 白酶进行水 解， 主要研究超滤分离的原蛋白和其水解产物中高分子组分 的抗氧化活性。结果表明： 分子量 1 0 k D a的组分具有最高 的抗氧化活性， 和原组分相比， 水解产物表现为较强的还原 能力和自由基清除能力， 在乳状液中具有较高的抗氧化能 力。分子量在 3 0 5 0 k D a的水 解物具有 最强 的羟基 自由基 清除能力， 分子量大于 5 0 k D a的组分具有最强的总抗氧化 能力。 C h e n等 人从大豆蛋白质的水解产物中分离得到6种 具有抗氧化活性的多肽， 并鉴定了其氨基酸序列， 其结果如 下 ： ( 1 )V a l A s n P r o Hi s A s p Hi s G l n A s n ； ( 2)L e u V a l A s n P r o H i s A s p H i s G l n A s n ； ( 3 ) L e u L e u P r o H i s H i s ； ( 4 )L e u L e u P r o H i s H i s A l a A s p A l a A s p T y r ； ( 5 ) V a l l i e P r o A l a G l y T y r P r o ； ( 6 ) L e u G l n S e r G l y A s p - A l a - L e u A r g V a l P r o S e r G l y T h r T h r T y r T y r 。此后 ， C h e n等 人合成了结构上与 L e u L e u P r o H i s H i s 相关的 2 8种肽， 并研究了它们的抗氧化活 性， 指出 P H H和L H H的抗氧化活性最强。 L i u等 证实豆奶 一开菲尔具有重要的抗突变和抗氧 化活性， 并且指出发酵型豆奶在阻止突变和氧化破坏方面， 可能是较有发展前途的食品。人们需要进行更多的研究来 说明发酵产生的多肽是否在生物活性方面扮演着重要角色。 研究发现： 在脂质胶囊化的制作过程中， 大豆多肽的自由基 清除能力在抑制脂质氧化方面具有重要作用。 张莉莉等 采用酶解处理大豆蛋 白粉 ， 对酶解产物进 行葡聚糖 S e p h a d e x G 一 2 5凝胶柱层析分离， 并对其各组分分 子量分布及其抗氧化性进行了研究， 对抗氧化活性最佳的肽 段进行 氨基酸组成分析。结果显示： 大豆蛋 白酶解物经 S e p h a d e x G 2 5分离后得到了 6个肽片段 ， 其中平均链长为 4 ， 即含有 2 6个氨基酸残基 的大豆功能短肽 S P P 4 ， 对羟 自 由基具有最佳的清除作用， 清除率达到 8 0 1 3 。氨基酸组 成分析发现该组分 中缬氨酸 、 亮氨 酸 、 苯丙 氨酸 、 赖氨酸含量 较高。结果表明： 含 2 6个氨基酸残基的大豆生理活性短 肽具有较好的抗 氧化 活性 。 5 调节免疫 人们已经从大豆蛋白的水解产物中鉴定到了具有免疫 活性的大豆多肽 ， 例 如 ， 预 防 由化疗 引起脱 发 的免疫 调节肽 已经从大豆蛋白的酶解中分离得到； 大豆蛋白的胰蛋白酶解 产物中的免疫肽具有刺激超氧化阴离子( 活性氧类) 的作用， 可以引发非特定性免疫保护系统 。 陈成等 让小鼠 口服摄取不同剂量的大豆蛋 白活性 肽 ， 表明大豆蛋白活性肽可增强小鼠单核一巨噬细胞的碳 廓清功能和半数溶血值。由此可见， 大豆蛋白活性肽具有调 节免疫作用。大豆蛋白经酶解或微生物水解法可以得到 L e u L e u T y r 和 T y r T y r Me t - P r o L e u- T y r ， 只要极低剂 量 ( 0 1 tx M)就可 以通过 鼠腹膜 巨噬细胞激 活具有 吞噬作用 的绵羊红细胞，可以达到增强人体免疫功能的效果。 国明明等 研究了大豆肽对正常及免疫力低下的小鼠 免疫功能的影响。结果表明： 大豆肽不仅能增强正常小鼠免 疫功能 ， 而且能显著提高环磷酰胺致免疫功能低下小鼠的胸 腺指数， 脾脏指数， 脾淋巴细胞对 C o n A ( 刀豆蛋白 A) 的刺激 指数， 抗体生成细胞含量和血清溶血素的含量。表明大豆肽 具有提高机体免疫功能的作用。 杨晓军等 经碱提酸沉法制备大豆蛋白， 胃蛋 白酶水 解， 茚三酮法测定水解液水解度， 系统观察 了灌喂 1 m L的 5 m g m L 的大豆蛋白酶解物对大鼠免疫功能的影响。试验结 果表明： 灌喂大豆蛋白酶解物能增强大鼠免疫功能， 主要是 酶解肽的生物活性的作用结果， 并非营养调节作用的结果， 酶解物对大鼠消化代谢影响不大。 6 结论 我国大豆资源丰富， 在居民膳食中占有非常重要地位， 因此， 针对大豆多肽生理功能方面的研究具有深远的意义。 目前， 大豆多肽的生理活性研究仅限于体外或动物试验， 体 内消化是否还能保持相同的肽片段 ， 这是一个非常重要的问 题。具有生理活性的大豆多肽的作用机制仍不完全清楚， 需 要更好的理解这些生物活性肽是如何作用和如何被调节的。 另外， 和牛奶相比， 大豆源生物活性肽的研究远远不够完善， 仍然具有巨大的潜力要挖掘。 小 _重 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 维普资讯 专论与综述 2 0 0 7年第6期 2 0 0 3 ， 9 ( 1 6) ： l 2 8 9l 2 9 5 6 钟芳 ， 张晓梅 ， 麻建 国 具有 A C E抑制 活性 的大 豆肽的 R P - HP L C 分离 和结构鉴定J 食品 与机械， 2 0 0 6， 2 2 ( 6) ： 8一l 2 ， 2 9 7 P a k V V，Ko o M S，Ka s y mo v a T D ，Kw o n D YI s o l a t i o n a n d I d e n t i fi c a t i o n o f P e p t i d e s fr o m S o y l I S - Gl o tml i n wi t h Hy p o c h o l e s t e ml e mi c A c t i v i t y J C h e mi s t r y o f N a t u r a l C o m p o u n d s ， 2 0 0 5 ， 4 1 ( 6 ) ： 7 l O 7l 4 8 Du r a n t i M ，L o v a t i M R，D a n i V ，e t a 1 T h e a l p h a s u b u n i t f r o m s o y - b e a n 7 S g l o b u l i n l o we rs p l a s ma l i p i d s a n d u p r e g u l a t e s l i v e r b e t a VL DI r e c e p t o r s i n r a t s f e d a h y p e r c h o l e s t e r 0 l e mi c d i e t J J N u t r， 2 0 0 4， I 3 4 ( 6 ) ： I 3 3 4一I 3 3 9 9 刘健敏 ， 钟芳 ， 麻建国大豆蛋 白酶 解产物 降胆 同醇 活性 的初 步 研究 J 河南一 r业大学学 报 ( 自然科 学版)， 2 0 0 5 2 6 ( 3 ) ： 4 1 4 5 1 0 K wo n D Y，Oh SW ，L e e J S， e t al Ami n o a c i d s u b s t i t u t i o n o f h y p o c h o l e s t e r o l e mi c p e p t i d e o ri g i n a t e d f r o m g l y c i n i n h y d r o l y z a t e J F o o d S c i e n c e Bi o t e c h n o l o g y 2 0 0 2( I 1 )： 5 561 I l F a n g Z h o n g， Xi a o me i Z h a n g，J i a n g u o Ma，C h a r l e s FS h o e ma k e r F r a c t i o n a t i o n a n d i d e n t i fi c a t i o n o f a n o v e l h y p 0 c h 0 l e 5 l e ml e mi c p e p t i d e d e ri v e d f r o m s o y p rot e i n A l c a l a s e h y d r o l y s a t e s J F o o d R e - s e a r c h I n t e r n a t i o n a 1 ， 2 0 0 7 ， 6 ( 4 O ) ： 7 5 6 7 6 2 1 2 Na g a o k a S，Fu t a mu r a Y，Mi w a，K ，e t a 1 I d e n t i fi c a t i o n o f n o v e l h y p o ( h 0 l e s l e Ju l p e p “ d e s d e r i v e d f r o m b o v i n e m i l k b - la c t o g l o b u li n J Bi o c h e mi c a l a n d Bi o p h y s i c a l Re s e a r c h Co mmun i c a t i o n s ， 2 0 01，l ( 2 8I )：1 II 7 1 3 Al l i s o n D BG a d b u r y GS c h w a r t z I Ge t a l A n o v e l s o y - b a s e d me a l r e p l a c e me n t f o r mu l a f o r we iIg h t l o s s a mo n g o b e s e i n d i v i d u a l s：a r a n d o m i z e d c o n t r o l l e d c l i n i c a l t ri al J E u r J C l i n N u t r ， 2 0 0 3 ， 5 7 ( 4 )： 5 1 4 5 2 2 1 4 Mi u r a HNo n s u g a r b e v e r a g e s a n d d i e t c o mp o s i t i o n s c o n t a i n i n g s o y b e a n p r o t e i n h y d ro l y s a t e sP J p n K o k a i T o k k y o K o h o J P 2 0 0 2 01 0 7 6 4 A2 I 5， 2 0 0 2-0 1 - 0 4 1 5 l n a b a H S a k a i K ( ) t a A B o d y f a t d e c r e a s i n g a g e n t s c o n t a i n i n g p e p t i d e s a n d g l u t a m i n e a n d f o o d c o m p o s it i o n s c o n t a i n i n g t h e m P ： J p n Ko k a i T o k k y o Ko h o J P 2 0 02 0 2 0 3l 2 A 2 2 3 2 0 0 2 - 0l -05 1 6 P u p o v a c J An d e r s o n G HDi e t a r y p e p t i d e s i n d u c e s a t ie t y v i a c h o le - c y s t o k i n i n A a n d p e r i p h e r a l o p i o i d r e c e p t o r s i n r a t s J Nu t r ，2 0 0 2 1 3 2 ( 9) ： 2 7 7 5 2 7 8 0 1 7 Nis h i THa r a I As a n o KT o n fi t a F Th e s o y b e a n ) e t a c o n g l y c i n i n b e t a 5 l - 6 3 f r a g me n t s u p p r e s s e s a p p e t i t e b y s t i mu l a t i n g c h o l e c y s t o k i n i n r e l e a s e i n r a ts J J N u t r ， 2 0 0 3， 1 3 3 ( 8 ) ： 2 5 3 7 2 5 4 2 1 8 Ni s h i THa r a H T o mi t a F S o y b e a n b e t a c o n g l y c i n i n p e p t o n c s u p p r e s s c s f o o d i n t a k e a n d g a s t l 1 ( 。 e mp t y i n g h y i n toe a s i n g p l a s ma t h o l e c y s t o k i n i n l e v e l s i n r a t s J J N u t r ， 2 0 0 3 ， l 3 3 【 2 ) ： 3 5 2 3 5 7 1 9 S a i t o K， J i n D t t Og a wa Te l a 1 An t io x i d a t i v e p r o p e r t i e s o f t fip e p t id e l i b r a r i e s p r e p a r e d b y t h e c o m b i n a t o r i d c h e m i s t ry J J A g r i ( F o o d C h e m ， 2 0 0 3， 5 l (1 2)： 3 6 6 83 6 7 4 2 0 A n d r e s Mo u r e ，H c r mi n ia D o m i n g u e z ，J u a n C a r l o s P a r a j o A n t i o x i 一 1 3 6 2 4 d a n t p r o p e rty e s o f u hr a fih r a t i o n r e c o v e r e d s o y p rot e i n f r a c t i o n s f r o m i n d u s t ri al e fflu e n t s a n d t h e i r