菊粉对植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌生长的影响.pdf

饲料检测 菊粉对植物乳杆菌和保j 3 1=i 剥亚 乳； ： F 茵生长的影晌 吕利军 季海峰 张董燕 黄建国 格 日乐 1 北京市农林科学院畜牧兽 医研 究所 2 内蒙古农业大学动物科 学与医学学院 摘要试验初步研究菊粉对植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌生长的影响。在 M R S 培养基中 添加 1、 2、 3和 4的菊粉 ， 测定2株菌生长的 O D 6 o o 位和 p H。结果表明， 当菊粉添加量为 1时， 促进植物乳杆菌和保加 利亚乳杆菌的生长， 植物乳杆 菌生长 O D 6 o o 最高为 2 7 9 9 ， p H从 5 9 8 降到 3 5 9 ； 保加利亚乳杆菌生长 O D 6 o o 最高为 3 0 5 1 ， p H从 6 5 5降到 4 7 4 。 关键词 菊粉植物乳杆菌 保加利亚乳杆菌 中图分类号 ： $ 8 1 6 3 文献标识码 ： B 文章编号 ： 1 0 0 2 2 8 1 3 ( 2 0 0 8 ) 0 4 0 0 3 6 0 3 菊粉是植物中含有的一种特殊的天然果聚糖类 碳水化合物， 通过 3 2 ， 1 一 糖苷键连接及末端连有 一 个葡萄糖残基 的直链结构多糖 ， 其结构式是 G一 1 ， ( 2 一 F 一1 ) n 一1 ， 2 一F ， 简写为 G F n 。菊粉广泛存 在于各种植物中， 在菊芋和菊苣 中含量最高 ， 鲜质量 高达 2 0( 干质量 8 0) 。K l e e s s e n和 R o b e ff r i o d 报 道 ， 菊粉可显著促进人大肠中双歧杆菌和乳酸杆菌 生长 ， 使大肠杆菌等有害菌数量减少。K a p l a n等认 为， 果聚糖能促进乳酸菌生长 ， 抑制有害菌生长。目 前对菊粉促进饲用乳酸杆菌生 长的研究报道较少 ， 这项试验旨在探讨菊粉对植物乳杆菌和保加利亚乳 杆菌生长的影响， 为提供优质益生菌饲料添加剂提 供试验基础。 1 材料与方法 1 1 材料 1 1 1 菌种 植 物 乳 杆 菌 ( I x w t o b a c i l l u s p l a n t i c o l a)A C 一 1 1 1 1 8 ， 保加 利亚乳杆 菌 ( I x w t o b a c i l l u s b u l g a r i c ) c I C C 6 0 3 2购于中国农业微生物菌种保藏管理中心。 1 1 2 M R S培养基 蛋白胨 1 0 0 g ， 牛肉膏 1 0 0 g ， 酵母膏 5 0 g ， 葡 萄糖 2 0 0 g ， 三水合乙酸钠 5 0 g ， 柠檬酸二氨 2 0 g ， 收稿 日期 ： 2 0 O 71 1 2 8 通讯作者 ： 季海峰 36饲料研究F !i ：E D ， 瓤 K 2 H F O 4 2 0 g ， Mg s 0 4 。 7 H 2 0 0 5 8 g ， Mn S O 4 H 2 O 0 1 9 g ， 吐温 8 0 1 0 m L ， 蒸馏水 1 0 0 0 m L， p H 6 5 ， 1 2 1 o C 灭菌 2 0 m i n 。 1 1 3 菊粉 菊粉购 自内蒙古亿利生物技术有限公司。菊粉 含量 9 0， 单糖含量 1 0， 干物质 9 5， 蛋 白质 3， 大肠杆菌 0 ， 细菌总数 5 0 0 0 C F U g ， 颜 色微黄。 1 1 4 主要仪器 U V一4 8 0 2型紫外可见分光光度计、 p H 2 1 3型酸 度计、 Z H W Y一2 1 0 2型全温震荡培养箱、 Y M Q L 3 1 4 O O型立式压力蒸气灭菌锅及超净工作台等。 1 2 方法 1 2 1 生长曲线的测定 取培养 20 h的植物乳杆菌 和保加利亚乳杆菌 菌悬液 ， 接种量为 5， 分别装入盛有 4 0 m L的 M R S 培养基的三角瓶 中， 3 7下采用通气震荡( 加棉塞 ) 培养 4 8 h ， 分别在 0 、 4 、 8 、 1 2 、 1 6 、 20、 2 4 、 2 8 、 3 2 、 3 6 、 40、 4 4和 4 8 h 取适量菌液， 测定 O D 6 o o 值和 p H 。 1 2 2 培养基的改 良 在 M R S培养基原有成分不变的基础上 ， 分别添 加 1、 2、 3和 4的菊粉 ， 对照组 为 M R S培 养基 维普资讯 2 结果与分析 2 1 生长曲线的确定 采用 M R S培养基 ， 在 3 7培养条件下测定植 物乳杆菌和保加利亚乳杆菌的 O D 6 o o 值和 p H ， 结 果见表 1 、 图 1 和图 2 。2 株菌均在 2 0 h后进入稳定 生长期 ， 3 6 h时其 生长 O D 6 o o 值均达到最高 ， 分 别 为2 4 6 1 和 2 8 6 4 ； 从 p H变化情况看 ， 2 株菌的 p H均 呈下降趋势 ， 植物乳杆菌 的 p H低于保加利亚乳 杆 菌 ， 说明植物乳杆菌的产酸效果更好 。 表 1 植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌生长 O D o o 值和 p H 3 2 l 善 吕 1 O 时间 h 图 l 3 7条件下 2株菌生长的 O D o o 值 时 I 可 h 图 2 3 7 o C 条件下 2株菌生长的 p H 2 2 培养基的改良 在 MR S培养基中添加不同比例 的菊粉 ， 3 7条 件下培养 4 8 h ， 测定植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌 生长 O D 6 o o m n 值和 p H， 结果见表 2 、 表 3 、 图 3和图 4 。 由表 2和图 3可知 ， 5组培养基 中植物乳杆菌 均在 2 0 h进 入 稳 定 生 长 期 ， 1菊 粉 添 加 组 的 O D 6 o o 值最 高可达 2 7 9 9 ， 高于不 加 菊粉 组 的 饲料检测 2 4 6 1 ， 但随着菊粉添加量的逐步增加 ， O D 6 o o m n 值 逐 渐下降 ， 2、 3和 4菊粉添加组的 O D 6 o o m n 值均 低于不加菊粉组。从 p H变化情况看 ， 1菊粉添加 组在 3 6 h 时， p H达到最低值为 3 5 9 ， 低于不加菊粉 组的 p H。 2 日 1 吕 O 时间 h 图 3 添加菊粉后植物 乳杆菌 生长 O D o o 值 时 I 司 h 图 4 添加菊 粉后保 加利亚乳杆菌生长 O D o o 值 由表 3和图 4可知 ， 保加利亚乳杆菌在 5组菊 粉添加组 中生长 良好 ， 其 中 1和 2菊粉添加组 的 O D 6 o o m n 值均高于不加菊粉组 ， 效果最好的为 1 菊粉添加组 ， 其 O D 6 o o 值于 3 6 h 达到最高值3 0 5 1 。 随着菊粉添加量的增加， O D 6o o 值逐渐下降， 3和 4菊粉添 加组 的 O D 6 o o m n 值均 低 于不加菊 粉组 。 从 p H变化情况看， 2菊粉添加组于2 8 h 降到最低 值 4 6 2 ， 但保加利亚乳杆菌在 5 组液体培养基中 p H 下 降不明显 。 3 讨论 乳酸菌通过发酵产生的有机酸 、 特殊酶系及细 菌表面成分等物质在体 内发挥许多生理功能。大量 研究表明， 乳酸菌能抑制肠道 内腐败菌生长 ； 调节 胃 肠道正常菌群， 维持微生态平衡； 提高食物消化率和 生物效价； 降低血清胆固醇水平， 控制内毒素； 提高 饲料研究F E E D R K S I U , C t t N O 4 ， 2 0 0 8 3 7 3 2 l O 。 。 口口0 维普资讯 饲料检测 表 2 添加菊粉后植物乳杆菌生长 O D 6 0 0 值和 p H 机体免疫力等。P i e t r e s 等报道 ， 乳酸菌作 为饲料添 加剂具有增质量 、 提高饲料转化率 、 预防疾病及降低 病死率等效果。另外 ， 菊粉中含有大量果聚糖 ， 能促 进乳酸杆菌生长。顾宪红等在断奶仔猪日 粮中添加 1菊粉 能促进 仔猪 盲肠 内乳 酸杆 菌生 长 ( P 0 0 5 ) 。E d u a r d等分别 在培养基 中加 入 0 ， 0 5， 1 0和 2 0菊粉， 结果发现 ， 菊粉能促进乳酸杆 菌 T A 4 3和肠球菌 P s 9 9的生长 ， O D 6 o o 值随着菊粉 含量的增加而增加 ， 2时达到最高值。张董燕等 以菊 粉替 代 部 分葡 萄 糖 ， 使 MR S培 养 基碳 源 占 2， 研究 菊粉对 戊糖 乳杆 菌 的影 响， 结 果发 现 ， 3的菊粉添加量效果最好。张帆等报道， 用菊粉 代替培养基中部分葡萄糖， 嗜酸乳杆菌的生长得到 明显提高， MR S培养基中葡萄糖与菊粉 的质量 比为 1 ： 1 时， 嗜酸乳杆菌 的生物量及酸度得到提高。这项 试验研究菊粉对植物乳杆菌和保加利亚乳杆菌生长 的影响， 结果表明， 1的菊粉添加量均能促进植物 乳杆菌和保加利亚乳杆菌的生长 ， 但菊粉添加量并 不是越多越好。菊粉的最佳添加量可能因菌种不同 和添加方法不同而有所差异 ， 其机制有待进一步探 讨 。 参考文献 1 E d e lm a n J T h e m e c h a n i s m o f f r u c t o s a n m e t a b o l is m in h i g h e r p l an t s a s e x e mp l i f e d i n He l i an t hU S t u be ms u s 3 8饲料研究H 猕 一 1 _ N e w P h y t o l o g i s t ， 1 9 6 8 ( 6 7 ) ： 5 1 75 3 1 2 j K l e e s s e n B， S y k u r a B ， Z u n f t B ， e t a1E ff e c t s o f i n u l i n an d l a c t o s e o n f e c a l mi c r o fl o m ，mi c r o b i al a c t i v i t y and b o w e l h a b i t i n e l d e r l y c o n s t i p a t e d p e r son s A m e r i c an J o u rnal o f C l i n i c al N u t r i t i o n ， 1 9 9 7( 6 5 ) ： 1 3 9 71 4 0 2 3 J R o b e r f r i o d M B， V a J 1 L 0 o J A E ， G i b s o n G R The b i fid o g e n i c n a t u r e o f c h i c o r y i n u l i n an d i t s h y d r o l y s i s p r o d u c t s J N u t r ， 1 9 9 8 ( 1 2 8 ) ： 1 1 1 9 4 K a p l an H，H u t k i n s R， Wang X， e t a1 F e r m e n t a ti o n o f f r u c t o o l i g o s a c c h a r i d e s b y l a c t i c a c i d b a c t e r i a an d b i fi d o b a c t e r i a Ap p l i ed and E n v i r o n me n t Mi c r o b i o l o g Y ，2 0 0 0 ， 6 6 ( 6 ) ： 2 6 8 2 2 6 8 4 5 郑坚 乳酸菌对乳脂的影响 黄岗师范学院学报， 2 0 0 2 ( 3 ) ： 3 7 3 9 6 J P i e t r e s M，S K r a b a B E f lf e c t o f e n v i r o n m e n t a l f a c t o r s o n t he q u ali t y